Page 29 - 《中国药房》2024年9期
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and Fis1 in hippocampal tissue were significantly increased (P<0.01). The results of transmission electron microscopy showed that
          the  mitochondria  in  the  hippocampal  tissue  were  significantly  swollen,  with  a  large  number  of  broken  and  reduced  cristae,  and
          some  mitochondria  had  myeloid  changes  in  the  membrane.  Compared  with  the  model  group,  the  levels/contents  of  the  above
          indicators  in  rats  of  each  administration  group  showed  varying  degrees  of  reversal,  and  most  of  the  differences  were  statistically
          significant (P<0.05  or  P<0.01);  the  degree  of  mitochondrial  swelling  in  the  hippocampal  tissue  was  reduced,  with  a  small
          amount  of  broken  and  reduced  cristae,  fuzzy  fractures  appeared  in  local  areas  of  the  rough  endoplasmic  reticulum.
          CONCLUSIONS  Naozhenning  granules  can  improve  the  motor  exploration,  learning  and  memory  abilities  of  MCC  model  rats,
          repair  neuronal  damage,  and  exert  neuroprotective  effects.  Its  mechanism  may  be  related  to  activating  Wnt/β -catenin  signaling
          pathway,maintaining the balance of mitochondrial division and fusion,and promoting mitochondrial biosynthesis.
          KEYWORDS    Naozhenning  granules;  multiple  cerebral  concussion;  mitochondrial;  Wnt/β-catenin  signaling  pathway;  hippocampal
          tissue; neuroprotection



              创伤性颅脑损伤是由于机械外力作用于颅脑内容                          纳(苏州)生物科技有限公司],ImageQuant LAS 500型一
          物导致脑组织结构损伤或功能中断,从而引起一系列分                           体化成像仪(美国GE公司)。
          子损伤的连锁反应        [1―2] 。脑震荡属于轻型创伤性颅脑损               1.2 主要药品与试剂
          伤,主要表现为记忆下降、情志异常、认知障碍等症状,                              脑震宁颗粒(批号 20200701)购自山西振东安特生
          多呈现出脑组织挫伤、神经性血管损伤、颅内压升高、血                          物制药有限公司;吡拉西坦片(批号4201008,规格0.4 g)
                                          [3]
          脑屏障破坏等原发或继发性病理特点 。目前脑震荡的                           购自东北制药集团沈阳第一制药有限公司;异氟烷(批
                          [4]
          发病率在逐年增高 ,严重影响患者的日常生活,并给社                          号 20221102)购自深圳市瑞沃德生命科技有限公司;
          会带来巨大的经济损失,已经成为一个亟待解决的公共                           ATP 含量检测试剂盒(批号 20230329)购自南京建成生
          卫生问题。                                              物工程研究所;电镜固定液、组织自发荧光淬灭剂、
              脑震宁颗粒由生地黄、当归、丹参、丹皮、川芎、地                        DAPI染色试剂(批号分别为G1102、G1221、G1012)均购
          龙、炒酸枣仁、柏子仁、茯苓、陈皮、竹茹11味药组成,共
                                                             自武汉赛维尔生物科技有限公司;BCA蛋白浓度测定试
          奏活血通络、宁心安神、除烦止呕之功效。有研究表明,
                                                             剂盒、辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔IgG抗体(批
          脑震宁颗粒对于脑震荡、创伤性综合征、神经血管性疾
                                                             号分别为 18C13B46、BST15D07AE54)均购自武汉博士
          病等所致的头痛头晕相关症状有很好的疗效 。本课题
                                                [5]
                                                             德生物工程有限公司;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝
          组前期研究发现,脑震宁颗粒可以增加线粒体三磷酸腺
                                                             胶电泳(SDS-PAGE)凝胶试剂盒(批号 BB1207)购自陕
          苷(adenosine triphosphate,ATP)和呼吸链复合物Ⅰ的含
                                                             西中晖赫彩生物医药科技有限公司;兔源过氧化物酶体
          量,改善线粒体结构和功能,从而促进神经元的修复再
                                                             增殖物激活受体 γ 共激活因子 1α(peroxisome prolife-
          生 [6―7] ,但其具体的作用机制尚未完全明确。Wnt信号通
                                                             rator  activated  receptor  gamma  coactivator-1α,PGC-1α)
          路可以促进脑组织的神经发生和保护,并与线粒体分
                                                             单克隆抗体、兔源核呼吸因子 1(nuclear respiratory fac‐
          布、代谢及相关动力学改变密切相关 。因此,本实验以
                                         [8]
                                                             tor-1,NRF-1)单克隆抗体、兔源线粒体转录因子A(mito‐
          Wnt信号通路为出发点,探究脑震宁颗粒调节三重脑震
                                                             chondrial transcription factor A,TFAM)单克隆抗体、兔源
          荡(multiple cerebral concussion,MCC)模型大鼠海马组
                                                             Wnt-3a 多克隆抗体、兔源 β-连环蛋白(β-catenin)单克隆
          织线粒体能量代谢的作用机制,以期为脑震宁颗粒的临
                                                             抗体、兔源β-肌动蛋白(β-actin)单克隆抗体(批号分别为
          床应用提供一定的科学依据。
          1 材料                                               3523010313、 0206040201、 5500022039、 00084249、
          1.1 主要仪器                                           4000000136、3500026050)均购自武汉爱博泰克生物科
              本研究所用主要仪器有:XR-XZ301 型旷场及分析                     技有限公司;兔源动力蛋白相关蛋白 1(dynamin-related
          系统(上海欣软信息科技有限公司),R540IE型呼吸麻醉                       protein 1,Drp1)单克隆抗体、兔源线粒体裂变蛋白1(mi‐
          机(深圳市瑞沃德生命科技有限公司),UC7型超薄切片                         tochondrial fission protein 1,Fis1)单克隆抗体、兔源线粒
          机(德国 Leica 公司),HT7800 型透射电子显微镜(日本                  体融合蛋白 1(mitochondrial fusion 1,Mfn1)单克隆抗
          株式会社日立制作所),Pannoramic MIDI 型扫描仪(济                  体 、兔 源 视 神 经 萎 缩 蛋 白 1(optic  atrophy  protein  1,
          南丹吉尔电子有限公司),KZ-Ⅲ-FP型研磨仪(武汉赛维                       Opa1)单克隆抗体(批号分别为 12957-1-AP、10956-1-
          尔生物科技有限公司),A51119600C 型酶标仪(瑞士                      AP、13798-1-AP、27733-1-AP)均购自武汉三鹰生物技术
          SGS 集团),Mini MP4 型电泳仪、Mini TBT 型转印仪[莫              有限公司。


          中国药房  2024年第35卷第9期                                                China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 9    · 1051 ·
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