Page 28 - 《中国药房》2023年22期
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正常组大鼠不予处理,其余3组大鼠按下法建立皮下软 质量浓度为 400 mg/mL 时,冲和膏对金黄色葡萄球菌、
组织感染模型:大鼠背部脱毛,于脱毛区域(3 cm×3 铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、白色葡萄球菌的抑菌效果
cm)正中皮下注射金黄色葡萄球菌混悬液(用生理盐水 较 好(P<0.05),对 肺 炎 链 球 菌 的 抑 菌 效 果 不 明 显
配制,密度为 1.0×10 cfu/mL)0.5 mL,每天 1 次,连续 3 (P>0.05)。
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d。3 d后,若注射部位出现明显红肿、触痛,触之有明显 20
金黄色葡萄球菌
波动感即造模成功 。造模成功后,分别于冲和膏组和 铜绿假单胞菌
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大肠埃希菌
西药组大鼠肿疡周围部位敷以相应药物(但中间留一 15 a a 白色葡萄球菌
个半径为 1 cm 的圆孔不敷药物),每天 1 次,连续给药 a a a a 肺炎链球菌
14 d;模型组大鼠不予任何干预。根据人与动物体表面 平均抑菌圈直径/mm 10 a a a
积折算的等效剂量比值表进行剂量换算,确定冲和膏
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(以冻干粉质量计)、复方多黏菌素 B 软膏的剂量均为
0.43 g/d。 0
2.3.2 标本采集与处理 400 200 100 50 25 生理盐水
冲和膏的质量浓度/(mg/mL)
分别于给药第3、7、14天,随机取模型组、冲和膏组、
a:与生理盐水组比较,P<0.05。
西药组大鼠6只,分离背部脓肿组织,一分为二,一份用 图1 不同质量浓度冲和膏和生理盐水对5种常见细菌
10% 中性福尔马林溶液固定,于 4 ℃下保存;另一份 的抑菌作用比较(n=5)
于-80 ℃下保存。分别于给药第 1、3、5、7、14 天,随机
3.2 体内实验结果
取模型组、冲和膏组、西药组大鼠6只,于腹主动脉取血,
3.2.1 冲和膏对大鼠皮下软组织病理学的影响
静置离心后取血清于-80 ℃下保存。
HE染色结果(图2)显示,给药第3天,模型组、冲和
2.3.3 皮下软组织病理学观察
膏组、西药组大鼠皮下软组织可见明显脓肿灶,灶内充
取固定于中性福尔马林溶液中的大鼠脓肿皮肤组
满大量细胞碎片,真皮结构遭到破坏,3 组皆有大量炎
织,包埋后切片,分别进行HE和Masson染色,观察染色
症细胞浸润。给药第 7 天,与模型组相比,冲和膏组和
情况。
西药组大鼠的脓肿组织逐渐消失,纤维细胞逐渐增多
2.3.4 皮下软组织中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、MMP-2 和
MMP-9蛋白表达的检测 并形成结缔组织,将脓液包裹,其中冲和膏组效果更明
取冻存的大鼠脓肿皮肤组织 80 mg,加入裂解液和 显。给药第 14 天,与模型组相比,西药组和冲和膏组
蛋白抑制酶,于液氮环境下研磨后提取总蛋白,检测其 大鼠的脓肿组织减少更为明显,其中冲和膏组大鼠脓
中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、MMP-2 和 MMP-9 蛋白的表达, 肿组织减少最明显,且真皮下各附属器逐渐形成,细胞
以β-肌动蛋白(β-actin)为内参进行蛋白定量分析。 排列有序。
2.3.5 血清中bFGF、TGF-β含量的检测
取冻存的大鼠血清,按试剂盒说明书方法操作,检 第3天
测血清中bFGF、TGF-β含量。
2.4 统计学方法
使用SPSS 26.0软件对数据进行统计分析。实验数
据用x或x±s表示,若数据符合正态分布,多组间比较采 第7天
用单因素方差分析,两两比较采用 LSD-t 检验(方差齐)
或 Dunnett’s T3 检验(方差不齐);若数据不符合正态分
布,则用非参数检验。检验水准α=0.05。 第14天
3 结果
3.1 体外抑菌实验结果 A.模型组 B.冲和膏组 C.西药组
如图1所示,与生理盐水相比,当冲和膏质量浓度为 图2 各组大鼠皮下软组织的HE染色显微图
25 mg/mL 时,冲和膏只对金黄色葡萄球菌有抑菌作用 Masson染色结果(图3)显示,给药第3天,模型组大
(P<0.05),对铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、白色葡萄球 鼠皮下软组织中胶原纤维断裂,排列散乱无章;与模型
菌、肺炎链球菌的抑菌效果不明显(P>0.05);当冲和膏 组相比,冲和膏组和西药组大鼠的纤维排列较为整齐,
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