Page 67 - 《中国药房》2023年12期
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mRNA and protein expression of OCTN2 varied significantly among different cancer cells. The sensitivity of cancer cells with high
          expression  of  OCTN2  to  oxaliplatin （IC50  of  4.61  μmol/L）  was  higher  than  that  of  cancer  cells  with  lower  expression  of  OCTN2
         （IC50  of  26.23  μmol/L）.  The  inhibitory  rate  of  oxaliplatin  to  cancer  cells  was （25.4±10.8）% （n＝12）.  There  was  a  correlation
          between  the  uptake  of  oxaliplatin  by  prostate  cancer  cells  and  the  inhibition  rate  of  oxaliplatin  to  prostate  cancer  cells  and  mRNA
          expression  of  OCTN2 （P＜0.05）.  CONCLUSIONS  High-expressed  OCTN2  may  promote  the  uptake  of  oxaliplatin  by  prostate
          cancer  cells，  and  its  expression  can  serve  as  a  reference  for  predicting  the  sensitivity  of  prostate  cancer  cells  to  oxaliplatin
          chemotherapy.
          KEYWORDS    novel organic cation transporter 2； oxaliplatin； prostate cancer cell； chemosensitivity



              在发达国家，前列腺癌是威胁男性健康的第二大恶                         EDS-100G、E4127-0.1MG）均购自美国Sigma公司；牛垂
                [1]
          性肿瘤 。我国前列腺癌发病率低，但近年升高趋势明                           体提取物（批号sc-214620）购自美国Santa Cruz公司；锥
          显，早期筛查严重滞后，40%～70%的患者在确诊时已出                        虫蓝（批号 A601140）购自生工生物工程（上海）股份有
          现转移 。化疗是晚期转移性前列腺癌的重要治疗手                            限公司；兔抗人 OCTN2 抗体（批号 LS-C681354）购自美
                [2]
            [3]
          段 ，但多西他赛一线化疗失败后的二线用药方案目前                           国LSBio公司；辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔IgG（批
                  [4]
          仍是空白 。已有研究表明，铂类化疗药物对一线化疗                           号 ab214880）购自美国 Abcam 公司；Trizol、DMEM/F-12
                                                       [5]
          失败尤其是有小细胞癌分化倾向的肿瘤有抑制作用 。                           培养液、Superscript Ⅱ试剂盒、BCA 试剂盒、发光液、三
          奥沙利铂为第三代铂类化疗药物，其对紫杉醇类药物治                           磷 酸 腺 苷 肿 瘤 药 物 敏 感 性 检 测 法（adenosine
          疗后进展的去势抵抗性前列腺癌疗效明显，但仍有部分                           triphosphate-tumor chemosensitivity assay，ATP-TCA）试
                        [6]
          患者对其不敏感 。因此，筛选对奥沙利铂敏感的患者                           剂 盒（批 号 分 别 为 15596026、11320074、18064014、
          并针对性实施化疗才可获得较好疗效。                                  23227、34579、A22066）均购自美国Thermo Fisher Scien‐
              研究表明，奥沙利铂只有进入肿瘤细胞内才能发挥                         tific公司；MTT、Tunel试剂（批号分别为C0009S、C1091）
                    [7]
          抗肿瘤作用 。新型有机阳离子转运蛋白（novel organic                   均购自上海碧云天生物技术有限公司；上样缓冲液（批
          cation transporter，OCTN）是奥沙利铂跨膜进入细胞内的              号P1040）购自北京索莱宝科技有限公司。
          重要途径 。基于此，本研究比较了不同前列腺癌细胞                           1.3 细胞
                  [8]
          OCTN2 的表达情况和对奥沙利铂的摄取量，以及奥沙                             人胚胎肾细胞 293（HEK293）购自中国科学院典型
          利铂对癌细胞的抑制率，分析 OCTN2 与前列腺癌细胞                        培养物保存中心。
          对奥沙利铂化疗敏感性的相关性，以期为临床前列腺癌                           1.4 组织标本
          二线化疗方案的选择提供实验依据。                                       2021 年 5－10 月共收集 15 例行腹腔镜前列腺癌根
          1 材料                                               治术患者的肿瘤组织病理标本，所有患者术前均未接受
          1.1 主要仪器                                           化疗、放疗及内分泌治疗。标本取出后立即无菌剖开，
              本研究所用主要仪器包括 iCAP TQ 型电感耦合等                     取无坏死、无纤维化的肿瘤组织，经苏木精-伊红染色后
          离子体质谱仪（美国 Thermo Fisher Scientific 公司）、            进行常规病理检测，确定15例组织标本均为前列腺癌组
          SpectraMax M2型全自动定量绘图酶标仪（美国Molecu‐                 织标本。本研究经过滕州市中心人民医院伦理委员会
          lar Devices公司）、7300型Real Time PCR系统（美国ABI          批准，伦理审查号为2021-伦理审查-03。
          公司）、2325型二氧化碳孵箱和89501型恒温水浴箱（美                      2 方法
          国VWR公司）、Ⅸ73P2F型倒置显微镜和CKX53型光学                      2.1 组织标本处理
          显微镜（日本 Olympus 公司）、LB960 型荧光测定仪（德                      取“1.4”项下的部分前列腺癌组织标本送常规病理
          国 Berthold 公司）、PowerPac200 型电泳仪（美国 Bio-Rad         及免疫组化病理检查，另一部分组织标本用 DMEM/F-
          公司）、Tanon 4800型全自动化学发光成像系统（上海天                     12培养液（含100 U/mL青霉素、50 U/mL庆大霉素）冲洗
          能生命科学有限公司）等。                                       3 次，置于冻存液（50% 胎牛血清、40%DMEM/F-12 培养
          1.2 主要药品与试剂                                        液、10% 二甲基亚砜）中，于－70 ℃冰箱过夜，次日移至
              注射用奥沙利铂（批号 521021041，规格 100 mg）购               液氮罐中。
          自山东罗欣药业集团股份有限公司；胎牛血清（批号                            2.2 前列腺癌组织中OCTN2蛋白表达检测
          SH30070.03）购自美国 HyClone 公司；胰蛋白酶、Ⅱ型胶                    采用免疫组化法进行检测。取“2.1”项下第一部分
          原 酶（批 号 分 别 为 15090046、17101015）均 购 自 美 国          前列腺癌组织标本，用甲醛固定，石蜡包埋、切片、脱蜡
          Gibco 公司；乙二胺四乙酸、表皮生长因子（批号分别为                       和水化，置于0.4%胃蛋白酶水溶液中，37 ℃下孵化3 h，


          中国药房  2023年第34卷第12期                                              China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 12    · 1469 ·
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