Page 68 - 《中国药房》2023年7期
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FoxO3a蛋白
DAPI
Merge
A.空白对照组 B. LY294002组 C. DP 10 μmol/L+LY294002组
图5 各组细胞中FoxO3a蛋白核转位结果显微图（DAPI染色）
通过PI3K/Akt信号通路抑制白血病HL60细胞的增殖并 动子上促进Bim蛋白的表达，从而启动线粒体途径的细
诱导其凋亡。结果发现，DP与LY294002联合使用对细 胞凋亡过程 。笔者前期研究证实，DP 能够下调 Bcl-2
[12]
胞的增殖抑制作用及细胞凋亡率较DP单独作用的效果 mRNA 的转录水平，上调 Bax mRNA 的转录水平 。在
[7]
更好，这表明DP与LY294002之间存在协同作用。另据 本研究中，笔者通过实时荧光定量-PCR法检测发现，DP
文献报道，FoxO3a 作为 Akt 的重要核心底物，可上调细 也能够上调细胞中Bim mRNA的转录水平，这进一步证
胞凋亡因子，并调节细胞周期因子，从而促进细胞凋亡 实了 DP 可通过线粒体途径抑制 HL60 细胞增殖并诱导
和周期阻滞，抑制肿瘤的发生和发展 [9―10] 。本研究中，笔 其凋亡。另外，有文献指出，caspase-3 是细胞凋亡途径
者通过 Western blot 法和实时荧光定量-PCR 法检测发 中的执行者，参与细胞程序性死亡的最后阶段 [13―14] 。
现，DP 或 DP 联合 LY294002 均能减少 HL60 细胞中 p- Bcl-2 蛋白家族中的 Bax/Bak 通过影响线粒体外膜通透
FoxO3a、p-Akt 蛋白（FoxO3a、Akt 蛋白的活化形式）表 性，释放凋亡因子，激活 caspase [15―16] 。caspase 是细胞凋
达，并能使 FoxO3a mRNA 转录水平降低。这初步证实 亡的重要介质，而caspase-3是一种经常被激活的死亡蛋
[17]
了 DP 可通过 PI3K/Akt 信号通路抑制 HL60 细胞增殖并 白酶 。caspase-3可被caspase-9切割，随后激活下游的
诱导其凋亡。但值得注意的是，在Western blot实验中， 其他 caspase 因子，将靶细胞引导到凋亡、死亡的临界
[18]
也有可能是因为细胞密度的下降或细胞生长受到抑制， 点 。 在 本 研 究 中 ，笔 者 也 证 实 了 DP 单 用 或 联 合
导致细胞中p-Akt、p-FoxO3a蛋白的表达量降低，后续研 LY294002 后能增加 HL60 细胞中 caspase-3、caspase-9 活
究中需通过设计更加严谨的实验进行验证。 性并上调其mRNA的转录水平。
有研究报道，Bim 和 Bax 均为 Bcl-2 家族成员，而由 有研究报道，活化后的PI3K/Akt信号通路可以刺激
Bcl-2家族因子参与的线粒体凋亡途径在细胞凋亡过程 FoxO3a 发生磷酸化，使得 FoxO3a 从细胞核转运到细胞
[11]
中发挥着重要作用 。Bim 是 Bcl-2 家族中 BH3-only 亚 质内，同时降低其下游 Bim 蛋白的表达，抑制细胞的凋
族成员，是一种重要的促凋亡蛋白；同时 Bim 也是 亡；然而当 PI3K/Akt 信号通路受到抑制时，去磷酸化的
FoxO3a 下游的关键因子，FoxO3a 可以结合在 Bim 的启 FoxO3a 又会从细胞质内进入细胞核，从而导致其下游
· 830 · China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 7 中国药房 2023年第34卷第7期
