Page 82 - 《中国药房》2022年16期

2.2.5 线性关系考察 精密吸取“2.2.1”项下混合对照
品贮备液，用甲醇逐级稀释，得系列质量浓度的工作溶
液（甘 草 酸 铵 质 量 浓 度 分 别 为 17.98、35.95、89.89、
179.77、359.54 μg/mL，甘草苷质量浓度分别为 11.02、
22.03、55.08、110.16、220.32 μg/mL，肉桂酸质量浓度分别
为0.57、1.13、2.83、5.66、11.32 μg/mL，桂皮醛质量浓度分
别为3.34、6.68、16.70、33.40、66.80 μg/mL）。取上述系列
工作溶液和混合对照品贮备液，按“2.1”项下色谱条件进
样测定，记录峰面积。以各待测成分的质量浓度为横坐
标（X）、峰面积为纵坐标（Y）进行线性回归。结果见表1。
表1 甘草酸铵等4种成分的回归方程与线性范围
待测成分 回归方程 r 线性范围/（μg/mL）
甘草酸铵 Y＝103 145X+3 834.9 0.999 8 17.98～898.85
甘草苷 Y＝142 218X－1 115.7 1.000 0 11.02～550.80
肉桂酸 Y＝38 473X－3 137.3 0.999 9 0.57～28.30
桂皮醛 Y＝174 595X－6 695.0 1.000 0 3.34～167.00
2.2.6 精密度试验 精密吸取“2.2.1”项下混合对照品
溶液，按“2.1”项下色谱条件连续进样测定 6 次，记录峰
面积。结果显示，甘草酸铵、甘草苷、肉桂酸、桂皮醛峰
面积的 RSD 分别为 0.10％、0.09％、0.10％、0.10％（n＝
6），表明仪器精密度良好。
2.2.7 稳定性试验 取“2.2.2”项下供试品溶液（编号
S1），分别于室温下放置 0、4、8、12、16、20、24 h 时按
“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。结果显示，
甘草酸铵、甘草苷、肉桂酸、桂皮醛峰面积的RSD分别为
0.78％、1.14％、0.62％、0.77％（n＝7），表明供试品溶液
于室温下放置24 h内基本稳定。
2.2.8 重复性试验 精密称取肉桂人参颗粒（编号 S1）
共6份，每份约1 g，精密称定，按“2.2.2”项下方法制备供
试品溶液，再按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面
积并按外标法计算样品含量。结果显示，甘草酸铵、甘
草 苷 、肉 桂 酸 、桂 皮 醛 含 量 的 RSD 分 别 为 1.21％ 、
1.72％、1.92％、2.31％（n＝6），表明方法重复性良好。
2.2.9 加样回收率试验 取已知量的肉桂人参颗粒1 g
（编号 S1），分别精密加入各单一对照品，按“2.2.2”项下
方法制备供试品溶液，再按“2.1”项下色谱条件进样测
定，记录峰面积并计算加样回收率。结果见表2。
2.2.10 样品含量测定 取 10 批肉桂人参颗粒（编号
S1～S10）适量，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，再
按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并按外标法
计算样品含量。每样品平行测定3次。结果见表3。
2.3 肉桂人参颗粒HPLC指纹图谱的建立
2.3.1 精密度试验 取“2.2.2”项下供试品溶液（编号
S1），按“2.1”项下色谱条件连续进样测定6次，记录色谱
图。以桂皮醛为参照峰（分离度好、峰面积大、保留时间
适中），计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积。
结果显示，各共有峰相对保留时间的 RSD≤2.02％（n＝
6），相对峰面积的 RSD≤2.04％（n＝6），表明仪器精密
度良好。
·1992 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 16
表 2 甘草酸铵等 4 种成分的加样回收率试验结果
（n＝6）
待测成分 已知量/mg 加入量/mg 测得量/mg 加样回收率/％ 平均加样回收率/％ RSD/％
甘草酸铵 2.002 2 1.991 1 4.003 7 100.52 99.91 1.05
2.002 2 1.991 1 3.985 8 99.62
2.002 2 1.991 1 4.023 9 101.54
2.002 2 1.991 1 3.993 4 100.01
2.002 2 1.991 1 3.977 6 99.21
2.002 2 1.991 1 3.964 2 98.54
甘草苷 1.287 8 1.285 2 2.587 4 101.12 100.88 1.28
1.287 8 1.285 2 2.587 3 101.11
1.287 8 1.285 2 2.612 6 103.08
1.287 8 1.285 2 2.567 8 99.60
1.287 8 1.285 2 2.567 4 99.56
1.287 8 1.285 2 2.583 0 100.78
肉桂酸 0.086 0 0.088 3 0.172 9 98.41 98.60 0.55
0.086 0 0.088 3 0.173 0 98.53
0.086 0 0.088 3 0.173 8 99.43
0.086 0 0.088 3 0.173 4 98.98
0.086 0 0.088 3 0.172 4 97.85
0.086 0 0.088 3 0.172 9 98.41
桂皮醛 0.377 1 0.373 4 0.751 1 100.16 99.99 0.44
0.377 1 0.373 4 0.749 9 99.84
0.377 1 0.373 4 0.752 6 100.56
0.377 1 0.373 4 0.751 1 100.16
0.377 1 0.373 4 0.747 7 99.25
0.377 1 0.373 4 0.750 4 99.97
表 3 甘草酸铵等 4 种成分的含量测定结果（n＝3，
mg/g）
编号 批号 甘草酸铵 甘草苷 肉桂酸 桂皮醛
S1 20210228 2.002 2 1.287 8 0.086 0 0.377 1
S2 20210309 2.315 4 1.463 8 0.089 1 0.130 9
S3 20210312 2.770 0 1.457 4 0.091 8 0.376 3
S4 20210425 2.421 1 1.481 4 0.090 2 0.169 5
S5 20210426 2.108 2 1.357 2 0.082 2 0.263 1
S6 20210427 1.808 4 1.137 2 0.076 5 0.478 4
S7 20210428 1.891 4 1.209 7 0.079 1 0.272 8
S8 20210429 1.922 6 1.193 7 0.079 5 0.322 3
S9 20210430 2.190 7 1.294 4 0.082 6 0.229 7
S10 20210501 2.228 5 1.410 1 0.084 1 0.254 8
2.3.2 重复性试验 取“2.2.2”项下供试品溶液（编号
S1），共 6 份，按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱
图。以桂皮醛为参照峰，计算各共有峰的相对保留时间
和相对峰面积。结果显示，各共有峰相对保留时间的
RSD≤0.36％（n＝6），相对峰面积的 RSD≤4.36％（n＝
6），表明方法重复性良好。
2.3.3 稳定性试验 取“2.2.2”项下供试品溶液（编号
S1），分别于室温下放置 0、4、8、12、16、20、24 h 时按
“2.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图。以桂皮醛为
参照峰，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积。
结果显示，各共有峰相对保留时间的 RSD≤0.86％（n＝
7），相对峰面积的 RSD≤4.01％（n＝7），表明供试品溶
液于室温下放置24 h内稳定性良好。
2.3.4 指纹图谱的生成 取 10 批肉桂人参颗粒（编号
S1～S10）样品，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，按
中国药房 2022年第33卷第16期