Page 51 - 《中国药房》2023年20期
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vaginal tissue lesions in rats were observed in administration groups, and most of the quantitative indicators mentioned above
showed significant improvement (P<0.05 or P<0.01). CONCLUSIONS Baicao fuyanqing suppository has a certain improvement
effect on inflammatory symptoms in BV rats, and its mechanism may be related to the inhibition of the TLR/NF-κB signaling
pathway.
KEYWORDS Baicao fuyanqing suppository; bacterial vaginitis; inflammation; Toll-like receptor/nuclear factor- κB signaling
pathway
细菌性阴道炎(bacterial vaginitis,BV)是一种妇科 1.2 主要药品与试剂
常见传染性疾病,因寄居于阴道的乳酸杆菌减少,而加 百 草 妇 炎 清 栓 [ 国 药 准 字 Z20026597,批 号 为
德纳菌等厌氧菌增多,阴道内生态平衡系统受到破坏而 06210401,规格为每粒重 4 g(不包括棉棒重,相当于饮
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引起 。BV患者若未接受及时治疗,其局部免疫功能将 片2 g)]购自贵州长生药业有限责任公司;甲硝唑阴道泡
会下降,进而继发宫颈炎、盆腔炎等其他妇科疾病,严重 腾片(阳性对照,国药准字 H20067252,批号 220403,规
影响患者的生活质量。目前,抗菌药物是临床治疗 BV 格 0.2 g)购自湖北东信药业有限公司;苯甲酸雌二醇注
的主要选择,但该类药物会同时杀灭共生菌,导致菌群 射液(批号211126,规格2 mL∶4 mg)购自上海全宇生物
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失调,还会因过度使用而致使病原体耐药 。因此,寻找 技术(驻马店)动物药业有限公司;白细胞介素13(inter‐
有效且副作用小的替代疗法很有必要。百草妇炎清栓 leukin-13,IL-13)试剂盒(货号F2961-B)购自上海泛柯实
由苦参、百部、蛇床子、仙鹤草、紫珠叶、白矾、冰片、樟 业有限公司;IL-1β、IL-2、免疫球蛋白 A(immunoglobu‐
lin A,IgA)试剂盒(货号分别为 ERC007、ERC001、IGA-
脑、硼酸组成,是基于我国传统苗医药发展而成的一种
中药栓剂,民间用药历史悠久 。临床实践显示,百草妇 2)均购自欣博盛生物科技有限公司;兔TLR4、NF-κB多
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炎清栓用于 BV 的疗效显著 ,但其具体作用机制尚不 克隆抗体(货号分别为19811-1-AP、14220-1-AP)均购自
美 国 Proteintech 公 司 ;兔 TLR2 多 克 隆 抗 体(货 号
明确。
A20608)购自武汉爱博泰克生物科技有限公司;小鼠甘
革兰氏阴性菌是妇科炎症感染的主要致病菌,其细
油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)单克隆抗体(货号 T0004)
胞壁主要成分脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)是诱发炎
购自美国 Affinity 公司;辣根过氧化物酶标记的山羊抗
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症的关键因素 。Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)为
兔、山羊抗鼠 IgG 二抗(货号分别为 PMK-014-090、PM-
Ⅰ型跨膜蛋白家族受体,在非特异性或先天免疫性疾病
014-091)均购自武汉普美克生物技术有限公司;BCA蛋
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发病过程中起关键作用 。研究指出,TLR2 和 TLR4 可
白检测试剂盒(货号PC0020)购自北京索莱宝科技有限
分别通过识别革兰氏阳性菌细胞壁主要成分肽聚糖和
公司。
革兰氏阴性菌细胞壁主要成分 LPS 来调控下游细胞因
1.3 实验动物
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子的合成和分泌,激活炎症相关靶基因的表达 ;同时,
SPF 级雌性 SD 大鼠,体重 180~200 g,购自贵州医
所有的 TLR 可共同激活核因子 κB(nuclear factor-κB,
科大学动物中心,动物使用许可证号为SYXK(黔)2018-
NF-κB)通路,而 NF-κB 活化水平的升高会进一步导致
0001。所有大鼠均饲养于温度(22±2)℃、相对湿度
促炎性细胞因子释放的增加,从而造成相关组织损
(60±5)%、光照 12 h/黑暗 12 h 的动物房内。本研究方
伤 [8―9] 。可见,TLR/NF-κB通路与BV等妇科炎症性疾病
案经贵州医科大学实验动物伦理委员会批准(编号
有着密切关联 。本研究拟通过建立大肠埃希菌感染
[10]
2000351),并按照实验动物福利和动物实验伦理的相关
的BV大鼠模型,探究百草妇炎清栓对大鼠BV的改善作
要求进行。
用,并基于 TLR/NF-κB 通路初步探讨其潜在作用机制, 1.4 细菌
以期为该药的临床应用提供实验依据。 大肠埃希菌(货号 BNCC133264)购自商城北纳创
1 材料 联生物科技有限公司。
1.1 主要仪器 2 方法
本研究所用主要仪器包括DNP-9162型电热恒温培 2.1 分组、造模与给药
养箱(上海精宏实验设备有限公司),Varioskan LUX 型 将雌性 SD 大鼠随机分为正常组,模型组,甲硝唑
多功能酶标仪、HM325 型病理切片机(美国 Thermo 组,百草妇炎清栓低、中、高剂量组,每组8只。参考文献
Fisher Scientific 公司),BX43 型正置光学显微镜(日本 方法 [11―12] 复制 BV 模型:所有大鼠均适应性喂养 1 周,除
Olympus 公司),JB-L5 型包埋机(武汉俊杰电子有限公 正常组外其余各组大鼠均皮下注射苯甲酸雌二醇注射
司),DYY-6C 型电泳仪(北京六一仪器厂),MSX2 型成 液0.2 g,每天1次,持续6 d,使大鼠处于假发情状态;随
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像系统(广州市明美光电技术有限公司)等。 后,将大肠埃希菌悬液用空白培养基稀释至 2×10 ~
中国药房 2023年第34卷第20期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 20 · 2477 ·