Page 62 - 《中国药房》2024年6期

proteins of HIF-1α/VEGF/VEGFR2 signaling pathway in the wound tissue of rats were also detected in each group. RESULTS The
MVD， the expression of collagen Ⅰ and FN in the wound tissue， and the levels of IL-6 and IL-2 in serum and wound tissue of
rats increased significantly in the model group， compared to the control group （P＜0.05）， while the serum levels of VEGF， Ang-
Ⅰ and Ang-Ⅱ decreased significantly （P＜0.05）. The wound healing rate， the MVD in wound tissue， the serum levels of VEGF，
Ang-Ⅰ and Ang-Ⅱ， the expressions of collagen Ⅰ and FN in the wound tissue， and protein expressions of HIF-1α， VEGF and
VEGFR2 in the PNS low-dose and high-dose groups increased significantly， compared to the model group （P＜0.05）， while the
levels of IL-6 and IL-2 in serum and wound tissue decreased significantly （P＜0.05）； the high-dose PNS had a stronger effect （P＜
0.05）. 2ME2 could weaken the effect of PNS on above indicators of rats after anal fistula surgery （P＜0.05）. CONCLUSIONS
PNS can promote the production of angiogenic factors and inhibit the production of pro-inflammatory factors， thereby promoting
wound healing in rats after anal fistula surgery. The above effects are related to the activation of HIF-1α/VEGF/VEGFR2 signaling
pathway.
KEYWORDS Panax notoginseng saponins； anal fistula； HIF-1α/VEGF/VEGFR2 signaling pathway； wound healing

肛瘘可引发患者肛周疼痛、瘙痒、流脓等，难以治愈 冻切片机（常州市郝思琳医用仪器有限公司），HG13-
且复发率较高。目前，手术是肛瘘临床治疗的主要手 XSP-BM-1C 型生物显微镜（北京北信创展自动化技术
段，但由于其是开放式操作，创面易被粪便污染而导致 有限公司），TE62型全湿电转印仪、EPS1001型电泳仪电
愈合困难，给患者造成极大的痛苦和生活上的不便，因 源、SE400 型垂直电泳仪、LAS600 型凝胶成像分析系统
此促使肛瘘患者术后创面尽快愈合非常重要。研究指 （美国Amersham Pharmacia GE公司）等。
出，影响肛瘘术后创面愈合的关键是改善创面血液运行 1.2 主要药品与试剂
和炎症反应，促进血管形成并抑制炎症可有效促使创面 PNS（即血塞通注射液，批号86905729000952，规格
血液循环和表皮修复，加快肛瘘患者术后创面愈合速 2 mL∶100 mg）购自云南植物药业有限公司；2ME2 对照
度 [1―2] 。缺氧诱导因子 1α（hypoxia-inducible factor-1α， 品（批号 HB1684026，纯度＞98%）购自上海惠诚生物科
HIF-1α）作为一种炎症调控因子，可通过调控血管内皮 技有限公司；大鼠 VEGF、血管生成素Ⅰ（angiopoietin-
生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）/血 Ⅰ，Ang-Ⅰ）、Ang-Ⅱ、白细胞介素6（interleukin-6，IL-6）、
管内皮生长因子受体 2（vascular endothelial growth fac‐ IL-2 酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒均购自上海研
tor receptor-2，VEGFR2）信号通路来调节炎症发生和血 尊生物科技有限公司；兔源 CD31、纤维连接蛋白（fibro‐
管形成过程，在创面愈合中发挥重要作用；此外，HIF- nectin，FN）、VEGF、VEGFR2、HIF-1α、胶原蛋白Ⅰ（col‐
1α/VEGF/VEGFR2 信号通路受阻可导致糖尿病患者创 lagen Ⅰ）、甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）一抗和辣根
面愈合延迟，而激活该信号通路则可通过发挥促血管生 过氧化物酶标记的小鼠抗兔 IgG 二抗（批号分别为
成、抗菌、抗氧化和抗炎等作用来加快糖尿病模型动物 77699、44800、50661、9698、14179、91144、2118、5127）均
皮肤创面愈合 [3―4] 。由此本课题组推测，激活 HIF-1α/ 购自美国CST公司；通用SP免疫组织化学试剂盒（批号
VEGF/VEGFR2信号通路可能是改善肛瘘患者术后创面 SP0041）购自北京索莱宝科技有限公司。
愈合的重要途径。 1.3 实验菌株和动物
三七总皂苷（Panax notoginseng saponins，PNS）是中 大肠埃希菌[编号 CMCC（B）44102]购自南京便诊
药三七的主要活性成分，具有良好的抗炎作用，可促进 生物科技有限公司。SPF 级健康 SD 大鼠，雄性，体重
成纤维细胞增殖和血管生成，提升人脐静脉内皮细胞活 200～240 g，购自河北省实验动物中心[动物生产许可证
力和成管能力，并可通过减少炎症细胞浸润、促炎因子 号 SCXK（冀）2021-002]。所有大鼠均饲养于标准动物
释放和促进新表皮形成来加快糖尿病性皮肤溃疡模型 饲养笼内（每笼不超过5只），饲养条件如下：屏障环境，
动物的创面愈合 [5―6] 。考虑到HIF-1α是三七皂苷的潜在 温度21～25 ℃，相对湿度50%～60%，每12 h明暗交替。
[7]
作用靶点之一 ，本研究拟构建肛瘘术后大鼠模型，以 本研究方案经河北省第八人民医院医学伦理委员会批
PNS 和 HIF-1α 抑制剂 2-甲氧基雌二醇（2-methoxyestra‐ 准，编号为（2021）科伦审第（24）号。
diol，2ME2）为干预物，探究PNS对模型大鼠创面愈合的 2 方法
影响，并基于HIF-1α/VEGF/VEGFR2信号通路探讨其潜 2.1 造模、分组与给药
在机制，旨在为寻找促进肛瘘患者术后创面愈合的新方 参照文献方法 建立大鼠肛瘘术后模型：取 SD 大
[8]
法提供参考。 鼠，腹腔注射戊巴比妥钠（40 mg/kg）麻醉后，去除背部毛
1 材料 发并消毒备皮，剪一直径为 1 cm 的圆形创面，止血后滴
1.1 主要仪器 加3×10 cfu/mL的大肠埃希菌菌液（以无菌生理盐水制
8
本文所用主要仪器包括SP-Max2300A2型全自动酶 备）0.1 mL，缝合创面；48 h后，拆除缝线，若创面有脓性
标仪（上海酶联生物科技有限公司），AST560-580 型冷 分泌物即为造模成功。将造模成功的大鼠分为模型组、

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