Page 28 - 《中国药房》2023年22期
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正常组大鼠不予处理,其余3组大鼠按下法建立皮下软                            质量浓度为 400 mg/mL 时,冲和膏对金黄色葡萄球菌、
          组织感染模型:大鼠背部脱毛,于脱毛区域(3 cm×3                          铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、白色葡萄球菌的抑菌效果
          cm)正中皮下注射金黄色葡萄球菌混悬液(用生理盐水                           较 好(P<0.05),对 肺 炎 链 球 菌 的 抑 菌 效 果 不 明 显
          配制,密度为 1.0×10  cfu/mL)0.5 mL,每天 1 次,连续 3           (P>0.05)。
                            11
          d。3 d后,若注射部位出现明显红肿、触痛,触之有明显                          20
                                                                                               金黄色葡萄球菌
          波动感即造模成功 。造模成功后,分别于冲和膏组和                                                             铜绿假单胞菌
                          [12]
                                                                                               大肠埃希菌
          西药组大鼠肿疡周围部位敷以相应药物(但中间留一                              15  a      a                    白色葡萄球菌
          个半径为 1 cm 的圆孔不敷药物),每天 1 次,连续给药                            a       a    a      a      肺炎链球菌
          14 d;模型组大鼠不予任何干预。根据人与动物体表面                           平均抑菌圈直径/mm  10  a  a             a
          积折算的等效剂量比值表进行剂量换算,确定冲和膏
                                                                5
         (以冻干粉质量计)、复方多黏菌素 B 软膏的剂量均为
          0.43 g/d。                                             0
          2.3.2 标本采集与处理                                              400                      200                      100                    50                    25             生理盐水
                                                                                 冲和膏的质量浓度/(mg/mL)
              分别于给药第3、7、14天,随机取模型组、冲和膏组、
                                                                 a:与生理盐水组比较,P<0.05。
          西药组大鼠6只,分离背部脓肿组织,一分为二,一份用                           图1 不同质量浓度冲和膏和生理盐水对5种常见细菌
          10% 中性福尔马林溶液固定,于 4 ℃下保存;另一份                              的抑菌作用比较(n=5)
          于-80 ℃下保存。分别于给药第 1、3、5、7、14 天,随机
                                                              3.2 体内实验结果
          取模型组、冲和膏组、西药组大鼠6只,于腹主动脉取血,
                                                              3.2.1 冲和膏对大鼠皮下软组织病理学的影响
          静置离心后取血清于-80 ℃下保存。
                                                                  HE染色结果(图2)显示,给药第3天,模型组、冲和
          2.3.3 皮下软组织病理学观察
                                                              膏组、西药组大鼠皮下软组织可见明显脓肿灶,灶内充
              取固定于中性福尔马林溶液中的大鼠脓肿皮肤组
                                                              满大量细胞碎片,真皮结构遭到破坏,3 组皆有大量炎
          织,包埋后切片,分别进行HE和Masson染色,观察染色
                                                              症细胞浸润。给药第 7 天,与模型组相比,冲和膏组和
          情况。
                                                              西药组大鼠的脓肿组织逐渐消失,纤维细胞逐渐增多
          2.3.4 皮下软组织中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、MMP-2 和
          MMP-9蛋白表达的检测                                        并形成结缔组织,将脓液包裹,其中冲和膏组效果更明
              取冻存的大鼠脓肿皮肤组织 80 mg,加入裂解液和                       显。给药第 14 天,与模型组相比,西药组和冲和膏组
          蛋白抑制酶,于液氮环境下研磨后提取总蛋白,检测其                            大鼠的脓肿组织减少更为明显,其中冲和膏组大鼠脓
          中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、MMP-2 和 MMP-9 蛋白的表达,                     肿组织减少最明显,且真皮下各附属器逐渐形成,细胞
          以β-肌动蛋白(β-actin)为内参进行蛋白定量分析。                        排列有序。
          2.3.5 血清中bFGF、TGF-β含量的检测
              取冻存的大鼠血清,按试剂盒说明书方法操作,检                           第3天
          测血清中bFGF、TGF-β含量。
          2.4 统计学方法
              使用SPSS 26.0软件对数据进行统计分析。实验数
          据用x或x±s表示,若数据符合正态分布,多组间比较采                           第7天
          用单因素方差分析,两两比较采用 LSD-t 检验(方差齐)
          或 Dunnett’s T3 检验(方差不齐);若数据不符合正态分
          布,则用非参数检验。检验水准α=0.05。                                第14天
          3 结果
          3.1 体外抑菌实验结果                                              A.模型组          B.冲和膏组          C.西药组
              如图1所示,与生理盐水相比,当冲和膏质量浓度为                             图2 各组大鼠皮下软组织的HE染色显微图
          25 mg/mL 时,冲和膏只对金黄色葡萄球菌有抑菌作用                            Masson染色结果(图3)显示,给药第3天,模型组大
         (P<0.05),对铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、白色葡萄球                         鼠皮下软组织中胶原纤维断裂,排列散乱无章;与模型
          菌、肺炎链球菌的抑菌效果不明显(P>0.05);当冲和膏                        组相比,冲和膏组和西药组大鼠的纤维排列较为整齐,


          · 2710 ·    China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 22                            中国药房  2023年第34卷第22期
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