Page 58 - 《中国药房》2023年7期

above indexes were decreased significantly in rhein treatment group （P＜0.01）， pathological damage of renal cortex was improved，
the volume of Peyer’s patch and germinal center of intestinal mucosa were reduced， and IgA deposition in renal cortex was
weakened. CONCLUSIONS Rhein can improve IgAN model rats， the mechanism of which may be associated with inhibiting
STAT3 signaling pathway and regulating immune function of Peyer’s patch in intestinal mucosa.
KEYWORDS rhein； immunoglobulin A nephropathy； intestinal mucosa； Peyer’s patch； signal transducer and activator of
transcription 3 signaling pathway

免疫球蛋白A肾病（immunoglobulin A nephropathy， 1.2 主要药品与试剂
IgAN）是自身免疫性疾病，主要临床表现为反复发作的 大黄酸原料药（纯度 98%）购自上海阿拉丁生化科
血尿，其确诊标准为在肾小球系膜区检出以免疫球蛋白 技股份有限公司（批号 I2104421）；牛血清白蛋白（bo‐
[1]
A（immunoglobulin A，IgA）为主的免疫沉积 。目前，关 vine serum albumin，BSA，规格 25 g）、脂多糖（lipopoly‐
于IgAN的病因和病机存在多种学说，如机体免疫失衡、 saccharides，LPS，纯度 99%）、苏木素-伊红（hematoxy-
肠道菌群失调、多重打击学说等 [2―3] 。相关研究发现， lineosin staining，HE）染 色 试 剂 盒（ 批 号 分 别 为
IgAN 患者存在肠道屏障功能受损的情况，其病情加重 128P0516、1124K021、20220409）均购自北京索莱宝科技
通常会伴随小肠黏膜的感染 [4―5] ；另外，一些肠道疾病也 有限公司；四氯化碳（CCl4 ）购自上海麦克林生化科技有
会合并IgAN，如克罗恩病、溃疡性结肠炎、乳糜泻等 [6―7] 。 限公司（批号 C12886285）；蓖麻油购自上海易恩化学技
本课题组前期研究发现，大黄酸可调节 IgAN 模型 术有限公司（批号 RH255359）；FITC 标记的山羊抗大鼠
大鼠小肠黏膜内免疫指标 CD4/CD8 的平衡，从而减轻 IgA 抗体、兔抗磷酸化 STAT3（p-STAT3）抗体均购自美
IgAN [8―9] ，但具体机制尚不清楚。目前，已有学者证实信 国 Abcam 公司（批号分别为 GR3412514-2、GR246894-
号转导与转录激活因子 3（signal transducer and activator 41）；兔抗维甲酸受体相关孤儿受体γt（related orphan re‐
of transcription 3，STAT3）信号通路可通过调节免疫细胞 ceptor γt，RORγt）抗体购自南京巴傲得生物科技有限公
[10]
来平衡自身免疫反应 。相关研究基于大黄酸与STAT3 司（批号CN89330）；兔抗白细胞介素6（interleukin-6，IL-
分子模拟对接结果发现，大黄酸与 STAT3 抑制剂 LY5、 6）、兔抗白细胞介素 17（IL-17）、鼠抗转化生长因子 β
[11]
STA-21的结构（分子结构式见图1）相似 。故笔者提出 （transforming growth factor β，TGF-β）、β-肌动蛋白（β-
设想：大黄酸是否可通过抑制 STAT3 信号通路活性，抑 actin）抗体和免疫组化试剂盒套装（抗兔）、免疫组化试
制小肠黏膜免疫的过度激活，从而减轻 IgAN。Peyer 结 剂盒套装（抗鼠）均购自北京博奥森生物技术有限公司
是小肠黏膜内的一组淋巴滤泡，为小肠黏膜免疫系统的 （批号分别为 BJ12146794、BA11232558、BA10143035、
[12]
重要组成部分 。基于此，本研究建立IgAN模型大鼠， BA07022760、BB05099092、BB04146979）；尿 蛋 白
并基于STAT3信号通路探讨大黄酸调节小肠黏膜Peyer （urine total protein，UTP）定量测试盒购自南京建成生物
结内免疫功能从而改善IgAN的作用机制。 工程研究所（批号20211220）；大鼠IgA酶联免疫吸附试
验（ELISA）试剂盒、大鼠分泌型 IgA（secretory immuno‐
globulin A，sIgA）ELISA 试剂盒均购自江苏酶免实业有
限公司（批号分别为220104065R、220104078R）；逆转录
试 剂 盒 购 自 武 汉 赛 维 尔 生 物 科 技 有 限 公 司（批 号
A.大黄酸 B. LY5 C. STA-21
MPC2112069）；ECL发光试剂购自苏州优逸兰迪生物科
图1 大黄酸与STAT3抑制剂的分子结构式
技有限公司（批号013Z0102）。
1 材料 1.3 实验动物
1.1 主要仪器 本研究所用大鼠为SPF级雄性SD大鼠，30只，体质
本研究所用主要仪器包括AB104-N型电子天平（瑞 量为（200±20） g，由江西中医药大学实验动物中心提
士 Mettler Toledo 公司），RT-6100 型酶标仪（美国 Rayto 供，动物生产许可证号为SCXK（赣）2018-0003。动物实
公司），BV-2型垂直电泳仪、BT-2型转印电泳仪（武汉赛 验经江西中医药大学实验动物伦理委员会审查批准，批
维尔生物科技有限公司），CFX 型荧光定量聚合酶链式 准号为20220307006。
反应（PCR）仪（美国 Bio-Rad 公司），L535R 型多功能台 2 方法
式离心机（湖南湘仪实验室仪器开发有限公司），BX43 2.1 分组与给药
型光学显微镜（日本Olympus公司），6300型化学发光成 将大鼠随机分为正常对照组、IgAN 模型组和大黄
像仪（上海勤翔科学仪器有限公司）等。 酸治疗组，每组 10 只。采用 BSA+LPS+CCl4联合法造

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