Page 104 - 《中国药房》2024年4期

2.4.1 专属性考察 （n＝6）；批间精密度的 RSD%为 1.51%～8.08%（n＝6）；
分别取 6 份不同来源的人空白血浆样本，加入乙腈 准确度为－6.81%～1.55%（n＝6），表明该方法的精密
200 μL，按“2.3”项下方法处理后，再按“2.1”项下色谱与 度、准确度均较好。

质谱条件进样测定，记录空白色谱图（图 1A）。取 2.4.4 残留效应
“2.2.3”项下质量浓度为 0.5 μg/mL 的标准曲线工作液 取“2.2.3”项下质量浓度为5 000 ng/mL的标准曲线
10 μL，加入空白血浆90 μL，涡旋混匀30 s，加入“2.2.2” 溶液，按“2.3”项下方法处理后，按“2.1”项下色谱与质谱
项下内标溶液 200 μL，按“2.3”项下方法处理后，再按 条件进样测定，每个样品检测后再随行检测1个空白血
浆样品。结果显示，空白样品中均未检测到丙泊酚及内
“2.1”项下色谱与质谱条件进样测定，记录色谱图（图
标，表明检测高质量浓度样品后，仪器无残留效应。
1B）。取患者血浆样品 100 μL，按“2.3”项下方法处理
2.4.5 提取回收率和基质效应
后，再按“2.1”项下色谱与质谱条件进样测定，记录色谱
取“2.2.1”项下质控储备液，用甲醇-水溶液稀释，得
图（图1C）。结果显示，空白血浆样品色谱图中均无内源
质量浓度分别为 80、400、4 000 ng/mL 的溶液 A，每个浓
性干扰峰。
度平行6份。取空白血浆，用2倍体积乙腈沉淀蛋白后，
2.4.2 线性关系及定量下限考察
以 12 000 r/min 离心 30 min，取上清液，然后将“2.2.1”项
取“2.2.3”项下标准曲线溶液，按“2.3”项下方法处理
下质控储备液用上述上清液稀释，得质量浓度为 80、
后，再按“2.1”项下色谱与质谱条件进样测定。以丙泊酚
400、4 000 ng/mL 的溶液 B，每个浓度平行 6 份。按
质量浓度为横坐标（x）、丙泊酚与内标响应值之比为纵
“2.2.4”项下方法制备质量浓度为 80、400、4 000 ng/mL
2
坐标（y），采用加权最小二乘法（权重为1/x）进行回归方
的溶液C，每个浓度平行6份。将溶液A、B、C按“2.3”项
程拟合，得丙泊酚的回归方程为 y＝0.001 93x+0.024 20
下方法处理后，再按“2.1”项下色谱与质谱条件进样测
（r＝0.995 0），表明丙泊酚检测质量浓度在 50～5 000 定，分别记录峰面积A、B、C。基质效应＝峰面积B/峰面
ng/mL范围内线性关系良好。定量下限为50 ng/mL。 积 A×100%；提取回收率＝峰面积 C/峰面积 B×100%。
2.4.3 精密度与准确度试验 结果显示，基质效应为 97.93%～101.73%，RSD 均小于
取“2.2.4”项下质控样品溶液，每个浓度平行6份，按 5.16%（n＝6）；提取回收率为 89.80%～93.73%，RSD 均
“2.3”项下方法处理后，再按“2.1”项下色谱与质谱条件 小于3.25%（n＝6）。
进样测定，考察批内精密度；连续测定 3 d，考察批间精 2.4.6 稳定性试验
密度，并以实测质量浓度与理论质量浓度的偏差作为准 取“2.2.4”项下质量浓度分别为80、400、4 000 ng/mL
确度。结果显示，批内精密度的 RSD 为 3.64%～4.71% 的质控样品溶液，每个浓度平行6份，分别于室温条件下

6.29 6.29
丙泊酚
900 5 000 丙泊酚 4.5×10 4 丙泊酚
800 4 500 4.0×10 4
700 4 000 3.5×10 4 4
3 500
600
3.0×10
intensity/cps 500 intensity/cps 3 000 intensity/cps 2.5×10 4 4
2 500
2.0×10
400
2 000
300
1.0×10
200 1 500 1.5×10 4 4
1 000
100 500 5 000
0 0 0
0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0
t/min t/min t/min
5.83 5.83
内标 4.0×10 5 内标 4.0×10 5 内标
4 500
3.5×10 5 3.5×10 5
4 000
3 500 3.0×10 5 3.0×10 5
3 000 2.5×10 5 2.5×10 5
intensity/cps 2 500 intensity/cps 2.0×10 5 5 intensity/cps 2.0×10 5 5
2 000
1.5×10
1.5×10
1 500
1.0×10 5 1.0×10 5
1 000
500 5.0×10 4 5.0×10 4
0 0 0
0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0
t/min t/min t/min
A.空白血浆 B.50 ng/mL血浆样品+内标 C.患者血浆样品
图1 丙泊酚及内标的典型MRM图
· 478 · China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 4 中国药房 2024年第35卷第4期