Page 36 - 《中国药房》2024年7期
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现代研究表明，小儿热速清口服液具有抗病毒、解                          国食品药品检定研究院；甲醇、乙腈为色谱纯，乙醇、磷
                                           [1]
          热、抗炎、镇咳、祛痰、增强免疫等作用 ，其质量标准收                          酸为分析纯，水为超纯水。
          载于2020年版《中国药典》（一部） ，但仅规定了黄芩苷                        2 方法与结果
                                       [2]
          的含量测定。由于小儿热速清口服液组方药味多、化学                            2.1 小儿热速清口服液HPLC指纹图谱的建立
          成分复杂，单一指标的定量分析难以用于全面控制和评                            2.1.1 色谱条件
          价该组方的质量。随着中药种植业的快速发展，中药质                                以 Venusil MP C18 （4.6 mm×250 mm，5 μm）为色谱
          量的参差不齐使得临床用药的安全性和有效性受到直                             柱；以乙腈（A）-0.1%磷酸溶液（B）为流动相进行梯度洗
          接影响。中药指纹图谱可反映中药及制剂所含化学成                             脱（0～5 min，10%A；5～30 min，10%A→20%A；30～40
          分的整体情况，对评估其质量优劣、真伪及保证质量的                            min，20%A；40～50  min，20%A→40%A；50～65  min，
          一致性、稳定性具有重要作用。基于此，本研究采用高                            40%A；65～80 min，45%A→90%A）；流速为 1.0 mL/min；
          效 液 相 色 谱（high  performance  liquid  chromatography，  检测波长为210 nm；柱温为30 ℃；进样量为10 μL。
          HPLC）法对小儿热速清口服液进行指纹图谱研究，并综                          2.1.2 混合对照品溶液的制备
          合考虑图谱结果和各成分专属性，选定（R，S）告依春、                              精密称取（R，S）告依春、3，5-二-O-咖啡酰奎宁酸、
          3，5-二-O-咖啡酰奎宁酸、绿原酸、葛根素、柴胡皂苷 d、                      绿原酸、葛根素、柴胡皂苷a、柴胡皂苷d、连翘苷、连翘酯
          连翘苷、连翘酯苷 A、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、大黄                          苷 A、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、大黄素、大
          素、大黄酚作为指标成分并进行含量测定，以期为小儿                            黄酚对照品各适量，分别置于棕色容量瓶中，加甲醇溶
          热速清口服液的质量标准提升提供参考。                                  解并稀释至刻度，摇匀，制成质量浓度分别为 840.2、
          1 材料                                                1 167.4、1 123.1、1 064.4、624.3、706.2、1 388.6、1 021.1、
          1.1 主要仪器                                            1 541.5、1 562.3、974.2、908.6、740.3、645.3 μg/mL的单一
              本研究所用主要仪器包括 1260 Infinity Ⅱ型 HPLC               对照品贮备液。分别精密量取上述单一对照品贮备液
          仪及配备的 G7115A 型二极管阵列检测器和 Chemsta‐                    1.0、10.0、10.0、10.0、2.5、5.0、2.5、10.0、20.0、10.0、10.0、
          tion色谱工作站[安捷伦科技（中国）有限公司]、XSE205DU                   5.0、1.0、2.0 mL，置同一100 mL棕色量瓶中，加入甲醇定
          型电子分析天平[瑞士梅特勒-托利多（上海）公司]、                           容至刻度，摇匀，即得上述各成分质量浓度分别为 8.4、
          Arium comfort Ⅱ型超纯水仪（德国Sartorius公司）。                116.7、112.3、106.4、15.6、35.3、34.7、102.1、308.3、156.2、
          1.2 主要药品与试剂                                         97.4、45.4、7.4、12.9 μg/mL的混合对照品溶液。
              13批（编号S1～S13）小儿热速清口服液[批号221205、                 2.1.3 供试品溶液的制备
          221058、200558、220120、210984、210329、201192、210103、       精密量取本品2.0 mL，置于100 mL分液漏斗中，用
          201080、220107、210546、220268、201048，规格为每支装           乙醚振摇提取 2 次，每次 10 mL；弃去乙醚液，水液通过
          10 mL（每 1 mL 相当于饮片 1.162 5 g）]购自吉林一正药               D101 型大孔吸附树脂柱（内径约为 1.5 cm，柱高 12 cm）
          业集团有限公司；柴胡（批号 120992-201509）、黄芩（批                   以1.5 mL/min的流速用100 mL水洗脱，弃去洗脱液，再
          号 120955-201810）、板蓝根（批号 121177-202109）、金银           用 40% 乙醇洗脱，弃去 10 mL 洗脱液，收集 40% 乙醇洗
          花（批号 121060-201608）、连翘（批号 120908-201817）、           脱液于50 mL容量瓶至刻度，摇匀，用0.45 μm微孔滤膜
          葛 根（批 号 121551-201805）、水 牛 角（批 号 121627-            滤过，取续滤液即得。
          202002）和大黄（批号 120902-201912）对照药材，以及                 2.1.4 HPLC指纹图谱的建立及分析
         （R，S）告依春（批号 111753-202007，纯度 100%）、3，5-                 （1）精密度试验：按“2.1.3”项下方法制备供试品溶
          二-O-咖啡酰奎宁酸（批号111782-202208，纯度95.9%）、                液（批号 221205），按“2.1.1”项下色谱条件连续进样 6
          绿原酸（批号110753-202018，纯度96.1%）、葛根素（批号                 次，记录色谱图，选择黄芩苷色谱峰为参照（该峰分离度
          110752-202217，纯度 96.8%）、柴胡皂苷 a（批号 110777-           好，峰面积较大，下同），计算得各共有峰相对保留时间
          21912，纯度94.8%）、柴胡皂苷d（批号110778-201912，纯              的RSD≤0.10%，相对峰面积的RSD≤2.0%（n＝6），表明
          度 96.3%）、连翘苷（批号 110821-202117，纯度 94.9%）、            该方法精密度良好。
          连翘酯苷 A（批号 111810-202108，纯度 96.2%）、黄芩苷                  （2）稳定性试验：按“2.1.3”项下方法制备供试品溶
         （批 号 110715-202122，纯 度 94.2%）、汉 黄 芩 苷（批 号            液（批号221205），于室温放置0、4、8、12、18、24、36 h后，
          112002-201702，纯 度 98.5%）、黄 芩 素（批 号 111595-          按“2.1.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图，以黄芩苷色
          201808，纯度97.9%）、汉黄芩素（批号111515-202207，纯              谱峰为参照，计算得各共有峰相对保留时间的 RSD≤
          度100%）、大黄素（批号110756-201903，纯度96.0%）、大               0.13%，相对峰面积的RSD≤2.5%（n＝7），表明供试品溶
          黄酚（批号110796-201922，纯度99.4%）对照品均购自中                  液在室温下放置36 h内稳定性良好。


          · 802 ·    China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 7                               中国药房  2024年第35卷第7期
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