Page 47 - 《中国药房》2023年20期

入 HDAC1、Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3、β -actin 一 抗 制率均较对照组显著升高（P＜0.05或P＜0.01），且有一
（稀释比例均为1∶1 000），于4 ℃下孵育过夜；以TBST缓 定的浓度依赖趋势。结果见图 1（对照组细胞的增殖抑
冲液洗膜 3 次，加入相应二抗（稀释比例均为 1∶1 000）， 制率为 0，未在图中展示）。人参皂苷 Rh2对 2 种细胞作
于室温下孵育 1 h；以 TBST 缓冲液洗膜 3 次，加入 ECL 用 48 h 时的 IC50分别为 51.34、55.84 μmol/L，故后续将

试剂显色并置于凝胶成像系统下成像，以目的蛋白与内 30、50 μmol/L作为该成分的干预浓度。
参蛋白（β-actin）的条带灰度值比值作为目的蛋白的表达 3.2 人参皂苷Rh2对人胶质瘤细胞凋亡的影响
水平。 经30、50 μmol/L的人参皂苷Rh2作用48 h后，U87、
2.5 统计学方法 U251 细胞的总凋亡率均较对照组显著升高（P＜0.01），
采用SPSS 22.0软件对数据进行统计分析。计量资 且有随药物浓度增加而升高的趋势。结果见图2。
料以 x±s 表示，多组间比较采用方差分析，组间两两比 3.3 人参皂苷Rh2对人胶质瘤细胞中HDAC1蛋白表达
较采用LSD-t检验。检验水准α＝0.05。 的影响
3 结果 经30、50 μmol/L的人参皂苷Rh2作用48 h后，U87、
3.1 人参皂苷Rh2对人胶质瘤细胞增殖的影响 U251 细胞中 HDAC1 蛋白的表达水平均较对照组显著
经不同浓度人参皂苷 Rh2作用 24、48、72 h 后，各药 降低（P＜0.05或P＜0.01），且表达水平有随药物浓度增
物组 U87、U251 细胞的增殖均受到明显抑制，其增殖抑 加而降低的趋势。结果见图3。

1.0 b b b b 1.0 b b b
24 h b b 24 h b
b
48 h b b 48 h b b
0.8 b 0.8 b
72 h 72 h b
b b 0.6
增殖抑制率 a a b b b b 增殖抑制率 b b b b
0.6
0.4
a a b 0.4 b b b
a a a
0.2 a 0.2 a
a
a
0 0
10 20 30 40 50 60 70 80 10 20 30 40 50 60 70 80
人参皂苷Rh 2 浓度/（μmol/L） 人参皂苷Rh 2 浓度/（μmol/L）
A. U87细胞 B. U251细胞
a：与对照组比较，P＜0.05；b：与对照组比较，P＜0.01。
图1 人参皂苷Rh2对人胶质瘤U87、U251细胞增殖的影响
10 4 10 4 10 4
10 3 10 3 10 3 50 a
40
a
10 2 10 2 10 2
PI PI PI 凋亡率/% 30
10 1 10 1 10 1 20
10
10 0 10 0 10 0 0
10 10 10 10 10 4 10 10 10 10 10 4 10 10 10 10 10 4 Ⅰ Ⅱ Ⅲ
0
0
3
2
1
3
0
1
2
3
2
1
Annexin Ⅴ-FITC Annexin Ⅴ-FITC Annexin Ⅴ-FITC
对照组流式细胞图 人参皂苷Rh 2 30 μmol/L组流式细胞图 人参皂苷Rh 2 50 μmol/L组流式细胞图 各组细胞总凋亡率的柱形图
A. U87细胞
10 4 10 4 10 4
10 3 10 3 10 3 50
a
40
10 2 10 2 10 2 a
PI PI PI 凋亡率/% 30
10 1 10 1 10 1 20
10
10 0 10 0 10 0 0
10 10 10 10 10 4 10 10 10 10 10 4 10 10 10 10 10 4 Ⅰ Ⅱ Ⅲ
2
3
1
1
0
1
0
3
2
3
0
2
Annexin Ⅴ-FITC Annexin Ⅴ-FITC Annexin Ⅴ-FITC
对照组流式细胞图 人参皂苷Rh 2 30 μmol/L组流式细胞图 人参皂苷Rh 2 50 μmol/L组流式细胞图 各组细胞总凋亡率的柱形图
B. U251细胞
Ⅰ：对照组；Ⅱ：人参皂苷Rh 2 30 μmol/L组；Ⅲ：人参皂苷Rh 2 50 μmol/L组；a：与对照组比较，P＜0.01。
图2 人参皂苷Rh2对人胶质瘤U87、U251细胞凋亡的影响
中国药房 2023年第34卷第20期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 20 · 2473 ·