Page 23 - 《中国药房》2023年7期

sperm in KK-Ay spontaneous diabetic mice （P＜0.05 or P＜0.01）. The morphology and ultrastructure of spermatogenic cells in
each layer of the seminiferous tubules were all improved. The levels of GSH， SOD and LDH in testicular tissue，the levels of the
metabolic product glucose fructose-1，6-diphosphate， 3-phosphate glycerate， 3-phosphate glyceraldehyde， lactic acid and pyruvate，
the expressions of HK， PFK， PK and LDH mRNA were all significantly increased（P＜0.05 or P＜0.01）； the levels of AGEs in
serum and testicular tissue， the expression of RAGE protein and the ratio of Bax to Bcl-2 in testicular tissue were significantly
decreased（P＜0.05 or P＜0.01）. Aminoguanidine and FPS-ZM1 could significantly improve the levels of most of above indicators
in mice（P＜0.05 or P＜0.01）. CONCLUSIONS Catalpol shows significant improvement effects on testicular lesions of KK-Ay
spontaneous diabetic mice， and its mechanism of action was associated with upregulation of AGEs/RAGE signaling pathway-
mediated glycolysis.
KEYWORDS catalpol； glycolysis； diabetes； testicular lesions； advanced glycation end products； the receptor of advanced
glycation end products

长期的高血糖会导致男性生殖器官受损、生殖细胞 30AD 型超高效液相色谱系统购自日本 Shimadzu 公司；
[1]
发育不良、生殖激素异常等现象 。糖尿病患者中患有 QTRAP 5500型质谱仪购自美国SCIEX公司。
生殖障碍的男性高达50%，其生殖障碍发病率为非糖尿 1.2 主要药品与试剂
[2]
病人群的 2～5 倍 ，因此，研究糖尿病对生殖的影响具 梓醇（批号 Z-005-160502，纯度大于 98%）购自成都
有重要的现实意义。 瑞芬思生物科技有限公司；血糖试纸（批号201807）购自
正常状态下睾丸是一个氧含量较低的器官，睾丸的 拜耳医药保健有限公司；RAGE 抑制剂 FPS-ZM1（批号
糖代谢对精子的发生和成熟至关重要，生精细胞尤其是 2908726，纯度 100%）购自德国 Merck Millipore 公司；
精母细胞主要利用支持细胞葡萄糖酵解产生的乳酸作 AGEs抑制剂氨基胍（批号079K1734V，纯度100%）购自
为能量底物 [3―4] 。晚期糖基化终末产物（advanced glyca‐ 美国 Sigma 公司；兔源 RAGE 单克隆抗体（批号 ab3611）
tion end products，AGEs）是长期高血糖状态下葡萄糖分 购自美国 Abcam 公司；小鼠源 B 细胞淋巴瘤 2（B-cell
子与体内蛋白质发生非酶糖基化反应所形成的不可逆 lymphoma-2，Bcl-2）单克隆抗体、小鼠源 Bcl-2 相关 X 蛋
强活性物质。本课题组前期研究认为，AGEs 是糖尿病 白（Bcl-2-associated X protein，Bax）单克隆抗体（批号分
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“肾阴亏虚、内热伤阴津”的重要物质基础 ，AGEs 及其 别为sc-7382、sc-7480）购自美国Santa Cruz公司；谷胱甘
受 体（the receptor of advanced glycation end products， 肽（glutathione，GSH）测定试剂盒、超氧化物歧化酶（su‐
RAGE）在男性糖尿病患者的睾丸、附睾、精子、生精上 peroxide dismutase，SOD）测定试剂盒、乳酸脱氢酶（lac‐
皮、精原细胞和精母细胞中均有表达，并显著高于非糖尿病 tate dehydrogenase，LDH）测定试剂盒、AGEs 测定试剂
患者，且精子DNA断裂与RAGE高表达密切相关 。 盒（批号分别为 A006-2-1、A001-3-2、A020-2-2、H250-1-
[6]
中医药在防治糖尿病及其并发症方面有着悠久的 2）均购自南京建成生物工程研究所有限公司；Trizol 试
历史和显著的疗效，肾阴亏虚是糖尿病雄性生殖损伤的 剂、RNA 逆转录试剂盒、SYBR 荧光探针（批号分别为
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核心中医病机 。有研究报道，生地黄性味甘寒，具有清 10606ES60、11123ES60、11203ES08）购自翌圣生物科技
[8]
热凉血、养阴生津的功效 ，可有效改善糖尿病模型小鼠 （上海）股份有限公司；免疫组化试剂盒（批号 SA1028）
[9]
尿多、尿浊的现象，减轻肾组织损伤和病变 。梓醇为生 购自武汉博士德生物工程有限公司。
地黄质量控制的活性成分 ，但其是否可改善糖尿病睾 1.3 实验动物与饲料
[8]
丸病变尚不明确。故本研究拟在“肾主生殖”的中医理 本研究所用动物有SPF级14～15周龄C57BL/6J小
论指导下，通过KK-Ay自发性糖尿病小鼠考察梓醇对糖 鼠6只、KK-Ay自发性糖尿病小鼠24只，雄性，均购自北
尿病睾丸病变的改善作用及机制，并采用 AGEs、RAGE 京华阜康生物科技公司，动物生产许可证号为 SCXK
的抑制剂作为阳性对照药来探讨AGEs/RAGE信号通路 （京）2019-0008。高脂饲料（碳水化合物比例为 48.5%，
对睾丸糖酵解的调控作用，以期为梓醇在糖尿病生殖并 脂肪比例为17.9%，蛋白质比例为17.5%）购自北京华阜
发症中的应用提供参考。 康生物科技公司；普通饲料购自南京江宁青龙山动物繁
1 材料 殖场。本研究动物实验遵循南京中医药大学伦理委员
1.1 主要仪器 会的规定进行，伦理批号为201903A019。
Infinite M200Pro 型酶标仪购自瑞士 Tecan 公司； 2 方法
Series 3 型 CO2培养箱购自美国 Thermo Fisher Scientific 2.1 动物分组与给药
公司；qTower型实时定量聚合酶链式反应（PCR）仪购自 将KK-Ay自发性糖尿病小鼠适应性喂养2周后，测
德国 AJ 公司；Tanon-5200Multi 型化学发光凝胶成像系 量其空腹血糖，将血糖值≥10 mmol/L 的动物作为糖尿
统购自上海天能生命科学有限公司；Nexera X2 LC- 病模型小鼠，然后随机分为模型组、梓醇组（100 mg/kg）、

中国药房 2023年第34卷第7期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 7 · 785 ·