Page 76 - 《中国药房》2023年20期

情况叠加使用，且止血物需在体内降解，故其量效关系 2.2.2 持黏力测定
主要体现于制剂的成分组成及含量 [9―10] 。为更直观地显 参照 2020 年版《中国药典》（四部）通则“0952 黏附
[13]
示DBT的内在量效关系，本文运用了Box-Behnken-响应 力测定法”第二法进行测定 ：将保持力测试仪的试验
面设计方法，以 DBT 的黏合强度、持黏力和吸水力 3 个 板和加载板紧挨并对齐，在距离两板 10～15 cm 高处均
与止血性能密切相关的力学参数为检测指标 [11―12] ，以其 匀喷洒生理盐水 0.5 mL；取 DBT（2.5 cm×5 cm，剪裁所
得），黏于试验板和加载板的中部，并用滚轮来回滚压 5
总评归一化（overall desirability，OD）值为响应值，对冻
次使其黏合紧密；喷水2 min后，将试验板固定在保持力
干前纤维蛋白原、凝血酶和胶原蛋白3个主要有效成分
测试仪上，在加载板下端挂上200 g的砝码，记录脱落时
的含量进行优化，以保障 DBT 止血效果的充分发挥，也
间（脱落时间须超过 10 min 方能符合实验要求）。上述
为同类产品的研究开发提供参考。
测试需取3片同规格的DBT，结果以平均值表示。
1 材料
2.2.3 吸水力测试
1.1 主要仪器 取DBT（5 cm×10 cm），精密称定其质量（W1 ）；于室
本研究所用主要仪器包括BLD-1028型剥离强度试 温（25±2）C 下在生理盐水中浸泡 20 min，待其充分吸
o
验机、BLD-1008A 型保持力测试仪（东莞博莱德仪器设 水后，取出，静置 3 min，待其无明显水滴后再次精密称
备有限公司），GLZY-1 型冻干机（上海浦东冷冻干燥设 定其质量（W2 ），按下式计算吸水力：吸水力＝W2/W1。上
备有限公司），KD-DTC-210 型电子天平（上海亚津电子 述测试需取3片同规格的DBT，结果以平均值表示。
科技有限公司）等。 2.3 DBT配方优化的单因素实验
1.2 主要药品与试剂 DBT 的止血性能与其 3 个主要成分（纤维蛋白原、
纤维蛋白原备用液（批号为 20140423，质量浓度为 凝血酶和胶原蛋白）的含量密切相关，故本研究以
50 mg/mL）、凝血酶备用液（批号为 20140704，效价为 “2.2.1”项下黏合强度为检测指标，以冻干前上述成分的
500 IU/mL）、胶原蛋白中间体（批号为20140603，胶原蛋 含量（其中胶原蛋白含量以胶原蛋白中间体溶液质量浓
度计，下同）为考察因素，在固定其中2个因素的条件下
白含量为0.204 g/g）均购自广州市众为生物科技股份有
进行单因素实验。
限公司。
2
（1）固定凝血酶含量为 6 IU/cm 、胶原蛋白含量为 3
2 方法与结果
mg/cm ，考察不同纤维蛋白原含量（1.2、2.1、2.9、4.2、5.0、
2
2.1 DBT的制备 2
7.5、8.8、11 mg/cm）对所制DBT黏合强度的影响。结果
分别将适量纤维蛋白原备用液、凝血酶备用液和胶
显示，随着纤维蛋白原含量的升高，黏合强度逐渐增大；
原蛋白中间体溶液（由其中间体经盐析、甲酸等处理所 当纤维蛋白原含量为 7.5～11 mg/cm 时，黏合强度的增
2
得的溶液）注入冻干模具，采用特殊冻干工艺技术将三 幅明显不如含量1.2～4.2 mg/cm 时。综合考虑，本研究
2
者冻干在一起，即得 DBT（规格 5 cm×10 cm）。本制备 选择纤维蛋白原含量 3～9 mg/cm 进行后续优化实验。
2
工艺已申请专利，申请公布号为CN104491917B。 结果见图1A。
2.2 DBT的力学性能测定 300 300
250
250
2.2.1 黏合强度测定 200 200
参照 2020 年版《中国药典》（四部）通则“0952 黏附 黏合强度 a /gf 150 黏合强度 a /gf 150
100
100
[13]
力测定法”第三法进行测定 ：取 DBT（5 cm×10 cm）， 50 0 50 0
0 2 4 6 8 10 12 0 2 4 6 8 10 12 14 16
分离其黄色纤维蛋白原层和白色胶原蛋白层，取黄色纤 纤维蛋白原含量/（mg/cm） 凝血酶含量/（IU/cm）
2
2
维蛋白原层，用双面胶将其剥离面朝上固定于不锈钢板 A.纤维蛋白原 B.凝血酶
300
上，再用胶带将该层上下两端加以固定，使其平整贴合 250
在钢板上；随后，吸取生理盐水1 mL，均匀喷洒在该黄色 黏合强度 a /gf 200
150
层上；取棉布与该黄色层小心黏合并按压抚平，用重压 100
50
0
辊来回滚压5次，静置30 min[温度（25±3）C，相对湿度 0 2 4 6 8
o
胶原蛋白含量/（mg/cm）
2
（55±10）%]；将棉布自由端 180 度对折，并将棉布自由 C.胶原蛋白
端和钢板分别垂直夹于试验机上，同时使黄色纤维蛋白 a：1 gf＝0.000 98N。
原层的剥离面与剥离强度试验机（已进行校准）线保持 图1 各配方成分含量对DBT黏合强度的影响
一致，确认安装无误后，开始测试。试验机以（300±10） （2）固定纤维蛋白原含量为 6 mg/cm 、胶原蛋白含
2
mm/min 的速度上升剥离，以刚剥离的最大强度为黏合 量为 3 mg/cm ，考察不同凝血酶含量（2、5、8、11、14
2
强度。上述测试需取3片同规格的DBT，结果以平均值 IU/cm）对所制 DBT 黏合强度的影响。结果显示，黏合
2
2
表示。 强度曲线呈抛物线样，当凝血酶含量为2～11 IU/cm 时，
· 2498 · China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 20 中国药房 2023年第34卷第20期