Page 33 - 《中国药房》2023年1期
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3.3 XBN 对模型大鼠软骨组织中分解代谢相关基因                         3.5 XBN 对模型大鼠软骨组织中 AMPK/mTOR 信号
          mRNA表达的影响                                          通路相关蛋白表达的影响
              与空白组比较,模型组大鼠软骨组织中 ADAMTS-                          与空白组比较,模型组大鼠软骨组织中AMPK蛋白

          4、ADAMTS-5、MMP-3、MMP-13 mRNA 的表达水平均                的磷酸化水平显著降低(P<0.05),mTOR蛋白的磷酸化
          显著升高(P<0.05);与模型组比较,各给药组大鼠软骨                       水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,各给药组大鼠
                                                             软骨组织上述指标水平均显著逆转(P<0.05);与 XBN
          组织中上述指标水平均显著降低(P<0.05);与 XBN 组
                                                             组比较,XBN+二甲双胍组大鼠软骨组织中 AMPK 蛋白
          比较,XBN+二甲双胍组大鼠软骨组织中上述指标水平
                                                             的磷酸化水平显著升高(P<0.05),mTOR蛋白的磷酸化
          均显著降低(P<0.05)。结果见表3。
                                                             水平显著降低(P<0.05)。结果见图4、表5。
         表3 各组大鼠软骨组织中分解代谢相关基因 mRNA
               的表达水平测定结果(x±s,n=3)                               AMPK                                    62 kDa
          组别        ADAMTS-4 mRNA  ADAMTS-5 mRNA  MMP-3 mRNA  MMP-13 mRNA
          空白组         1.00±0.00  1.00±0.00  1.00±0.00  1.00±0.00  p-AMPK                                62 kDa
          模型组         1.91±0.08 a  1.61±0.08 a  2.57±0.06 a  2.23±0.07 a
          XBN组        1.48±0.07 b  1.37±0.06 b  1.91±0.04 b  1.62±0.07 b
          XBN+二甲双胍组   1.23±0.04 c  1.19±0.08 c  1.66±0.11 c  1.38±0.05 c  mTOR                         289 kDa
             a:与空白组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05;c:与XBN组
         比较,P<0.05
                                                               p-mTOR                                  289 kDa
          3.4 XBN对模型大鼠软骨组织中分解代谢相关蛋白表
          达的影响                                                 GAPDH                                    37 kDa
              与空白组比较,模型组大鼠软骨组织中 ADAMTS-                                 空白组     模型组    XBN组  XBN+二甲双胍组
          4、ADAMTS-5、MMP-3、MMP-13 蛋白的表达水平均显                  图4 各组大鼠软骨组织中 AMPK/mTOR 信号通路相
          著升高(P<0.05);与模型组比较,各给药组大鼠软骨组                            关蛋白表达的电泳图
          织中上述指标水平均显著降低(P<0.05);与 XBN 组比                     表5 各组大鼠软骨组织中 AMPK/mTOR 信号通路相
                                                                  关蛋白的磷酸化水平测定结果(x±s,n=3)
          较,XBN+二甲双胍组上述指标水平均显著降低(P<
                                                              组别                   p-AMPK/AMPK     p-mTOR/mTOR
          0.05)。结果见图3、表4。
                                                              空白组                   1.98±0.13       0.21±0.03
                                                              模型组                   0.32±0.05 a     2.56±0.09 a
           ADAMTS-4                                 90 kDa    XBN组                  0.71±0.07 b     1.62±0.09 b
                                                              XBN+二甲双胍组             1.19±0.06 c     0.88±0.11 c
                                                                a:与空白组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05;c:与XBN组
           ADAMTS-5                                 75 kDa
                                                             比较,P<0.05
                                                             4 讨论
             MMP-3                                  47 kDa
                                                                 KOA归属于中医“痹证”“痿证”“骨痹”“筋痹”等范
                                                             畴,病机多为本虚标实,肝肾不足为本,风寒湿邪气外侵
            MMP-13                                  54 kDa
                                                                 [1]
                                                             为标 。XBN 具有补益肝肾、温经散寒、柔肝养血的功
                                                               [10]
                                                             效 。本课题组前期研究显示,XBN 对 KOA 具有较好
             GAPDH                                  37 kDa
                                                             的治疗作用     [10―12] ,但具体作用机制至今尚未完全阐明。
                     空白组     模型组     XBN组  XBN+二甲双胍组
                                                             本研究通过对KOA模型大鼠的软骨组织进行番红O-固
         图3 各组大鼠软骨组织中分解代谢相关蛋白表达的电
                                                             绿染色发现,与空白组相比,模型组大鼠软骨组织结构
               泳图
                                                             分层紊乱,表面不平整,软骨细胞分布不均匀,软骨层基
         表4 各组大鼠软骨组织中分解代谢相关蛋白的表达水
                                                             质淡染,潮线出现中断,且 Mankin 评分显著升高;经过
               平测定结果(x±s,n=3)
                                                             XBN或XBN+二甲双胍干预后,大鼠软骨上述病理改变
          组别        ADAMTS-4/GAPDH ADAMTS-5/GAPDH MMP-3/GAPDH  MMP-13/GAPDH
          空白组         0.21±0.09  0.28±0.06  0.53±0.12  0.43±0.07  均明显减轻,且 Mankin 评分明显降低。这表明 XBN 能
          模型组         1.33±0.07 a  1.21±0.16 a  1.83±0.11 a  1.66±0.07 a  明显改善大鼠软骨组织的病理损伤。
          XBN组        0.48±0.03 b  0.65±0.07 b  1.25±0.09 b  1.37±0.06 b  KOA最显著的病理变化是关节软骨渐进式的降解、
          XBN+二甲双胍组   0.33±0.04 c  0.36±0.06 c  0.81±0.08 c  0.89±0.13 c
                                                             退变和破坏,表现为软骨蛋白合成酶减少而分解酶大量
             a:与空白组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05;c:与XBN组
         比较,P<0.05                                           释放,从而导致软骨胶原亚型发生改变,软骨厚度变薄、


          中国药房  2023年第34卷第1期                                                  China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 1    · 27 ·
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