Page 50 - 《中国药房》2023年24期

while the level of 25（OH）D3 decreased significantly （P＜0.01）； the protein expressions of PAD4， CitH3， MPO and IL-6 in
myocardial tissue up-regulated significantly （P＜0.01）， while protein expression of VDR and CYP27B1 changed to acertain extent
without significance （P＞0.05）. Compared with the model group， the pathological changes of ankle joints and cardiac tissue in rats
were significantly improved in administration groups， and the above indicators were generally reversed （P＜0.05 or P＜0.01）.
CONCLUSIONS T. asiatica can improve rheumatoid arthritis symptoms and cardiovascular damage by inhibiting the formation of
NETs and inflammatory response， the mechanism of which may be associated with the regulation of VD expression.
KEYWORDS Toddalia asiatica； rheumatoid arthritis； cardiovascular damage； neutrophil extracellular trapping net； vitamin D

类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种全 发挥对关节炎及相关心血管疾病的改善作用 [9―11] 。有研
身性自身免疫性疾病，除累及关节外，还涉及血管炎、心 究指出，Th17、IL-17、MCP-1、SOD 等炎症、氧化应激指
[1]
脏病、类风湿结节等众多关节外表现 。临床数据显示， 标编码基因的表达与VD、NETs存在一定的关联 [12―14] ，但
多数 RA 患者兼有包括动脉粥样硬化、心肌梗死等在内 飞龙掌血能否通过 VD 和 NETs 来调控 RA 患者相关炎
的心血管并发症，故死亡风险较高 。中性粒细胞是RA 症、氧化应激指标的分泌/表达，进而影响其心血管损害
[2]
患者关节滑液中含量较高的免疫细胞，在受炎症因子、 的作用过程尚不明晰。基于此，本研究拟从VD和NETs
活性氧等异物刺激后，可活化为中性粒细胞胞外诱捕网 的角度出发，初步探讨飞龙掌血对胶原诱发关节炎
（neutrophil extracellular traps，NETs）。NETs作为一种被 （collagen-induced arthritis，CIA）模型大鼠心血管损害的
瓜氨酸化组蛋白 H3（citrullinated histone H3，CitH3）、髓 干预效果及潜在机制，以期为飞龙掌血在 RA 并发症中
过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）等颗粒蛋白修饰的 的临床应用提供参考。
DNA网状物，有助于机体炎症的控制；但当体内NETs含 1 材料
量过高时，跟随其释放到细胞外的组蛋白和蛋白酶等会 1.1 主要仪器
加剧RA患者的免疫紊乱，并破坏内皮细胞，从而造成循 Multiskan MK3 型酶标仪购自美国 Thermo Fisher
[3]
环系统损害 。 Scientific 公司；DYY-7C 型电泳仪电源、DYCZ-24DN 型
维生素 D（vitamin D，VD）是体内磷钙代谢的关键 垂直电泳槽均购自北京六一仪器厂；RM2016 型轮转式
信号分子，可在 RA 等多种自身免疫性疾病中发挥免疫 切片机购自德国Leica公司；JB-P5型包埋机购自武汉俊
调节作用。25-羟基维生素 D3 [25-hydroxyvitamin D3，25 杰电子有限公司；BX53 型生物显微镜购自日本 Olym‐

（OH）D3]是VD的血清标志物，可在25-羟基维生素D-1α pus公司。
羟化酶（25-hydroxyvitamin D-1α-hydroxylase，CYP27B1） 1.2 主要药品与试剂
的催化下转化成VD的主要活性形式——1α，25-二羟基 飞龙掌血药材（批号 210301）购自贵阳市德昌祥药
维生素 D3[1α，25-dihydroxy-cholecalciferol，1α，25（OH） 2D3]， 房，由贵州中医药大学药学院蒋志滨副教授鉴定为芸香
与维生素D受体（vitamin D receptor，VDR）结合，参与炎 科植物飞龙掌血 T. asiatica（L.）Lam. 的干燥根皮。甲氨
[4]
症控制、心血管保护等生物学过程 。研究显示，血清 蝶呤片（阳性对照药，批号036210906，规格2.5 mg）购自
VD 水平与 RA、心血管疾病的发病风险呈负相关 [5―6] ； 上 海 上 药 信 谊 药 厂 有 限 公 司 ；牛 Ⅱ 型 胶 原（货 号
补充 VD 可延缓 RA 的进展，并可通过抑制 NETs 关键 L22S11C125306）购自上海源叶生物科技有限公司；弗
酶 ——还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（reduced 氏不完全佐剂（货号SLCH4885）购自美国Sigma-Aldrich
nicotinamide adenine dinucleotide phosphate，NADPH）氧 公司；VD 滴剂（通路验证试剂，批号 129214211，规格为
化酶的形成而起到保护血管内皮的作用 [5―7] 。 每粒含 VD3 400 单位）购自国药控股星鲨制药（厦门）有
飞龙掌血为芸香科植物飞龙掌血 Toddalia asiatica 限 公 司 ；MPO、IL-6、25（OH）D3 酶 联 免 疫 吸 附 测 定
（L.）Lam. 的干燥根皮，是我国贵州、云南等地的常用民 （ELISA）试剂盒（批号分别为 ML-E-20221022710、ML-
族药材。该药性温，味辛、微苦，可散瘀止血、祛风除湿、 E-20221023761、ML-E-20221022898）均购自上海酶联生
[8]
消肿解毒，常用于治疗风湿痹症 。研究表明，飞龙掌血 物科技有限公司；兔甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）多
能通过平衡调节性 T 细胞和辅助性 T 细胞 17（T helper 克隆抗体（批号 AB-P-R001）购自杭州贤至生物科技有
cell 17，Th17）的表达来调控白细胞介素 17（interleukin- 限公司；兔 CYP27B1、MPO 多克隆抗体（批号分别为
17，IL-17）、单核细胞趋化蛋白 1（monocyte chemotactic PB0577、BA0544）均购自武汉博士德生物工程有限公
protein-1，MCP-1）、超 氧 化 物 歧 化 酶（superoxide dis‐ 司；兔CitH3多克隆抗体、兔VDR单克隆抗体（批号分别
mutase，SOD）等炎症及氧化应激指标的分泌/表达，从而 为 NB100-57135、NBP2-66778）均购自美国 Novus Bio‐

· 2988 · China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 24 中国药房 2023年第34卷第24期