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4 讨论
牙龈卟啉单胞菌被认为是一种典型的致病菌,其在
口腔群落中的定植会导致炎症免疫反应失调,并最终对
[13]
牙周组织造成不可逆的损伤 。本研究采用牙龈内接
种牙龈卟啉单胞菌的方式构建牙周炎大鼠模型,结果显
A.对照组 B.模型组 示,与对照组比较,模型组大鼠牙龈指数、牙槽骨吸收值
升高,牙周组织中出现大量炎症细胞浸润,这提示牙周
炎大鼠模型构建成功。而使用低、中、高剂量苍术素及
甲硝唑干预后,模型大鼠牙龈指数、牙槽骨吸收值降低,
牙周组织中炎症细胞浸润减少,这表明苍术素可改善牙
周炎引起的牙周组织损伤。
C.苍术素低剂量组 D.苍术素中剂量组 IL-6、TNF-α是常见的促炎细胞因子,可加重机体的
炎症反应 。破骨细胞的分化和活性受RANKL和OPG
[14]
调节。RANKL 可通过激活破骨细胞促进骨吸收;而
OPG 作 为 RANKL 的 受 体 ,可 与 RANKL 结 合 抑 制
[15]
RANKL 的功能,进而促进破骨细胞的凋亡 。本研究
结果显示,与对照组比较,模型组大鼠的IL-6、TNF-α水
平和破骨细胞数、RANKL蛋白表达水平升高,OPG蛋白
E.苍术素高剂量组 F.甲硝唑组
表达水平降低,这表明牙龈卟啉单胞菌诱导的牙周炎模
型大鼠存在炎症反应及牙槽骨丢失。而经低、中、高剂
量苍术素及甲硝唑干预后,给药大鼠的 IL-6、TNF-α 水
平和破骨细胞数、RANKL 蛋白表达水平均低于模型大
鼠,OPG 蛋白表达水平高于模型大鼠,这提示苍术素可
抑制牙周炎大鼠炎症反应及牙槽骨丢失。
G. AMD3100组 H.苍术素高剂量+AMD3100组
图3 各组大鼠牙周组织中破骨细胞数测定的TRAP染 SDF-1 属于 CXC 趋化因子家族成员,其与 CXCR4
[16]
色图 结合后可在干细胞成骨分化中起到重要的促进作用 。
据报道,激活 SDF-1/CXCR4 信号通路募集内源性干细
OPG 48 kDa [17]
胞可促进牙髓再生 ;激活SDF-1/CXCR4信号通路能够
RANKL 32 kDa [18]
抑制急性心肌梗死大鼠体内炎症反应 。上述研究表
SDF-1 11 kDa
明,SDF-1/CXCR4信号通路在牙周组织修复及抑制炎症
CXCR4 43 kDa 反应中具有重要作用。本研究结果与上述研究结果是
GAPDH 36 kDa 一致的——本研究显示,与模型组比较,AMD3100组大
A B C D E F G H
A:对照组;B:模型组;C:苍术素低剂量组;D:苍术素中剂量组; 鼠牙周组织中 SDF-1、CXCR4 蛋白表达下调,大鼠炎症
E:苍术素高剂量组;F:甲硝唑组;G:AMD3100组;H:苍术素高剂量+ 反应及牙槽骨丢失现象进一步增强,这表明在牙周炎大
AMD3100组。 鼠炎症反应及牙槽骨丢失过程中SDF-1/CXCR4信号通
图4 各 组 大 鼠 牙 周 组 织 中 OPG、RANKL、SDF-1、 路处于抑制状态。此外,本研究还发现,苍术素可上调
CXCR4蛋白表达的电泳图 牙周炎大鼠牙周组织中 SDF-1、CXCR4 蛋白表达。因
表2 各 组 大 鼠 牙 周 组 织 中 OPG、RANKL、SDF-1、 此,笔者推测苍术素可能是通过激活 SDF-1/CXCR4 信
CXCR4蛋白表达水平比较(x±s,n=6) 号通路来改善牙周炎大鼠炎症反应及牙槽骨丢失的。
分组 OPG/GAPDH RANKL/GAPDH SDF-1/GAPDH CXCR4/GAPDH 为了验证该推测,本研究在高剂量苍术素作用的基础上
对照组 1.56±0.13 0.26±0.02 1.26±0.14 1.01±0.11 再加上 SDF-1/CXCR4 信号通路抑制剂 AMD3100 来干
模型组 0.45±0.04 a 1.21±0.11 a 0.36±0.04 a 0.21±0.02 a 预牙周炎大鼠,结果显示,AMD3100减弱了高剂量苍术
苍术素低剂量组 0.68±0.06 b 0.97±0.09 b 0.57±0.05 b 0.43±0.04 b
苍术素中剂量组 0.97±0.09 b 0.76±0.07 b 0.89±0.09 b 0.67±0.05 b 素对牙周炎大鼠炎症反应及牙槽骨丢失的抑制作用。
苍术素高剂量组 1.36±0.12 b 0.41±0.04 b 1.05±0.11 b 0.85±0.07 b 这一结果证实了苍术素可能是通过激活 SDF-1/CXCR4
甲硝唑组 1.38±0.13 b 0.39±0.04 b 1.07±0.12 b 0.87±0.06 b 信号通路来改善牙周炎大鼠炎症反应及牙槽骨丢失的。
AMD3100组 0.23±0.02 b 1.53±0.12 b 0.19±0.01 b 0.11±0.02 b 综上所述,苍术素可能通过激活 SDF-1/CXCR4 信
苍术素高剂量+AMD3100组 0.81±0.08 c 0.82±0.08 c 0.72±0.06 c 0.55±0.04 c
号通路来改善牙周炎大鼠炎症反应及牙槽骨丢失,但苍
a:与对照组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05;c:与苍术素
高剂量组比较,P<0.05。 术素对牙周炎大鼠炎症反应及牙槽骨丢失的抑制作用涉
· 2872 · China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 23 中国药房 2023年第34卷第23期