Page 88 - 《中国药房》2022年13期

eNOS，mTOR，Tsc-1，Tsc-2 and 4ebp were increased significantly（P＜0.05）. Compared with model group，above indexes of
Mayuan tongbian zhitong decoction groups （except for NOS in low-dose group） were reserved significantly （P＜0.05）. In the
molecular docking experiment，the active components with the highest Degree values in C. sativa，C. aurantium and R. glutinosa
were （Z）-3-（4-hydroxy-3-methoxy-phenyl）-N-[2-（4-hydroxyphenyl） ethyl] acrylamide，nobiletin and stigmasterol. The binding
energies of AMPK with these three components were －5.15，－4.61 and －4.83 kJ/mol，the binding energies of eNOS with these
three components were －6.11，－5.40 and －5.91 kJ/mol. The conformations of these three compounds with AMPK and eNOS
were stable and their binding activities were high. CONCLUSIONS Mayuan tongbian zhitong decoction can improve the
constipation symptoms and intestinal function in STC model rats，and its specific mechanism may be related to the inhibition of
AMPK/eNOS signaling pathway.
KEYWORDS Mayuan tongbian zhitong decoction；slow-transmission constipation；AMPK/eNOS signaling pathway；mechanism

慢传输型便秘（slow-transmission constipation，STC） （深圳雷杜生命科学股份有限公司）等。
主要是因肠道蠕动功能及传输速度下降而引起的一种 1.2 主要药品与试剂
临床常见疾病，其主要表现为大便干燥、排便困难、排便 麻元通便止痛汤由江西中医药大学附属医院中药房
次数及便意减少 [1－2] 。目前，该病的发病率呈逐年上升 自制（取火麻仁30 g、苦杏仁10 g、大黄6 g、郁李仁20 g、
趋势，且该病患者常伴有腹胀，日常生活备受影响，患者 厚朴 10 g、枳壳 20 g、生地 20 g、玄参 20 g、槐花 10 g、地
情绪也愈发焦虑，极易诱发其他基础性疾病。因此， 榆 10 g、延胡索 12 g、白芍 10 g、甘草 10 g 加 1 500 mL 水
[3]
STC 已成为一个公共健康问题 。目前，该病的发病机 熬煎，熬至 400 mL 即可）；其他主要药品与试剂有磷酸
制还不够明确，许多研究结果也并未对其进行深入探 盐 缓 冲 液（PBS，成 都 中 仕 石 化 有 限 公 司 ，批 号
索，因此，临床一般多采用泻药或者促肠胃蠕动的药物 2026067），石 蜡（瑞 沃 德 生 命 科 技 有 限 公 司 ，批 号
进行治疗，但是此类药物一般存在不良反应。由此可 69019361），NO、NOS 酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂
知，寻找有效且安全的药物是目前亟待解决的问题。 盒（上 海 酶 联 生 物 科 技 有 限 公 司 ，批 号 分 别 为
麻元通便止痛汤是专业医师通过多年研究而得，并 20190310K8、218360343），eNOS 分析试剂盒[生工生物
[4]
已在临床中证实该方具有润肠通便、止痛止血的功效 。 工程（上海）股份有限公司，批号 PL107]，兔源 AMPK 多
近年来研究发现，STC 的发生与能量代谢紊乱密切相 克隆抗体、兔源eNOS多克隆抗体、兔源哺乳动物雷帕霉
关，其中 AMP 活化蛋白激酶（AMP activated protein ki- 素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）多克
nase，AMPK）作为能量代谢调节的中枢，可调节蛋白质 隆抗体、兔源结节性硬化复合物 1（tuberous sclerosis
代谢、脂质代谢、糖类代谢、自噬和线粒体稳态，对生理 complex 1，Tsc-1）单克隆抗体、兔源 Tsc-2 单克隆抗体、
代谢活动具有重要意义 [5－6] 。内皮型一氧化氮合酶（en- 兔源真核启动因子 4E 结合蛋白（4E binding protein，
dothelial nitric oxide synthase，eNOS）是抑制胃肠道运动 4ebp）多克隆抗体、兔源 GAPDH 多克隆抗体（上海碧云
的重要分子，其涉及的 eNOS/一氧化氮（nitric oxide， 天生物科技有限公司，批号分别为 AF1617、AF1587、
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NO）信号通路是 AMPK 的重要下游信号 。eNOS 是一 AF1627、AF2677、AF6792、AF5812、AF1186），羊抗兔免
氧化氮合酶（nitric oxide synthase，NOS）的亚型之一，也 疫球蛋白G二抗（美国Abcam公司，货号211-035-109）；
是NO合成的关键酶；NO作为一种消化道抑制性神经递 其余试剂为实验室常用规格，水为纯净水。
质，主要作用于胃肠道平滑肌，可抑制平滑肌收缩，减少 1.3 动物
胃肠道蠕动 。由此推测，AMPK/eNOS信号通路对STC 本研究所用SD雄性大鼠50只，9周龄左右，体质量
[8]
具有一定调控作用。但是麻元通便止痛汤是否可以通 约260 g，购自北京科宇动物养殖中心，实验动物生产许
过调控 AMPK/eNOS 信号通路治疗 STC 尚不明确。因 可证号为 SCXK（京）2018-0010。大鼠饲养于无菌环境
此，本研究建立 STC 大鼠模型，观察麻元通便止痛汤对 中，温度为 27 ℃，湿度为 55％，自由进食，适应性喂养 1
大鼠 STC 的改善效果，并初探其作用机制，以期为该病 周后进行实验。
的临床治疗提供新的思路。 2 方法
1 材料 2.1 分组、造模与给药
1.1 主要仪器 将大鼠分为空白组、模型组和麻元通便止痛汤低、
本研究所用主要仪器有 TDL-5-A 型高速离心机、 中、高剂量组，每组 10 只。参照文献[9]方法进行造模：
Type T2A 型全自动凝胶成像仪（美国 Bio-Rad 公司）， 除空白组外，其余各组大鼠均灌胃2.5 mg/L复方地芬诺
DYY-12C 型电泳仪[大龙兴创实验仪器（北京）有限公 酯混悬液（0.02 mL/g）进行造模，每日1次，连续2周。当
司]，FSH-2A 型组织匀浆机（江苏常州朗越仪器制造有 大鼠体质量增长缓慢、粪便颗粒减少且干硬、精神较差
限公司），WGLL823BE 型恒温箱（天津市泰斯特仪器有 时提示造模成功。本实验所有大鼠均造模成功。造模
限公司），BP310P 型称量天平（德国 Sartorius 公司）， 成功后第2天，麻元通便止痛汤低、中、高剂量组大鼠分
BX53型显微镜（日本Olympus公司），RT-6100型酶标仪 别灌胃麻元通便止痛汤 6、12、18 mg/kg（根据前期预实

·1618 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 13 中国药房 2022年第33卷第13期