Page 29 - 《中国药房》2023年7期
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(PLA2),  thromboxane  B2 (TXB2),  6-keto-prostaglandin  F1α (6-keto-PGF1α),  thromboxane  A2 (TXA2),  prostaglandin  I2
         (PGI2),  cyclic  adenosine  monophosphate (cAMP),  cyclic  guanosine  monophosphate (cGMP),  β -thromboglobulin (β -TG)],
          platelet aggregation rate (maximum aggregation rate, 60 s aggregation rate, 180 s aggregation rate) and fibrinolytic system-related
          factors  [tissue  plasminogen  activator (t-PA),  plasminogen  activator  inhibitor  1 (PAI-1)]  and  the  expressions  of  CD36/PI3K/Akt
          signaling  pathway-related  proteins  [CD36,  focal  adhesion  kinase (FAK),  phosphatidylinositol  4-phosphate  5-kinase (PIP5K),
          PI3K,  phosphorylated  Akt (p-Akt),  p-Akt1/2/3]  in  platelet  were  all  determined.  RESULTS  Compared  with  blank  group,  the
          contents of TC, TG and LDL-C in plasma, whole blood viscosity, plasma viscosity, the plasma levels of FIB, PLT, MPV, vWF,
          Fn, PLA2, TXB2, TXA2, cGMP and β-TG, maximum platelet aggregation rate, 60 s aggregation rate, the expressions of PAI-1
          in  plasma,  protein  expressions  of  CD36,  FAK,  PIP5K,  PI3K,  p-Akt  and  p-Akt1/2/3  were  significantly  increased  in  the  model
          group (P<0.05). The  content  of  HDL-C  and  the  levels  of  6-keto-PGF1α,  PGI2  and  t-PA  were  significantly  decreased (P<0.05).
          After  the  intervention  of  Danshen  decoction,  most  of  the  above  indexes  were  significantly  reversed (P<0.05).  CONCLUSIONS
          Danshen  decoction  can  improve  the  physiological  characteristics  and  function  of  platelets  in  hyperlipidemia  model  rats,  and  its
          mechanism  may  be  related  to  the  down-regulation  of  CD36/PI3K/Akt  signaling  pathway  activity  and  the  reduction  of  platelet
          activation.
          KEYWORDS    hyperlipemia;  Danshen  decoction;  platelet  activation;  platelet  membrane  glycoprotein  4/phosphatidylinositol  3-
          kinase/protein kinase B signaling pathway


              当前,高脂血症发病率居高不下,血脂异常导致血                         司),iMark 型酶标仪(美国 Bio-Rad 公司),LE204E 型分
          小板反应性增强,进而引起动脉粥样硬化性疾病或血栓                           析天平(瑞士 Mettler Toledo 公司),DYY-7C 型电泳仪、
          性疾病 。中医学认为高脂血症引起血小板活化的发生                           DYCZ-40D型转移槽、WD-9413B型凝胶成像系统(北京
                [1]
          与发展属于血瘀证范畴,而活血化瘀类方剂在该类疾病                           六一仪器有限公司),NANO 2000型紫外分光光度计(美
          的临床应用中可取得较好疗效             [2―3] 。                  国Thermo Fisher Scientific公司)。
              丹参饮是活血化瘀经典方剂,出自《时方歌括》,由                        1.2 主要药品与试剂
          丹参、檀香、砂仁3味中药组成,具有活血化瘀、行气止痛                             丹参饮(汤剂)由本实验室自制,处方为丹参 30 g、
          之功,常用于治疗血瘀证相关疾病。以往的临床研究、                           砂仁3 g、檀香3 g,3味中药饮片均购自黑龙江中医药大
          实验研究均已证明丹参饮能够显著改善血脂异常以及                            学附属第一医院,经黑龙江中医药大学药学院田明教授
          该状态下血小板的生理特性和功能异常,然而相关机制                           鉴定均符合 2020 年版《中国药典》标准。将上述药材处
          的研究尚不深入       [4―5] 。                              方量按比例扩大7倍,然后用8倍量(mL/g)水浸泡0.5 h
              血小板膜糖蛋白 4(platelet  membrane  glycoprotein     后回流提取2次,时间分别为90、60 min,合并2次煎液,
          CD36)位于血小板细胞膜上,其作为受体能与多种配体                         浓缩至每毫升药液含生药总量0.36 g。
         (异常血脂成分是其最主要的配体)相结合发挥功能,并                               辛伐他汀片购自哈药集团三精明水药业有限公司
          激活细胞内磷脂酰肌醇 3-激酶(phosphatidylinositol 3-           (批号 201706001);总胆固醇(total cholesterol,TC)、三
          kinase,PI3K)/蛋白激酶 B(protein kinase B,Akt)信号通       酰甘油(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high-
          路,进而活化血小板,增加心脑血管疾病的发生概                             density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆
          率 [6―7] 。基于此,本研究采用高脂饲料喂养大鼠以复制                      固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)试剂盒
          高脂血症模型,通过检测 CD36/PI3K/Akt 信号通路关键                   均购自中生北控生物科技股份有限公司(批号分别为
          蛋白表达情况,探讨丹参饮对模型大鼠血小板生理特性                           182022、187831、180961、180671);血管性血友病因子
          和功能的影响及机制,以期为丹参饮治疗高脂血症奠定                          (von Willebrand factor,vWF)、纤维连接蛋白(fibronec‐
          实验基础。                                              tin,Fn)、磷脂酶A2(phospholipase A2,PLA2)、血栓素B2
          1 材料                                              (thromboxane B2,TXB2)、6-酮-前列腺素 F1α(6-keto-
          1.1 主要仪器                                           prostaglandin  F1α,6-keto-PGF1α)、血 栓 素 A2(throm-
              本研究所用主要仪器有 TGL-16G 型高速台式离心                     boxane A2,TXA2)、前列腺素(prostaglandin I2,PGI2)、
          机(苏州捷美电子有限公司),7600-020型全自动生化分                      环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)、
          析仪(日本Hitachi公司),LBY-N7500B型全自动血液流                  环磷酸鸟苷(cyclic guanosine monophosphate,cGMP)、β-
          变仪、C2000-A 型全自动血凝仪(北京普利生仪器有限                       血小板球蛋白(β-thromboglobulin,β-TG)、组织型纤溶酶
          公司),X500i型全自动血液细胞分析仪(日本Sysmex公                     原活化剂(tissue plasminogen activator,t-PA)、纤溶酶原


          中国药房  2023年第34卷第7期                                                 China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 7    · 791 ·
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