Page 67 - 《中国药房》2023年23期
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(2012版)》计算相似度,可得10批样品与对照指纹图谱                           300
                                                                200      5      12
          的相似度为 0.942~0.999。此外,在 211 nm 检测波长                    100  1 2 3 4  6 7  8 9  10  11 14  16  18 19 20  21 22 23 24  25 26 27
                                                                                13 15
                                                                                      17
          下,通过苦参碱对照品溶液色谱图指认出健脾化瘀方中                            mAU  -100 0                                   a b c
                                                               -200                                         d e
          的苦参碱成分,详见图3。                                         -300                                         f g
                                                               -400                                         h
                      5      12 14 15  18 19  22 23
                  1 2 3 4  6 7  8910  11 13  16  17 20  21  24  25 26 27  0         5       10      15       20   25      30        35       40       45   50      55       60       65     70       75       80       85   90      95     100
           2 000                                        R
           1 800                                        S10                           t/min
           1 600                                        S9      a:健脾化瘀方供试品溶液(编号S1);b:混合对照品溶液;c:茯苓
           1 400                                        S8   对照药材溶液;d:白术对照药材溶液;e:苦参对照药材溶液;f:莪术对
           1 200                                        S7
           U/mV  1 000                                  S6   照药材溶液;g:白花蛇舌草对照药材溶液;h:佛手对照药材溶液。
            800                                         S5   图4 健脾化瘀方供试品、混合对照品及各对照药材溶
            600                                         S4
            400                                         S3        液的HPLC图
            200                                         S2
             0                                          S1   皮素、佛手柑内酯、苦参碱的阴性对照图谱,详见图5、图
               0              6        12    18     24    30    36      42       48     54    60    66      72        78    84    90       96     102
                                   t/min                     6。根据图 5、图 6,可确定绿原酸(峰 8)和香草酸(峰 9)
         图1 10批健脾化瘀方的HPLC叠加指纹图谱及对照指                          来自白花蛇舌草和白术;对香豆酸(峰 12)和阿魏酸(峰
               纹图谱                                           15)来自白花蛇舌草、佛手和莪术;橙皮苷(峰19)来自佛
            178                                              手;槲皮素(峰 22)和佛手柑内酯(峰 24)来自白花蛇舌
            150             12
                     5                                       草、佛手和苦参;苦参碱来自苦参。
           mAU  100          13
             50
                          9   15  18  19 20  22                 275
                 1  3 4  8 10  11  14  16  21 23 24
             0    2    6 7         17     25  26 27     a       250
                                                        b       225
            -42                                                 200
              0         5       10      15    20   25      30       35       40       45   50      55       60       65       70   75       80       85   90      95     100  175
                                  t/min                         150          8 9          22  24            a
                                                                125
             8:绿原酸;9:香草酸;12:对香豆酸;15:阿魏酸;19:橙皮苷;22:槲           mAU  100       9  12  15  19  22 24           b
                                                                75           8 8  12 12 15 15  22 24        c
         皮素;24:佛手柑内酯;a:混合对照品溶液;b:健脾化瘀方供试品溶液                     50           9 9       19  22  24           d
                                                                25           8  12 12  15 15  19  22 24     e
         (编号S1)。                                                 0           8 9                            f
                                                               -25
         图2 健脾化瘀方供试品溶液与混合对照品溶液的                                -50
                                                                  0         5       10      15       20   25      30        35       40       45   50      55       60       65       70       75       80       85   90      95     100
               HPLC图                                                                  t/min
                                                                a:缺白花蛇舌草、佛手、莪术的阴性供试品溶液;b:缺白花蛇舌
           1 190
           1 000                                             草、白术的阴性供试品溶液;c:缺白花蛇舌草、佛手、苦参的阴性供试
            800
            600  苦参碱                                         品溶液;d:缺佛手的阴性供试品溶液;e:混合对照品溶液;f:健脾化瘀
           mAU  400                                          方供试品溶液(编号S1)。
            200
             0                                           a b  图5 健脾化瘀方供试品、混合对照品及部分阴性供试
           -200
           -400                                                   品溶液的HPLC图
           -610
              0                            10                                   20            30                                      40                                  50                                       60                                     70             80                                 90                                   100
                                  t/min                         800
             a:健脾化瘀方供试品溶液(编号S1);b:苦参碱对照品溶液。                     600
                                                                400
         图3 健 脾 化 瘀 方 供 试 品 溶 液 在 211  nm 波 长 下 的             mAU  200  苦参碱
               HPLC图                                           -200 0                                       a b
                                                               -400                                         c
          2.3.5 色谱峰归属                                             0         5       10      15       20   25      30        35       40       45   50      55       60       65       70       75       80       85   90      95     100
              将白术、莪术、茯苓、佛手、苦参、白花蛇舌草对照药                                                t/min
                                                                a:缺苦参的阴性供试品溶液;b:健脾化瘀方供试品溶液(编号
          材溶液,健脾化瘀方供试品溶液(编号S1)与混合对照品
                                                             S1);c:苦参碱对照品溶液。
          溶液的HPLC图进行比对,以确定共有峰来源。结果发
                                                             图6 健脾化瘀方供试品、苦参碱对照品及缺苦参阴性
          现,峰 1、2、4、6、8、9、10、11 归属于白术药材,峰 7、12、
                                                                  供试品溶液的HPLC图
          15、20、21、25 归属于莪术药材,峰 1、27 归属于茯苓药
                                                             2.4 含量测定
          材,峰 1、2、4、12、13、15、19、22、24 归属于佛手药材,峰
          1、2、3、4、5、7、11、13、16、18、20、21、22、23、24、27归属于       2.4.1 线性关系考察
          苦参药材,峰 1、4、7、8、9、10、11、12、14、15、17、22、23、              取“2.2.3”项下混合对照品溶液和苦参碱对照品溶
          24、26归属于白花蛇舌草药材,详见图4。                              液各适量,分别用甲醇稀释成系列质量浓度的溶液,按
              分别取健脾化瘀方供试品溶液(编号S1)、混合对照                      “2.1”项下色谱条件进样测定,以对照品实际进样量
          品溶液及各阴性供试品溶液,按“2.1”项下色谱条件进样                       (μg)为横坐标(x)、峰面积为纵坐标(y),进行线性回归
          测定,得绿原酸、香草酸、对香豆酸、阿魏酸、橙皮苷、槲                         分析,结果见表2。


          中国药房  2023年第34卷第23期                                              China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 23    · 2877 ·
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