Page 83 - 《中国药房》2022年16期

“2.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图。将得到的图 表4 10批肉桂人参颗粒的相似度评价结果
谱导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）》， 编号 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 R
S1 1.000 0.952 0.986 0.960 0.991 0.965 0.993 0.995 0.985 0.988 0.994
以各成分色谱响应均较强的 S1 样品为参照，采用中位
S2 0.952 1.000 0.943 0.989 0.973 0.851 0.961 0.942 0.981 0.976 0.968
数法，时间窗宽度为0.3 min，经多点校正后进行Mark峰 S3 0.986 0.943 1.000 0.965 0.988 0.964 0.988 0.991 0.986 0.987 0.993
匹配，生成肉桂人参颗粒的HPLC叠加指纹图谱和对照 S4 0.960 0.989 0.965 1.000 0.984 0.882 0.972 0.957 0.990 0.990 0.981
S5 0.991 0.973 0.988 0.984 1.000 0.945 0.996 0.992 0.997 0.998 0.999
图谱（R）。结果显示，10批肉桂人参颗粒共有16个共有 S6 0.965 0.851 0.964 0.882 0.945 1.000 0.961 0.977 0.930 0.936 0.954
峰。结果见图2。 S7 0.993 0.961 0.988 0.972 0.996 0.961 1.000 0.997 0.993 0.993 0.998
S8 0.995 0.942 0.991 0.957 0.992 0.977 0.997 1.000 0.985 0.987 0.995
260 S9 0.985 0.981 0.986 0.990 0.997 0.930 0.993 0.985 1.000 0.998 0.997
240
220 S10 0.988 0.976 0.987 0.990 0.998 0.936 0.993 0.987 0.998 1.000 0.998
200 6
180 15 R 0.994 0.968 0.993 0.981 0.999 0.954 0.998 0.995 0.997 0.998 1.000
160 1 2 3 4 5 7 8 9 10 11 12 13 14 16
U/mV 140 R S10 0 5 平方欧氏距离 20 25
120
15
10
100 S9
80 S8 S7
S7
60 S6
40 S5 S8
S4
20 S3
0 S2 S9
S1
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 S6
t/min
图2 10批肉桂人参颗粒的HPLC叠加指纹图谱和对照 S2
图谱 S4
S5
2.3.5 共有峰的指认 分别取“2.2.1”项下混合对照品 S10
溶液和“2.2.2”项下供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件进 S1
S3
样测定，记录色谱图（见图3）。通过与混合对照品比对，
图4 10批肉桂人参颗粒的聚类分析树状图
共指认了 4 个共有峰，分别为甘草苷（6 号峰）、肉桂酸
2.5 主成分分析
（10号峰）、桂皮醛（11号峰）、甘草酸铵（15号峰）。
以16个共有峰峰面积为原始数据进行标准化处理，
以主成分的特征值及贡献率为依据，采用 SPSS 25.0 软
160
140
6 11 件进行主成分分析。结果显示，前3个主成分的特征值
120 15
10
100 6 大于 1，累计方差贡献率为 91.918％。结果见表 5（表中
U/mV 80 15
60 仅展示前3个主成分的数据）。
11
40 表5 主成分的特征值及方差贡献率
20 10
0 主成分 特征值 方差贡献率/％ 累计方差贡献率/％
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 A1 10.559 65.992 65.992
t/min A2 2.325 14.530 80.523
6：甘草苷；10：肉桂酸；11：桂皮醛；15：甘草酸铵 A3 1.823 11.396 91.918
图3 混合对照品溶液与供试品溶液的HPLC图
2.6 正交偏最小二乘法-判别分析
2.3.6 相似度评价 采用《中药色谱指纹图谱相似度评 以 16 个共有峰的峰面积为变量，采用 SIMCA 14.1
价系统（2012 版）》对 10 批肉桂人参颗粒指纹图谱的相 软件进行正交偏最小二乘法-判别分析。变量重要性投
似度进行评价。结果显示，10批样品的指纹图谱与对照 影（variable importance in projection，VIP）值可用来衡量
图谱的相似度均大于0.95，表明不同批次样品的成分种 各共有峰的表达模式对样本分类判别的影响强度和解
[15]
类稳定，所建指纹图谱可以反映肉桂人参颗粒的整体特 释能力，以辅助筛选质量差异标志物 。结果显示，10
征。结果见表4。 批样品数据均落在95％置信区间内，10批样品可分为3
2.4 聚类分析 类，其中 S3 为一类，S1～S2、S4～S5、S10 为一类，S6～
以16个共有峰的峰面积为变量，以平方欧氏距离为 S9为一类，与聚类分析结果一致。以VIP值大于1为标
[15]
度量标准，采用 SPSS 25.0 软件进行聚类分析。结果显 准筛选影响样品质量的差异标志物 ，结果显示，有4个
示，当类间距离为 10 时，10 批样品可聚为 3 类，其中 S3 共有峰的 VIP 值大于 1，分别为 11 号峰（桂皮醛）、15 号
为一类，S1～S2、S4～S5、S10为一类，S6～S9为一类，表 峰（甘草酸铵）、6号峰（甘草苷）、9号峰（成分未知）。结
明不同批次样品中各成分含量存在差异。结果见图4。 果见图6、图7。

中国药房 2022年第33卷第16期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 16 ·1993 ·