Page 45 - 《中国药房》2024年1期
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may be associated with affecting amino acid metabolic pathways such as tryptophan and tyrosine.
          KEYWORDS    Mongolian medicine; Sugemule-4; insomnia; metabolomics; amino acid metabolism


              失眠是指睡眠的发生和维持发生了障碍,是一种主                         荜茇(批号 20101202)药材均购自内蒙古衍嘉医药有限
                                                    [1]
          观体验,即睡眠的质量或时间不能满足正常需要 。在                           公司,炒酸枣仁(批号20190301)饮片购自安国宏仁药业
                                                [2]
          普通人群中,失眠的患病率约为 10%~15% 。目前国                        有限公司,上述药材均由鄂尔多斯市第四人民医院蒙医
          内外治疗失眠的常用药物有苯二氮                  类药物和非苯二           查干夫教授鉴定为真品;地西泮片(批号20200817,规格
          氮   类药物,但大多具有耐受性、成瘾性、戒断症状等不                        2.5 mg/片)购自山东信谊制药有限公司;PCPA(批号
                [3]
          良反应 。与化学药相比,中药与民族药治疗失眠的依                           SHBL0057)购自美国 Sigma 公司;碳酸盐缓冲液(批号
          赖性小、副作用少、疗效满意,故而成为临床治疗失眠的                          0713A21)购自安徽雷根生物技术有限公司;2% 聚山梨
                      [4]
          重要替代疗法 。                                           酯80(批号EZ7890D114)购自上海赛格生物科技有限公
              苏格木勒-3 是蒙医传统方,出自蒙医经典著作《四                       司;实验用水为自制蒸馏水。
          部医典》。本研究中的苏格木勒-4是在苏格木勒-3基础                         1.3 动物
          上的改良方,即在原方——白豆蔻 15 g、白苣胜 10 g、荜                        本研究所用动物为 SPF 级健康成年雄性 SD 大鼠,
          茇 5 g 的基础上,添加了 15 g 炒酸枣仁。方中白豆蔻味                    共24只,体重(200±20) g,购自斯贝福(北京)生物技术
          苦、辛,性温,酸枣仁味甘、性平,为镇赫依(指一类以疲                         有限公司,动物生产许可证号为 SCXK(京)2019-0010。
          惫、失眠、精神紊乱等为主要症状的临床证候)主药;白                          动物饲养室温度为(25±3) ℃,相对湿度为 45% 左右,
          苣胜味甘,性平,为镇赫依辅助药;加配调理体素药荜                           自然昼夜节律光照。饲养期间大鼠自由进食、进水。内
          茇,四药相互协调,在临床中具有较好的治疗失眠的效                           蒙古医科大学动物实验伦理委员会审议并通过了本实
            [5]
          果 。本课题组前期通过动物实验证实了苏格木勒-4具                          验,伦理批准号为YKD202202103。
          有镇静催眠作用,并验证了其对失眠相关神经递质的影                           2 方法
          响,即升高失眠小鼠大脑中 5-羟色胺(5-hydroxytrp‐                   2.1 药物制备
          tamine,5-HT)、γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)          苏格木勒-4由白豆蔻15 g、白苣胜10 g、荜茇5 g、炒
          的含量,降低多巴胺(dopamine,DA)的含量,证实了其                     酸枣仁 15 g 组成。称取以上 4 味饮片(共 20 副),粉碎,
                            [6]
          具有改善失眠的作用 。                                        加 6 倍量水,浸泡 1 h 后煎煮,煮沸 1 h 后滤过;药渣加 6
              代谢组学方法把机体作为一个完整的系统来研究,                         倍量水煎煮,煮沸1 h后滤过;合并2次滤液,用冻干机冻
          与蒙药侧重整体性和多靶点的机制相似。采用代谢组                            干后得到冻干粉140 g,提取率为15.6%。
          学方法能够快速、有效地分析多条代谢通路,从而为蒙                           2.2 动物分组、造模与给药
          药药用机制研究提供科学的数据支撑 。为了进一步明                               将大鼠以普通饲料适应性喂养 5 d 后,按体重随机
                                          [7]
          确苏格木勒-4的抗失眠药效及作用机制,本研究采用夹                          分为正常组、模型组、苏格木勒-4 组(5.2 g/kg,按临床人
          尾刺激和腹腔注射对氯苯丙氨酸(parachlorophenylala‐                体用量与鼠体表面积换算后得到)、地西泮组(阳性对
          nine,PCPA)溶液复合造模法构建慢性应激失眠大鼠模                       照,0.92 mg/kg ),每组6只。采用慢性夹尾刺激和腹腔
                                                                         [9]
            [8]
          型 ,并根据睡眠监测数据、行为学指标对药物改善失眠                          注射 PCPA 溶液复合造模法构建慢性应激失眠大鼠模
          的作用进行评价。此外,本研究利用超高效液相色谱-串联                         型 :将每组的6只大鼠置于同一笼内,用尖端包扎纱布
                                                               [8]
          质谱(UPLC-MS/MS)技术对大鼠血清和海马进行代谢                       的止血钳分别夹大鼠尾部,每天刺激 45 min,控制刺激
          组学研究,并利用多元统计分析方法对差异代谢物进行                           强度,以不破皮流血为度,连续 20 d;在夹尾刺激的第
          通路分析,以初步揭示苏格木勒-4的抗失眠作用机制。                          16、17 天,对除正常组外的其他 3 个实验组的大鼠均按
          1 材料                                               400 mg/kg腹腔注射PCPA溶液,每天1次。从夹尾刺激
          1.1 主要仪器与设备                                        第 7 天开始,苏格木勒-4 组、地西泮组大鼠开始灌胃给
              本研究所用的主要仪器与设备有:Comm 8 型无创                      药,正常组、模型组大鼠灌胃等体积蒸馏水,每天灌胃 1
          睡眠活动监测系统(美国 Signal Solutions 公司)、WMT-              次,连续14 d。
          100S 型 Morris 水迷宫分析系统(成都泰盟软件有限公                    2.3 行为学评价
          司)、ACQUITY 2D UPLC 型 UPLC-MS 仪(美国 Waters               在夹尾刺激的第 16~19 天进行定位航行实验。将
          公司)、Q Exactive 型高分辨 MS 仪(美国 Thermo Fisher          大鼠放入水池第三象限平台,平台高度为露出水面 1
          Scientific公司)。                                     cm。实验第1天(夹尾刺激的第16天),每只大鼠在平台
          1.2 主要药品与试剂                                        上适应30 s后,以大鼠头朝第一象限池壁方向放入池内
              白豆蔻(批号 19101302)、白苣胜(批号 18080302)、             的瞬间开始计时,直到大鼠找到平台为止,这段时间称


          中国药房  2024年第35卷第1期                                                  China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 1    · 39 ·
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