Page 65 - 《中国药房》2022年23期
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          健脾和胃、消积导滞为主 。消食颗粒是由山楂、乌梅、                          2.1.3 色谱条件 采用 Agilent C18色谱柱（50 mm×2.1
          神曲3味中药精制而成的复方颗粒，临床上用于脾胃气                           mm），以0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相进行梯
          滞、食积内停所致的脘腹胀满、腹泻便溏。本方中山楂、                          度洗脱（0～3 min，95% A；3～5 min，95%A→90% A；5～

          乌梅、神曲3味中药联合使用，具有健脾消食之功，但目                          15  min，90%A→80%A；15～25  min，80%A→55%A；
          前消食颗粒发挥药理作用的物质基础尚不清楚。鉴于                            25～35  min，55%A→20%A；35～35.5  min，20%A→
          此，本研究采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质                           95%A；35.5～40 min，95%A）；柱温为 30 ℃；流速为 0.4
          谱（UPLC-Q-TOF-MS）技术对消食颗粒进行化学成分分                     mL/min；检测波长为 325 nm；进样量为 3 μL；分析时间
          析，然后利用网络药理学及分子对接技术探究其治疗                            为 40 min，柱色谱洗脱液不经分流直接导入质谱系统
          FD 的作用靶点，以期为消食颗粒的质量控制及合理利                          检测。
          用提供参考依据。                                           2.1.4 质谱条件 采用电喷雾离子源（ESI），在正、负离
          1 材料                                               子模式下检测，二级质谱采集采用Auto MS/MS模式；干

          1.1 主要仪器                                           燥气体流速为 6 L/min，干燥气体温度为 250 ℃；毛细管
                                                             电压为3 500 V，雾化器压力为35 psi，碎裂电压为175 V，
              本研究所用的主要仪器有：Agilent 1290 型 UPLC
                                                             二级质谱碰撞电压为 15 eV；质谱采集范围为质荷比
          仪、Agilent 6550型三重四极杆高分辨质谱仪（配置Dual
                                                            （m/z）100～3 000。
          AJS ESI 离子源）[安捷伦科技（中国）有限公司]、JA
                                                             2.1.5 成分鉴定 将“2.1.1”“2.1.2”项下混合对照品溶
          21002 型精密电子天平（上海舜宇恒平科学仪器有限
                                                             液和供试品溶液按照“2.1.3”“2.1.4”项下条件进样分析，
          公司）。
                                                             获得正、负离子模式下的总离子流图。通过一级和二级
          1.2 主要药品与试剂
                                                             质谱信息分析并结合相关文献进行成分鉴定。
              本研究所用的主要药品与试剂有：消食颗粒（吉林
                                                             2.2 基于网络药理学的消食颗粒治疗 FD 的潜在作用
          吉春制药股份有限公司，批号 210110，规格 15 g/袋），对
                                                             机制研究
          照品琥珀酸、柠檬酸、α-亚油酸、L-缬氨酸、苹果酸（成都
                                                             2.2.1 活性成分及其作用靶点的筛选 选取从消食颗
          埃 法 生 物 科 技 有 限 公 司 ，批 号 分 别 为 AF20081654、
                                                             粒中鉴定出的化学成分作为目标成分，将其分别输入
          AF200710101、AF20092333、20050253、20051251，纯度
                                                             TCMID 数据库（http：//www.megabionet.org/tcmid/）、中
          均不低于98%），对照品槲皮素、异鼠李素、牡荆素、表儿
                                                             药分子机制的生物信息分析工具（BATMAN-TCM，
          茶素（中国食品药品检定研究院，批号分别为 100081-
                                                             http：//bionet.ncpsb.org/batman-tcm/）及中药系统药理学
          200907、110860-201109、111687-200602、110878-200102，
                                                             分 析 平 台 数 据 库（TCMSP，https：//old. tcmsp-e. com/tc‐
          纯度均不低于98%），对照品儿茶素、山柰酚、熊果酸、木
                                                             msp.php）中，根据口服生物利用度（oral bioavailability，
          犀草素（上海源叶生物科技有限公司，批号分别为
                                                                                                       [3]
                                                             OB）≥30% 和 Lipinski 类药五原则筛选活性成分 。然
          20111218、B21126、B21403、20120521，纯 度 均 不 低 于
                                                             后利用 UniProt 数据库（https：//www.uniprot.org/）获取靶
          98%）。
                                                             点蛋白，去重后即得到消食颗粒活性成分的靶点。
          2 方法
                                                             2.2.2 FD相关靶点基因的筛选 以“functional dyspepsia”
          2.1 基于UPLC-Q-TOF-MS技术的消食颗粒化学成分                     为关键词在 GeneCards 数据库（https：//www.genecards.
          鉴定                                                 org/）、Drugbank 数据库（https：//go.drugbank.com/）及在
          2.1.1 混合对照品溶液的制备 分别称取槲皮素、牡荆                        线人类孟德尔遗传数据库（OMIM，https：//omim.org/）中
          素、苹果酸、柠檬酸、表儿茶素、山柰酚、异鼠李素、熊果                         进行检索，获取与FD相关的靶点基因。
          酸、琥珀酸、L-缬氨酸、木犀草素、α-亚油酸、儿茶素对照                       2.2.3 “药物-成分-靶点”互作网络的构建 利用生物信
          品适量，加甲醇制成各对照品质量浓度均为20.0 μg/mL                      息学在线数据库作图工具（https：//www.bioinformatics.
          的混合对照品溶液。                                          com.cn/），获得成分靶点和疾病靶点交集图。将交集靶

          2.1.2 供试品溶液的制备 取消食颗粒粉末 5.0 g，加                     点导入 STRING 数据库（https：//cn.string-db.org/）中，获
          60% 乙醇制成质量浓度为 1.0 g/mL 的溶液，超声（频率                   得靶点间相互作用关系并导入 Cytoscape 3.9.0 软件，构
          40 kHz，功率 100 W）10 min，过 0.22 μm 微孔滤膜，收集           建蛋白质-蛋白质相互作用（protein-protein interaction，
          滤液，即得。                                             PPI）网络，同时计算蛋白之间的度值、介度中心度和接


          中国药房  2022年第33卷第23期                                              China Pharmacy  2022 Vol. 33  No. 23    · 2875 ·
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