Page 28 - 《中国药房》2023年17期
P. 28

金莲清热颗粒是依据中医理论，在汉代名医张仲景                          自上海源叶生物科技有限公司；哈巴俄苷对照品（批号
         《伤寒论》中的“白虎汤”和清代名医吴鞠通《温病条辨》                           PS000404，纯度≥98%）购自成都普思生物科技股份有
          中的“增液汤”基础上加减化裁而成，具有清热解毒、生                           限公司；乙腈为色谱纯，色谱分析用水为娃哈哈纯净水，
          津利咽、止咳祛痰的功效           [1―2] 。方中金莲花、大青叶为君            其他试剂均为分析纯。
          药，能清热解毒；知母、石膏为臣药，能清热泻火、除烦止                          2 方法与结果
          渴，使高烧速降；玄参、生地为佐药，能养阴清热、润燥、                          2.1 溶液的制备
          除烦；苦杏仁为使药，可宣肺止咳化痰。2020年版《中国                         2.1.1 供试品溶液的制备
          药典》仅以牡荆苷的含量作为金莲清热颗粒的质量控制                                取金莲清热颗粒样品，研细，精密称取粉末约0.5 g，
              [3]
          指标 ，而本品由 7 味中药组成，成分复杂，仅使用单一                         置于具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25 mL，密塞，称
          化学成分作为质量控制指标，难以全面准确控制其内在                            定质量；超声（功率250 W，频率33 kHz）30 mim，取出放
          质量。近年来，对多个指标成分进行检测分析已成为中
                                                              冷后，用溶剂补足减失的质量，摇匀；取适量，以 10 000
                               [4]
          药质量控制的发展方向 ，但部分中药成分的化学对照
                                                              r/min离心10 min，取上清液作为供试品溶液。
          品分离难度大，而且对多个指标成分进行控制也会增加
                                                              2.1.2 混合对照品溶液的制备
          检测成本。
                                                                  分别精密称取芒果苷、荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、
              一测多评（quantitative analysis of multi-components
                                                              荭草苷、藜芦酸、牡荆苷和哈巴俄苷对照品适量，加甲醇
          by single marker，QAMS）法是选择一个有效成分为内参
                                                              制 成 质 量 浓 度 分 别 为 1.000、1.000、0.420  0、0.350  0、
          物，构建其他成分与内参物之间的相对校正因子（rela‐
                                                              0.232 0、1.000 mg/mL的对照品储备液；精密吸取上述对
          tive correction factors，RCF），通过测定一个有效成分的
                                                              照品储备液适量置于同一 5 mL 容量瓶中，加甲醇稀释
          含 量 ，可 实 现 多 成 分 的 同 时 测 定     [5―9] 。 但 目 前 中 药
                                                              并定容，摇匀，得质量浓度分别为 24.00、160.0、210.0、
          QAMS 法存在重复研究的现象，即相同的分析对象、相
                                                              35.00、46.40、16.00 μg/mL的混合对照品溶液。
          同的待测成分，在不同的研究中选用不同的内参物重复
                                                              2.1.3 阴性供试品溶液的制备
          建立 RCF。由于 RCF 的建立需要对全部对照品溶液进
                                                                  按照金莲清热颗粒的处方比例和提取、干燥、成型
          行测定，这种情况造成了资源浪费，违背了 QAMS 法建
                                                              等工艺条件，分别制备缺金莲花、缺知母、缺玄参的阴性
                  [10]
          立的初衷 。基于此，本研究以金莲花中药理作用明确
                                                              样品，按“2.1.1”项下方法制备各阴性供试品溶液。
          且含量较高的3个成分荭草苷、荭草素-2″-O-β-L-半乳糖
                                                              2.2 色谱条件
          苷、牡荆苷分别作为内参物，建立可同时测定金莲清热
                                                                  色 谱 柱 为 Agilent  Eclipse  Plus  C18（250  mm×4.6
          颗粒中6种成分（分别是君药金莲花的活性成分荭草苷、
                                                              mm，5 μm）；流动相为乙腈（A）-0.1%磷酸溶液（B），梯度
          荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、牡荆苷、藜芦酸，臣药知母
          的活性成分芒果苷，佐药玄参的活性成分哈巴俄苷）含                            洗脱（0～5 min，97%B；5～15 min，97%B→95%B；15～
                                                              25 min，95%B→90%B；25～91 min，90%B→68%B）；流
          量的 QAMS 法，并与外标法（external standard method，
          ESM）的测定结果进行比较，以期为该制剂质量的全面                           速为 1.0 mL/min；柱温为 30 ℃；检测波长为 270 nm；进
          评价及质量标准提升奠定实验基础。                                    样量为10 μL。
          1 材料                                                2.3 方法学考察
          1.1 主要仪器                                            2.3.1 系统适用性考察
              本研究所用主要仪器有 XS105DU 型分析天平（瑞                          取“2.1”项下混合对照品溶液、供试品溶液、各阴性
          士 Mettler-Toledo 公司）、Prominenece LC-20A 型高效液        供试品溶液适量，按照“2.2”项下色谱条件进样测定，结
          相色谱仪（日本 Shimadzu 公司）、1260 型高效液相色谱                   果见图 1。结果显示，各成分色谱峰的分离度均符合要
          仪（美国Agilent公司）、TGL-16G型高速离心机（上海安                    求，理论板数均大于5 000，阴性供试品分别在各成分的
          亭科学仪器有限公司）。                                         保留时间处无干扰。
          1.2 主要药品与试剂                                         2.3.2 线性关系考察
              金莲清热颗粒（国药准字Z20023308）购自宁夏启元                         取“2.1.2”项下混合对照品溶液适量，经倍比稀释后
          药业有限公司，共21批（编号S1～S21）。芒果苷对照品                        按照“2.2”项下色谱条件进样检测，记录芒果苷、荭草
         （批号 111607-201704）购自中国食品药品检定研究院；                     素-2″-O-β-L-半乳糖苷、荭草苷、藜芦酸、牡荆苷和哈巴
          荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、荭草苷、藜芦酸、牡荆苷对                      俄苷的峰面积。将各对照品的质量浓度作为横坐标
          照 品（批 号 分 别 为 P01O11F126428、S19GB161663、           （x），峰 面 积 作 为 纵 坐 标（y），进 行 线 性 回 归 ，结 果
          DN1127BA13、D29GB172870，纯度均不低于 98%）均购                见表1。


          · 2070 ·    China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 17                            中国药房  2023年第34卷第17期
   23   24   25   26   27   28   29   30   31   32   33