Page 27 - 《中国药房》2023年22期
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所致，主要表现为红肿热痛，若治疗不及时不仅能够导                           公司；BCA 蛋白浓度测定试剂盒（批号 PC0020）购自北
          致组织坏死，而且可通过血液扩散而导致肺部感染，甚                           京索莱宝科技有限公司；二甲苯、无水乙醇（批号分别为
                                                    [2]
          至可能引发败血症、感染性休克而危及患者生命 。肿                           10023418、100092683）均购自国药集团化学试剂有限
          疡的传统治疗以抗生素为主，但由于抗生素的滥用导致                           公司。
                        [3]
          细菌敏感性降低 ，致使治疗效果欠佳。                                 1.3 实验菌株与动物
              箍围药作为中医外治药物的一种，具有直达病所、                             本 研 究 所 用 的 金 黄 色 葡 萄 球 菌 菌 株（编 号
                            [1]
          快速改善症状的特点 。箍围药代表方冲和膏出自《外                           CMCC26112-10）、大 肠 埃 希 菌 菌 株 [ 编 号 CMCC（B）
          科正宗》，由石菖蒲、白芷、独活、赤芍、紫荆皮 5 味药组                       44102]、铜绿假单胞菌菌株[编号CMCC（B）10104]、白色
                                        [4]
          成，具有活血化瘀、软坚消肿的功效 ，临床治疗乳腺炎、                         葡萄球菌菌株（批号 26112-10）、肺炎链球菌菌株（批号
          皮下血肿等症的效果良好           [5―6] ，但其作用机制尚不明确。           31001-qa1）均来自中国食品药品检定研究院。
          现代药理学研究发现，石菖蒲、白芷、独活、赤芍、紫荆皮                             SPF 级雄性 Wistar 大鼠 120 只，6 周龄，体重（200±
          均具有一定的抑菌效果          [7―11] 。基于此，本研究先通过体            10）g，购自内蒙古医科大学实验动物中心，生产许可证
          外抑菌实验观察冲和膏的抑菌作用，再采用皮下注射金                           号为 SCXK（蒙）2020-0001。所有大鼠均饲养于内蒙古
          黄色葡萄球菌的方法建立大鼠皮下软组织感染模型，探                           医科大学动物实验中心SPF级动物房（12 h光暗交替，相
          究该方促进肿疡消散的作用机制，旨在为冲和膏的深入                           对湿度40%～60%，温度22～25 ℃）内，自由摄食、饮水，
          研究和应用提供理论依据，也为抗感染替代或辅助治疗                           适应环境5 d后用于实验。本研究方案经内蒙古医科大
          中药方案的研发提供方向。                                       学医学伦理委员会审查（编号YKD202201104）。
          1 材料                                               2 方法

          1.1 主要仪器                                           2.1 冲和膏药膏的制备
              本研究所用主要仪器包括 Nikon Eclipse E100 型正                  将紫荆皮、独活、赤芍、石菖蒲、白芷饮片粉碎，过40
          置光学显微镜（日本 Nikon 公司），JJ-12J 型脱水机、JB-                目筛，粉末于干燥环境下常温保存。按照冲和膏原方比
          P5型包埋机（武汉俊杰电子有限公司），RM2016型病理                       例称取紫荆皮、独活、赤芍、石菖蒲、白芷饮片粉末（质量
          切片机（上海徕卡仪器有限公司），SW-CJ-2D 型超净工                      比为5∶3∶2∶1.5∶1），共50 g，置于1 000 mL圆底烧瓶中，
          作台（上海苏净实业有限公司）等。                                   加入400 mL的双蒸水，加热回流提取1 h，过滤，收集药
          1.2 主要药品与试剂                                        液；再加入 400 mL 的 95% 乙醇提取 1 h，过滤，收集药
              石菖蒲、白芷、独活、赤芍饮片（批号分别为180401、                    液；将上述药液混合，减压蒸发浓缩后冷冻干燥，得到冲
          180401、180101、171101）均购自内蒙古自治区中医医                  和膏冻干粉（得率40%）。将冻干粉与蒸馏水按照3∶7的
          院，紫荆皮饮片（批号20190101）购自湖南中医药大学第                      质量-体积比混合，制成冲和膏药膏，待用。
          一附属医院，上述饮片经内蒙古医科大学中医学院师建                           2.2 体外实验
          平教授鉴定均为真品。复方多黏菌素 B 软膏（批号                               采取打孔法检测冲和膏药膏对金黄色葡萄球菌、大
          H20061269，规格 20 g）购自浙江孚诺医药股份有限公                    肠埃希菌、铜绿假单胞菌、白色葡萄球菌、肺炎链球菌 5
          司；苏木精-伊红（HE）染液、中性树胶（批号分别为                          种常见细菌的抑菌作用。使用6 mm的打孔器在MH培
          G1005、G1403）均购自武汉赛维尔生物科技有限公司；                      养基上均匀打6个孔，用移液枪吸取200 μL菌悬液滴于
          Masson染色试剂盒（批号BP-DL021）购自南京森贝伽生                    培养基中央，用灭菌后的三角玻璃棒均匀涂布，按照顺
          物科技有限公司；转化生长因子 β（transforming growth               时针方向在每个孔中依次加入生理盐水和 25、50、100、
          factor-β，TGF-β）试剂盒、碱性成纤维细胞生长因子（ba‐                 200、400 mg/mL的冲和膏药液（由冲和膏冻干粉和生理
          sic fibroblast growth factor，bFGF）试剂盒（批号分别为        盐水按不同比例配成）各 50 μL，在培养基外缘做好标
          L190828365、L190917690）均购自武汉优尔生科技股份                 记，于 37 ℃恒温培养箱中培养 18～24 h，拍照后使用
          有限公司；兔源Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原单克隆抗体（批号分                          Image J 软件测量抑菌圈直径。每个类型的菌株重复操
          别为ab270993、ab184993）均购自英国Abcam公司；鼠源                作5次，结果取平均值。
          基质金属蛋白酶2（matrix metalloproteinase-2，MMP-2）、        2.3 体内实验
          MMP-9单克隆抗体（货号分别为sc-13594、sc-393859）均               2.3.1 分组、造模与给药
          购自美国 Santa Cruz 公司；鼠源 β-肌动蛋白（β-actin）单                 将 120 只大鼠随机分为正常组、模型组、冲和膏组、
          克隆抗体（货号 AA128）购自上海碧云天生物技术有限                        西药组（复方多黏菌素 B 软膏，阳性对照），每组 30 只。


          中国药房  2023年第34卷第22期                                              China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 22    · 2709 ·
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