Page 53 - 《中国药房》2023年7期
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capsules  have  good  anti-inflammatory  effect  on  gouty  arthritis，  and  its  mechanism  may  be  related  to  the  inhibition  of  NF- κB
          signaling pathway activity.
          KEYWORDS    Zhuang medicine； Tongfeng li’an capsule； gouty arthritis； anti-inflammatory effect； NF-κB signaling pathway



              痛风是体内血尿酸过饱和沉积在关节局部等从而                         （ELISA）检测试剂盒购自武汉华美生物工程有限公司
          诱发炎症反应和组织破坏的进展性代谢疾病，存在高发                          （批号 CSB-E08054）；CCK-8 购自日本 Dojindo 公司；活
          性、致残性和反复性等特点，现已成为最常见的炎症性                           性氧（reactive oxygen species，ROS）检测试剂盒、一氧化
                [1]
          关节炎 。尽管科研人员对痛风开展了大量研究，但尚                           氮（nitric oxide，NO）检测试剂盒、辣根过氧化物酶标记
          无特效药物用于痛风患者。目前，控制血高尿酸水平和                           的山羊抗兔免疫球蛋白 G（ immunoglobulin G，IgG）二
          抑制炎症是痛风性关节炎的主要疗法，相关药物主要分                           抗、兔源 β-肌动蛋白（β-actin）单克隆抗体、超敏 ECL 化
          为降尿酸药物（如别嘌呤醇、苯溴马隆等）和抗炎药物                           学发光试剂盒均购自上海碧云天生物技术有限公司（批
                                                [2]
         （如秋水仙碱、非甾体抗炎药和糖皮质激素） 。虽然这                           号分别为 S0033S、C1102、S0021S、A0208、P0018S）；兔
          些药物在短期内显示出良好的临床疗效，但长期使用可                           源核因子 κB（nuclear factor kappa-B，NF-κB）单克隆抗
                                                                                                        ®
          导致胃肠道反应或皮疹，甚至肾功能衰竭等严重不良反                           体购自美国 CST 公司（批号 D14E12）；Alexa Fluor  594
            [3]
          应 。因此，寻找并开发一种疗效显著且副作用小的药                           标记的山羊抗兔免疫球蛋白 G 二抗购自北京中杉金桥
          物具有重要意义。                                           生物技术有限公司（批号200030720）。
              中药复方用于治疗单钠尿酸盐晶体诱导的痛风性                          1.3 实验动物
                                                [4]
          关节炎，具有多环节、多靶点的整合调节作用 。痛风立                              本研究所用动物为 6～8 周龄 SD 雄性大鼠，60 只，
          安胶囊（桂药制字 M20100004）是广西十大中药民族药                      体质量180～220 g，购自湖南斯莱克景达实验动物有限
          院内制剂品种，由肿节风、粉萆薢、车前草、虎杖等药味                          公司，动物生产许可证号为 SCXK（湘）2019-0004，使用
          组成，具有清热毒、除湿毒、祛风毒、消肿痛的功效，对风                         许可证号为 SYXK（桂）2019-0001。大鼠饲养在温度为
          湿热毒所致的痛风具有良好的治疗效果                 [5―6] 。本课题组     （25±2） ºC、湿度为（50±10）%的屏障环境内，自由进食
                                               [7]
          前期研究了痛风立安胶囊的降血尿酸作用 ，但具体的                           饮水。本实验方案通过广西中医药大学医学与实验动
          作用机制尚不明确。基于此，本研究拟从体内外双水平                           物伦理委员会批准许可，批准号为DW2020618-31。
          评价痛风立安胶囊对痛风性关节炎的抗炎作用及机制，                           1.4 细胞株
          以期为该制剂的临床应用提供参考。                                       小鼠单核巨噬细胞白血病细胞RAW264.7购自中国
          1 材料                                               科学院典型培养物保藏委员会细胞库。
          1.1 主要仪器                                           2 方法
              BPN-150CH 型二氧化碳恒温培养箱购自上海一恒                     2.1 体内实验
          科学仪器有限公司；Synergy H1型全功能酶标仪购自美                      2.1.1 造模、分组与给药 参照文献[8―9]方法并改良
          国 Bio Tek 公司；UVP Chem Studio 815 型成像仪购自德           后进行造模。将60只雄性SD大鼠分笼饲养，适应性喂
          国 AJ 公司；FACS Caibur 型流式细胞仪购自美国 BD 公                养7 d，自由饮食和饮水，然后随机分为正常组、模型组、
          司；CKX53型荧光倒置显微镜购自日本Olympus公司。                      阳性对照组（27 mg/kg 别嘌醇+0.27 mg/kg 秋水仙碱，剂
          1.2 主要药品与试剂                                        量参考文献[10―11]设置）及痛风立安胶囊低、中、高剂
              痛风立安胶囊提取物（体内实验以纯水配制成所需                         量组（2.2、4.5、9.0 g/kg，以提取物计，中剂量为临床等效
          浓度，体外实验以培养基配制成所需浓度并过滤除菌）                           剂量），每组10只。正常组和模型组大鼠灌胃10 mL/kg纯
          由广西中医药大学附属国际壮医医院制剂中心制备；尿                           水，其余各组大鼠灌胃相应药物，连续 14 d。模型组和
          酸 钠 、氧 嗪 酸 钾 购 自 美 国 Sigma 公 司（批 号 分 别 为           给药组大鼠在每次给药8 h后灌胃氧嗪酸钾（1.5 g/kg）+腺
          BC8R7448、STBH8039）；胎牛血清、RPMI-1640 培养基              嘌呤（0.05 g/kg）溶液，并在第 13 天给药后，于大鼠左踝
                                                                                             [11]
          购自美国Gibco公司（批号分别为10099-141、8122665）；               关节腔内注射尿酸钠溶液（5 mg/kg） 以诱导痛风性关
          腺 嘌 呤 购 自 阿 拉 丁 试 剂（上 海）有 限 公 司（批 号                节炎模型（正常组大鼠不造模，灌胃等量纯水即可）。
          E1814045）；别嘌醇购自上海源叶生物科技有限公司（批                      2.1.2 大鼠踝关节肿胀率测量 采用缚线法测量大鼠
          号 Y27O8C48533）；秋水仙碱片购自云南植物药业有限                     注射尿酸钠溶液前后左踝关节同一部位的周长，并计算
          公 司（批 号 20201228）；脂 多 糖（lipopolysaccharide，        肿胀率[肿胀率＝（致炎后踝关节周长－致炎前踝关节
          LPS）、4% 多聚甲醛均购自北京索莱宝生物科技有限公                        周长）/致炎前踝关节周长×100%]。
          司（批号分别为 L8880、BL539A）；乙二胺四乙酸二钠购                    2.1.3 大鼠血清中炎症指标水平的检测 实验结束后，
          自国药集团化学试剂有限公司（批号10019871）；白细胞                      大鼠腹主动脉取血，血样以 3 000 r/min 离心 10 min，采
          介 素 1β（interleukin-1β，IL-1β）酶 联 免 疫 吸 附 试 验        用ELISA法检测血清中IL-1β水平。


          中国药房  2023年第34卷第7期                                                 China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 7    · 815 ·
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