Page 39 - 《中国药房》2022年22期

Pro-Plus 6软件测量阳性表达区域的平均光密度（IOD）。 和尿素氮水平均显著降低（P＜0.05 或 P＜0.01），结果
2.6 肾皮质中 Fstl1、Akt、p-Akt 和 Snail1 蛋白表达的 见表1。
检测 表1 OST对小鼠生化指标的影响（x±s，n＝10）
采用 Western blot 法进行检测。取各组小鼠肾皮质 组别 空腹血糖/（mmol/L） 24 h尿蛋白/（μg/d） Scr/（μmol/L） 尿素氮/（mmol/L）

100 mg，适当研磨后制成匀浆，12 000 r/min 离心 30 min 正常对照组 5.45±1.23 10.78±0.23 7.50±1.28 12.43±1.42
模型组 27.43±3.64 a 32.21±1.65 a 22.60±3.62 a 34.15±4.62 a
后收集上清。采用二喹啉甲酸法检测蛋白浓度，加热煮
OST低剂量组 24.12±2.28 b 28.75±1.12 b 17.54±2.47 b 29.86±3.75 b
沸变性5 min，按每孔100 μg蛋白样品上样，随后电泳分 OST中剂量组 20.27±2.63 b 26.65±1.33 b 14.91±1.94 b 26.72±3.21 b
离蛋白、转膜，用5%脱脂奶粉室温封闭1 h；洗膜后加入 OST高剂量组 17.73±1.96 c 21.79±1.09 c 10.53±1.85 c 20.53±3.05 c
a：与正常对照组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与模
相 应 一 抗（Fstl1 的 质 量 浓 度 为 1 µg/mL，Akt、p-Akt、
型组比较，P＜0.01
Snail1 和 β-actin 的稀释比例分别为 1∶3 000、1∶5 000、
3.2 OST对小鼠肾间质纤维化的影响
1∶500、1∶1 000），4 ℃过夜孵育；洗膜后加入相应二抗
正常对照组小鼠肾小管上皮细胞排列整齐、结构清
（稀释比例均为1∶2 000），室温孵育1 h，显影、成像。使
晰，肾脏组织内极少有胶原纤维分布，蓝色较淡。模型
用 Image J 软件分析蛋白条带的光密度，以目标蛋白与
组小鼠肾间质胶原纤维增多，间质内有明显蓝色深染的
内参β-actin的光密度比值反映目标蛋白的表达水平，以
胶原纤维，呈灶状分布，且胶原纤维沉积占比显著高于
p-Akt与Akt的光密度比值反映Akt的磷酸化水平，并进
正常对照组（P＜0.01）。与模型组比较，OST 各剂量组
行归一化处理。
小鼠肾间质蓝色深染的胶原纤维沉积占比均显著降低
2.7 统计学方法
（P＜0.05或P＜0.01）。结果见图1。
应用SPSS 17.0软件进行数据分析，计量资料以x± 3.3 OST 对小鼠肾皮质中 E-cadherin 和 vimentin 表达
s描述，多组间比较采用单因素方差分析，两组间比较采 水平的影响
用LSD-t检验。检验水准α＝0.05。 与 正 常 对 照 组 比 较 ，模 型 组 小 鼠 肾 皮 质 中 E-

3 结果 cadherin 表达水平显著降低（P＜0.01），vimentin 表达水
3.1 OST对小鼠生化指标的影响 平显著升高（P＜0.01）。与模型组比较，OST 各剂量组
与正常对照组比较，模型组小鼠空腹血糖、24 h 尿 小鼠肾皮质中E-cadherin表达水平均显著升高（P＜0.05
蛋白、Scr 和尿素氮水平均显著升高（P＜0.01）；与模型 或 P＜0.01），vimentin 表达水平均显著降低（P＜0.05 或
组比较，OST 各剂量组小鼠空腹血糖、24 h 尿蛋白、Scr P＜0.01）。结果见图2、图3。

A.正常对照组（Masson染色，×200） B.模型组（Masson染色，×200） C.OST低剂量组（Masson染色，×200）
25 a
20
胶原纤维沉积占比/% 15 b b c

10

0 5
正常对 模型组 OST低 OST中 OST高
照组 剂量组 剂量组 剂量组
D.OST中剂量组（Masson染色，×200） E.OST高剂量组（Masson染色，×200） F.胶原纤维沉积占比（n＝10）
a：与正常对照组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与模型组比较，P＜0.01
图1 OST对小鼠肾间质纤维化的影响

中国药房 2022年第33卷第22期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 22 · 2721 ·