Page 29 - 《中国药房》2023年7期
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(PLA2), thromboxane B2 (TXB2), 6-keto-prostaglandin F1α (6-keto-PGF1α), thromboxane A2 (TXA2), prostaglandin I2
(PGI2), cyclic adenosine monophosphate (cAMP), cyclic guanosine monophosphate (cGMP), β -thromboglobulin (β -TG)],
platelet aggregation rate (maximum aggregation rate, 60 s aggregation rate, 180 s aggregation rate) and fibrinolytic system-related
factors [tissue plasminogen activator (t-PA), plasminogen activator inhibitor 1 (PAI-1)] and the expressions of CD36/PI3K/Akt
signaling pathway-related proteins [CD36, focal adhesion kinase (FAK), phosphatidylinositol 4-phosphate 5-kinase (PIP5K),
PI3K, phosphorylated Akt (p-Akt), p-Akt1/2/3] in platelet were all determined. RESULTS Compared with blank group, the
contents of TC, TG and LDL-C in plasma, whole blood viscosity, plasma viscosity, the plasma levels of FIB, PLT, MPV, vWF,
Fn, PLA2, TXB2, TXA2, cGMP and β-TG, maximum platelet aggregation rate, 60 s aggregation rate, the expressions of PAI-1
in plasma, protein expressions of CD36, FAK, PIP5K, PI3K, p-Akt and p-Akt1/2/3 were significantly increased in the model
group (P<0.05). The content of HDL-C and the levels of 6-keto-PGF1α, PGI2 and t-PA were significantly decreased (P<0.05).
After the intervention of Danshen decoction, most of the above indexes were significantly reversed (P<0.05). CONCLUSIONS
Danshen decoction can improve the physiological characteristics and function of platelets in hyperlipidemia model rats, and its
mechanism may be related to the down-regulation of CD36/PI3K/Akt signaling pathway activity and the reduction of platelet
activation.
KEYWORDS hyperlipemia; Danshen decoction; platelet activation; platelet membrane glycoprotein 4/phosphatidylinositol 3-
kinase/protein kinase B signaling pathway
当前,高脂血症发病率居高不下,血脂异常导致血 司),iMark 型酶标仪(美国 Bio-Rad 公司),LE204E 型分
小板反应性增强,进而引起动脉粥样硬化性疾病或血栓 析天平(瑞士 Mettler Toledo 公司),DYY-7C 型电泳仪、
性疾病 。中医学认为高脂血症引起血小板活化的发生 DYCZ-40D型转移槽、WD-9413B型凝胶成像系统(北京
[1]
与发展属于血瘀证范畴,而活血化瘀类方剂在该类疾病 六一仪器有限公司),NANO 2000型紫外分光光度计(美
的临床应用中可取得较好疗效 [2―3] 。 国Thermo Fisher Scientific公司)。
丹参饮是活血化瘀经典方剂,出自《时方歌括》,由 1.2 主要药品与试剂
丹参、檀香、砂仁3味中药组成,具有活血化瘀、行气止痛 丹参饮(汤剂)由本实验室自制,处方为丹参 30 g、
之功,常用于治疗血瘀证相关疾病。以往的临床研究、 砂仁3 g、檀香3 g,3味中药饮片均购自黑龙江中医药大
实验研究均已证明丹参饮能够显著改善血脂异常以及 学附属第一医院,经黑龙江中医药大学药学院田明教授
该状态下血小板的生理特性和功能异常,然而相关机制 鉴定均符合 2020 年版《中国药典》标准。将上述药材处
的研究尚不深入 [4―5] 。 方量按比例扩大7倍,然后用8倍量(mL/g)水浸泡0.5 h
血小板膜糖蛋白 4(platelet membrane glycoprotein 后回流提取2次,时间分别为90、60 min,合并2次煎液,
CD36)位于血小板细胞膜上,其作为受体能与多种配体 浓缩至每毫升药液含生药总量0.36 g。
(异常血脂成分是其最主要的配体)相结合发挥功能,并 辛伐他汀片购自哈药集团三精明水药业有限公司
激活细胞内磷脂酰肌醇 3-激酶(phosphatidylinositol 3- (批号 201706001);总胆固醇(total cholesterol,TC)、三
kinase,PI3K)/蛋白激酶 B(protein kinase B,Akt)信号通 酰甘油(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high-
路,进而活化血小板,增加心脑血管疾病的发生概 density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆
率 [6―7] 。基于此,本研究采用高脂饲料喂养大鼠以复制 固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)试剂盒
高脂血症模型,通过检测 CD36/PI3K/Akt 信号通路关键 均购自中生北控生物科技股份有限公司(批号分别为
蛋白表达情况,探讨丹参饮对模型大鼠血小板生理特性 182022、187831、180961、180671);血管性血友病因子
和功能的影响及机制,以期为丹参饮治疗高脂血症奠定 (von Willebrand factor,vWF)、纤维连接蛋白(fibronec‐
实验基础。 tin,Fn)、磷脂酶A2(phospholipase A2,PLA2)、血栓素B2
1 材料 (thromboxane B2,TXB2)、6-酮-前列腺素 F1α(6-keto-
1.1 主要仪器 prostaglandin F1α,6-keto-PGF1α)、血 栓 素 A2(throm-
本研究所用主要仪器有 TGL-16G 型高速台式离心 boxane A2,TXA2)、前列腺素(prostaglandin I2,PGI2)、
机(苏州捷美电子有限公司),7600-020型全自动生化分 环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)、
析仪(日本Hitachi公司),LBY-N7500B型全自动血液流 环磷酸鸟苷(cyclic guanosine monophosphate,cGMP)、β-
变仪、C2000-A 型全自动血凝仪(北京普利生仪器有限 血小板球蛋白(β-thromboglobulin,β-TG)、组织型纤溶酶
公司),X500i型全自动血液细胞分析仪(日本Sysmex公 原活化剂(tissue plasminogen activator,t-PA)、纤溶酶原
中国药房 2023年第34卷第7期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 7 · 791 ·