Page 52 - 《中国药房》2024年2期

2.5 对照品溶液的制备 2.7 分析方法
分别精密称取“1.2”项下各对照品适量，置于10 mL 取血清供试品溶液、粪便供试品溶液、尿液供试品
容量瓶中，加甲醇溶解并定容，混匀，经 0.22 μm 微孔滤 溶液、止得咳颗粒药液，按“2.6”项下分析条件进样。采
膜滤过，取续滤液，即得适宜质量浓度的单一对照品 用 MS-DIAL 软件对实验数据进行分析处理，将得到的
溶液。 数据结果与MSBank、KEGG数据库比对，对各个色谱峰
2.6 分析条件 进行初步推测，得到化合物的准分子离子峰和二级碎片
2.6.1 色谱条件 离子、分子式等信息，结合相关文献及质谱裂解规律，进
以 Waters HSS T3（100 mm×2.1 mm，1.8 μm）为色
一步对化合物进行推测及鉴定。
谱柱；正离子模式下流动相为 0.1% 甲酸溶液（A）和含 3 结果
0.1% 甲酸的甲醇溶液（B），负离子模式下流动相为 10
正负离子模式下得到的总离子流图见图 1、图 2（正
mmol/L 甲酸铵溶液（A）和含 10 mmol/L 甲酸铵的 95%
负离子模式下空白样品的总离子流图略）。通过与止得
甲醇溶液（B），进行梯度洗脱（0～1 min，90%A；1～13
咳颗粒药液以及空白组样品进行对比，并结合对照品相
min，90%A→2%A；13～18 min，2%A；18～18.5 min，
关信息后发现，止得咳颗粒中共鉴定出31个化学成分，
2%A→90%A；18.5～20 min，90%A）；流速为0.3 mL/min；
包含17个黄酮及其苷类化合物、7个有机酸类化合物、3
柱温为35 ℃；进样量为2 μL。
2.6.2 质谱条件 个皂苷类化合物、4 个其他类化合物（表 1）。大鼠的血
采用电喷雾离子源（electron spray ionization，ESI）， 清、尿液和粪便样品共鉴定出 16 个原型成分和 11 个代
选择正、负离子模式分开检测，一级分辨率为 70 000 谢产物。其中，血清样品中鉴定出 8 个原型成分和 4 个
FWHM，二级分辨率为 17 500 FWHM；离子源喷雾电压 代谢产物；尿液样品中鉴定出10个原型成分和7个代谢
分别为 3.8、3.2 kV；毛细管温度为 300 ℃；鞘气流速为 产物；粪便样品中鉴定出 8 个原型成分和 5 个代谢产
40 Arb；雾化器温度为350 ℃。 物（表2）。
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80 80
相对丰度/% 60 相对丰度/% 60
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0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
时间/min 时间/min
A.给药组血清样品 B.给药组尿液样品
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时间/min 时间/min
C.给药组粪便样品 D.止得咳颗粒药液
图1 正离子模式下给药组样品及止得咳颗粒药液的总离子流图

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A.给药组血清样品 B.给药组尿液样品
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C.给药组粪便样品 D.止得咳颗粒药液
图2 负离子模式下给药组样品及止得咳颗粒药液的总离子流图

· 174 · China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 2 中国药房 2024年第35卷第2期