Page 44 - 《中国药房》2022年16期
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档的泽泻片快速翻炒，炒至泽泻表面呈黄色、麦麸呈焦黄                               按处方量精密称定各饮片，混合，放入锅中，按本课
        色时出锅，筛去麦麸，晾凉。每100 kg泽泻用麦麸10 kg。                     题组前期所得最优工艺煎煮，水煎液于 50 ℃下浓缩至
        2.1.2  酒丹参     取丹参片，照 2020 年版《中国药典》（四               400 mL，取10 mL于25 mL量瓶中，用75％甲醇定容，摇
        部）“0213炮制通则”项下酒炙法炒干 。每100 kg丹参                      匀，滤过，续滤液经 0.45 μm 微孔滤膜滤过，即得原方混
                                        [13]
        用黄酒20 kg。                                           煎供试品溶液。按处方量分别精密称定与上述样品等
        2.1.3  醋郁金     取郁金片净制，大小分档，加入规定剂                    量的饮片，分置于烧杯中，按上述最优工艺煎煮，混合各
        量的米醋搅拌均匀，闷润，待醋被吸尽后，置铁锅内，用                           水煎液，于50 ℃下浓缩至400 mL，取10 mL于25 mL量
        文火加热并快速翻炒，控制温度在200 ℃左右，炒干，取                         瓶中，用75％甲醇定容，摇匀，滤过，续滤液经0.45 μm微
        出晾凉，筛去碎屑。每100 kg郁金用米醋10 kg。                         孔滤膜滤过，即得原方单煎供试品溶液。取泽泻、丹参、
                                                            郁金、柴胡炮制品，其余药材取生品，按上述原方混煎供
        2.1.4  醋柴胡     取柴胡片，照 2020 年版《中国药典》（四
                                                            试品方法制备炮制混煎供试品溶液，按上述原方单煎供
                                        [13]
        部）“0213炮制通则”项下醋炙法炒干 。每100 kg柴胡
                                                            试品方法制备炮制单煎供试品溶液。
        用米醋20 kg。
                                                            2.3.3 HQHD 单味饮片供试品溶液及阴性溶液                  按处
        2.2 色谱条件
                                                            方量精密称取泽泻、丹参、郁金、柴胡、山楂、海藻、决明
            以 Eclipse XDS-C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm）为色谱
                                                            子、水飞蓟饮片，按“2.3.2”项下方法制得 HQHD 各单味
        柱，以甲醇（A）-1％磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱
                                                            饮片供试品溶液和分别缺泽泻、郁金、水飞蓟、山楂、决
        （0～5 min，5.0％A→8.0％A；5～7 min，8.0％A；7～25
                                                            明子、海藻、丹参、柴胡的阴性溶液。
        min，8.0％A→39.0％A；25～32 min，39.0％A→41.5％A；
                                                            2.4 指纹图谱的建立
        32～36 min，41.5％A；36～55 min，41.5％A→48.0％A；
                                                            2.4.1  精密度试验 取同一HQHD供试品溶液（YH-1），
        55～65 min，48.0％A→67.4％A；65～75 min，67.4％A→
                                                            按“2.2”项下色谱条件连续进样6次，记录HPLC图。以
        95.0％ A；75～77 min，95.0％ A→5.0％ A；77～80 min，
                                                            丹酚酸B峰（保留时间适中，峰面积较大且分离度良好）
        5.0％A）；柱温为 35 ℃；流速为 0.9 mL/min；检测波长为
                                                            为参照峰，计算得到各共有峰相对保留时间的 RSD 为
        265 nm；进样量为10 μL。
                                                            0.01％～0.04％（n＝6），相对峰面积的 RSD 为 1.04％～
        2.3  溶液的制备                                          2.69％（n＝6），表明方法精密度良好。
        2.3.1  对照品溶液       分别精密称取芦丁、橙皮苷、丹酚                  2.4.2  稳定性试验 取同一HQHD供试品溶液（YH-1），
        酸B、槲皮素、水飞蓟宾、木犀草素、橙黄决明素、23-乙酰                        置于 HPLC 仪进样盘中，分别在放置 0、2、4、8、12、24 h
        泽泻醇C、柴胡皂苷b2对照品各适量，置于5 mL量瓶中，                        时按“2.2”项下色谱条件进样测定，记录HPLC图。以丹
        加甲醇定容，摇匀，得上述成分质量浓度分别为 0.322、                        酚酸B峰为参照峰，计算得到各共有峰相对保留时间的
        0.145、0.243、0.128、0.998、0.516、0.165、0.161、0.112 mg/mL  RSD 为 0.01％～0.04％（n＝6），相对峰面积的 RSD 为
        的单一对照品储备液。分别吸取上述对照品储备液                              0.52％～1.83％（n＝6），表明供试品溶液在该条件下放
        100、200、100、200、20、50、200、200、200 μL 置于同一 5         置24 h内稳定。
        mL量瓶中，加甲醇定容，摇匀，即得混合对照品溶液。                           2.4.3  重复性试验 按“2.3.2”项下方法制备HQHD供试
        2.3.2 HQHD供试品溶液         将不同批号的8味饮片随机                品溶液（YH-1），共6份，按“2.2”项下色谱条件进样测定，
        组合成10个不同批次的HQHD样品（编号S1～S10），其                       记录 HPLC 图。以丹酚酸 B 峰为参照峰，计算得到各共
        中各批次原方混煎（编号 YH-1～YH-10）、原方单煎（编                      有峰相对保留时间的 RSD 为 0.01％～0.09％（n＝6），相
        号YD-1～YD-10）、炮制混煎（编号PH-1～PH-10）、炮制                  对峰面积的 RSD 为 1.12％～3.29％（n＝6），表明方法重
        单煎（编号 PD-1～PD-10）样品的饮片组成及来源同相                       复性良好。
        应批次的HQHD样品，具体批号见表1。                                 2.4.4 HPLC 指纹图谱的建立           取“2.3.2”项下 HQHD
             表1 10批HQHD样品中各饮片的批号信息                          原方混煎、原方单煎、炮制混煎、炮制单煎各10个批次的
                                                            供试品溶液，按“2.2”项下色谱条件进样测定，记录
         编号 泽泻   丹参   海藻    郁金   山楂    水飞蓟    决明子  柴胡
         S1  200403641 201200631 200801  200502  210102511 190501CP0122 191000099 200403321  HPLC 图。将所得图谱信息导入《中药色谱指纹图谱相
         S2  200202011 201100181 190601871 201201391 191203831 190501CP0122 191000099 200403321  似度评价系统（2012版）》，以各类样品的首批图谱（色谱
         S3  200500691 201100181 190601871 191001211 190804891 190501CP0122 190200099 200900911
         S4  200403641 201100181 190601871 191001211 210102511 190501CP0122 190200099 200403321  峰分离度好且出峰稳定）为参照图谱，设置时间窗宽度
         S5  200202011 201200631 200801  200502  191203831 190501CP0122 190200099 200403321  为0.1 min，采用中位数生成法进行多点校正和全谱峰匹
         S6  200403641 201100181 200801  191001211 190804891 190501CP0122 191000099 200403321  配，生成 HQHD 原方混煎、原方单煎、炮制混煎、炮制单
         S7  200202011 201200631 190601871 191001211 191203831 190501CP0122 190200099 200403321  煎的叠加指纹图谱及相应的对照指纹图谱（R），见图1。
         S8  200500691 201200631 200801  200502  191203831 190501CP0122 191000099 200900911
         S9  200403641 201100181 190601871 201201391 210102511 190501CP0122 191000099 200900911  由图1可知，HQHD原方混煎、原方单煎、炮制混煎、炮制
         S10 200202011 201200631 200801  200502  210102511 190501CP0122 190200099 200403321  单煎样品的叠加指纹图谱均各有 37 个共有峰。通过匹


        ·1958 ·  China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 16                                 中国药房    2022年第33卷第16期
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