Page 29 - 《中国药房》2023年17期

3 加样回收率。结果显示，芒果苷、荭草素-2″-O-β-L-半乳
1 000 2
900 1 4 5 6 混合对照品 糖苷、荭草苷、藜芦酸、牡荆苷和哈巴俄苷的平均加样回
800 2 3 溶液
700 1 4 5 6 收 率 分 别 为 99.7%、96.4%、94.6%、101.2%、96.0%、
供试品溶液
600 1 98.1%，RSD分别为3.00%、0.69%、1.20%、3.30%、1.90%、
mAU 500 6 缺金莲花阴
性供试品溶
400 2 3 液 2.50%（n＝6），表明该方法准确度良好。
300 4 5 6 缺知母阴性
200 3 供试品溶液 2.4 待测成分与不同内参物的RCF的建立
2
100 1 5
4 缺玄参阴性 2.4.1 RCF的计算
0 供试品溶液
[11]
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 本实验采用多点校正法计算 RCF ，即根据“2.3.2”
t/min
线性关系考察项下荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、荭草苷、
1：芒果苷；2：荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷；3：荭草苷；4：藜芦酸；5：
牡荆苷；6：哈巴俄苷。 牡荆苷 3 个成分 6 个质量点的峰面积和进样量，依据公
图1 系统适用性考察的高效液相色谱图 式RCF＝fi/fs＝（W i/Ai ）/（Ws/As ） ＝ （W i×As ）/（Ws×Ai ）计算
分别以上述 3 个成分作为内参物时，另外 5 个待测成分
表1 6种化合物的线性关系考察结果
与内参物的RCF。公式中fs、fi分别为内参物与待测成分
化合物 回归方程 线性范围/（μg/mL） r
芒果苷 y＝17 273x+1 484.3 0.750 0～24.00 0.999 8 的绝对校正因子，Ａs、Ｗs分别为内参物的峰面积和质
荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷 y＝14 528x+8 325.3 5.000～160.0 0.999 8 量，Ai、W i分别为待测成分的峰面积和质量。结果显示，
荭草苷 y＝20 878x+1 6042 6.562～210.0 0.999 8 以上述 3 个成分作为内参物时，另外 5 个待测成分与内
藜芦酸 y＝44 973x+4 764.9 1.094～35.00 0.999 8
牡荆苷 y＝21 430x+3 953.9 1.450～46.40 0.999 8 参物的RCF的RSD均小于2.00%（n＝6）。结果见表2。
哈巴俄苷 y＝29 380x+2 797.5 0.500 0～16.00 0.999 7 表2 不同内参物的RCF计算结果（n＝6）
2.3.3 精密度试验 待测成分 荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷（RSD/%） 荭草苷（RSD/%） 牡荆苷（RSD/%）
取“2.1.2”项下混合对照品溶液适量，按“2.2”项下色 芒果苷 0.843（0.75） 1.214（1.10） 1.249（1.30）
荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷 － 1.440（0.44） 1.482（0.65）
谱条件连续进样 6 次，记录芒果苷、荭草素-2″-O-β-L-半 荭草苷 0.695（0.44） － 1.029（0.23）
乳糖苷、荭草苷、藜芦酸、牡荆苷和哈巴俄苷的峰面积。 藜芦酸 0.325（0.85） 0.468（1.30） 0.482（1.50）
结果显示，上述 6 个成分峰面积的 RSD 分别为 0.40%、 牡荆苷 0.675（0.65） 0.972（0.23） －
哈巴俄苷 0.489（0.68） 0.704（0.94） 0.725（1.10）
0.53%、0.27%、0.31%、0.24%、0.38%（n＝6），表明仪器精
－：作为内参物，无相应数据。
密度良好。
2.4.2 RCF重现性考察
2.3.4 重复性试验
取“2.1.2”项下混合对照品溶液适量，按“2.2”项下色
精密称取同批金莲清热颗粒样品（编号 S21），根据
谱条件，分别采用 Agilent Eclipse Plus C18柱（250 mm×
“2.1.1”项下方法平行制备6份供试品溶液，按“2.2”项下
4.6 mm，5 μm）、Shimadzu InertSustain C18柱（250 mm×
色谱条件进样测定，记录峰面积，按标准曲线计算含量。
4.6 mm，5 μm）、Agilent Zorbax SB-C18 柱（250 mm×4.6
结果显示，芒果苷、荭草素-2″ -O-β-L-半乳糖苷、荭草苷、
mm，5 μm），以不同型号的高效液相色谱仪（Promi-
藜芦酸、牡荆苷、哈巴俄苷的平均含量分别为0.34、2.13、 nenece LC-20A 型高效液相色谱系统、Agilent 1260 型高
2.40、0.21、0.68、0.12 mg/g，RSD 分别为 1.25%、1.80%、 效液相色谱系统）进行分析，计算分别以荭草素-2″-O-
1.65%、1.16%、1.38%、0.79%（n＝6），表明该方法重复性 β-L-半乳糖苷、荭草苷、牡荆苷作为内参物时，另外 5 个
较好。 待测成分与内参物的 RCF。结果显示，以荭草素-2″-O-
2.3.5 稳定性试验 β-L-半乳糖苷、荭草苷、牡荆苷3个成分分别作为内参物
精密称取同批金莲清热颗粒样品（编号 S21），根据 时，另外 5 个待测成分与内参物的 RCF 的 RSD 均小于
“2.1.1”项下方法制备供试品溶液，分别在室温放置0、2、 5.00%（n＝6），表明RCF的重现性良好。
4、8、12、24 h 时按“2.2”项下色谱条件进样测定，记录峰 2.5 待测成分色谱峰的定位
面积。结果显示，芒果苷、荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、 记录“2.4.2”项下使用 2 种高效液相色谱系统、3 种
荭草苷、藜芦酸、牡荆苷和哈巴俄苷峰面积的 RSD 分别 色谱柱测定的各成分色谱峰保留时间，计算以荭草
为0.79%、0.66%、0.43%、0.75%、1.77%、0.60%（n＝6），表 素-2″-O-β-L-半乳糖苷、荭草苷、牡荆苷 3 个成分分别作
明供试品溶液在室温放置24 h内稳定性良好。 为内参物时，另外5个待测成分与内参物的相对保留时
2.3.6 加样回收率试验 间。结果显示，以荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、荭草苷、
取已知含量的同批金莲清热颗粒样品 6 份，每份约 牡荆苷 3 个成分分别作为内参物时，另外 5 个待测成分
0.5 g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，加入相当于样品中 与内参物的相对保留时间的RSD均小于3.00%（n＝6），
各成分含量 100% 的对照品溶液，根据“2.1.1”项下方法 表明采用不同色谱柱和色谱系统时各成分相对保留时
制备供试品溶液，按“2.2”项下色谱条件进样测定，计算 间波动较小。

中国药房 2023年第34卷第17期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 17 · 2071 ·