Page 85 - 《中国药房》2022年13期

3.3 大鼠血清中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β、CCL2的 亡率，因此，深入了解骨癌痛的分子机制可为骨癌痛药
水平的检测结果 物及新作用靶点的开发提供依据。本研究选用大鼠乳
与假手术组相比，模型组大鼠血清中 TNF-α、IL-6、 腺癌Walker256细胞制备骨癌痛大鼠模型，结果发现，与
IL-1β、CCL2表达水平均显著升高（P＜0.05）。与模型组 假手术组相比，模型组大鼠机械缩足反射阈值和热缩足
相比，白藜芦醇低剂量组大鼠血清中IL-6水平显著降低 反射潜伏期均显著降低，提示骨癌痛模型大鼠出现机械
（P＜0.05），TNF-α、IL-1β和 CCL2 水平差异无统计学意 痛敏反应和神经病理性疼痛，表明造模成功。进一步鞘
义（P＞0.05）；白藜芦醇中、高剂量组大鼠血清中TNF-α、 内注射白藜芦醇发现，大鼠机械缩足反射阈值和热缩足
IL-6、IL-1β、CCL2 水平均显著降低（P＜0.05）。结果见 反射潜伏期均有所升高。这表明白藜芦醇可以改善大
表3。 鼠骨癌痛。
表3 各组大鼠血清中炎症因子水平的检测结果（x±±s， 研究发现，骨肿瘤细胞和相关免疫细胞可释放大量
n＝8，ng/mg） 炎症因子，如 CXCL 家族趋化因子、IL-6、TNF-α和转化
组别 TNF-α IL-6 IL-1β CCL2 生长因子β（transforming growth factor beta，TGF-β）等，
假手术组 22.10±3.87 15.73±7.25 32.54±6.93 5.42±1.72 这些炎症因子可通过致敏外周伤害性感受器或作用于
模型组 62.02±5.02 a 50.21±8.31 a 75.49±11.39 a 12.03±3.17 a
白藜芦醇低剂量组 51.14±3.58 34.32±7.61 b 50.73±6.49 11.19±2.61 成骨细胞、破骨细胞、神经纤维上的效应器，从而导致骨
白藜芦醇中剂量组 30.92±6.51 b 18.32±6.06 b 45.17±8.16 b 7.74±2.04 b 癌痛的产生 [15－16] 。研究发现，TNF-α和IL-1β是导致骨癌
白藜芦醇高剂量组 24.75±2.36 b 16.59±4.38 b 36.24±5.41 b 6.09±1.27 b 痛的主要促炎因子，可以激活胶质细胞，诱导胶质细胞
a：与假手术组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05 分泌 CCL2，进一步加剧炎症疼痛 。在骨癌痛等慢性
[17]
3.4 大鼠胫骨中RANK、RANK-L、OPG蛋白表达水平 疼痛中，机体 TNF-α和 IL-1β水平升高 ；TNF-α与 TNF
[18]
的检测结果 受体结合[包括 TNF-α受体 1（TNFR1）和 TNF-α受体 2
与 假 手 术 组 相 比 ，模 型 组 大 鼠 胫 骨 中 RANK、 （TNFR2）]可导致神经元的敏化 ；IL-1β可以直接增加
[19]
RANK-L蛋白表达水平显著升高，OPG蛋白表达水平显 神经元突触间兴奋传播，导致机械痛敏反应 。本研究
[20]
著降低（P＜0.05）。与模型组相比，白藜芦醇中剂量组 发现，模型组大鼠血清中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6和
大鼠胫骨中 RANK、RANK-L 蛋白表达水平均显著降 CCL2的水平均显著升高，而经白藜芦醇干预后，大鼠上
低，OPG 蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）。结果见图 述炎症因子水平均降低。这表明白藜芦醇可以改善大
1、表4。 鼠骨癌痛引起的炎症反应。
在炎症条件下，OPG/RANK/RANK-L信号通路调节
RANK 68 kDa 的破骨细胞分化会受到影响，从而影响破骨细胞与成骨
[21]
细胞的动态平衡 。RANK-L 与其受体 RANK 结合后
可促进破骨细胞的成熟和分化；而OPG是破骨细胞抑制
RANK-L 35 kDa
因子，可通过调节TNF-α、TGF-β、糖皮质激素等的激活，
竞争性地抑制 RANK 与 RANKL 的结合，从而抑制破骨
OPG 48 kDa
细胞分化，并促进其凋亡 。骨肿瘤中，成骨细胞与破
[22]
骨细胞的平衡被打破，破骨细胞的增殖及活化可以分泌
GAPDH 37 kDa 溶解酶，引发进行性的溶骨活动，降解骨基质，从而引发
剧烈疼痛 [23－24] 。一项临床研究发现，49例骨转移瘤患者
假手术组 模型组 白藜芦醇中剂量组
外周血中 RANK-L 水平远高于未发生骨转移瘤的肿瘤
图 1 各组大鼠胫骨中 RANK、RANK-L、OPG 蛋白表
患者，表明 RANK-L 可以作为骨转移瘤的生物标志
达的电泳图
[25]
物 。此外，成骨细胞、免疫细胞及肿瘤细胞分泌的炎
表 4 各组大鼠胫骨中 RANK-L、OPG、RANK 蛋白表
症因子可以增加破骨细胞的活性，从而下调 OPG，上调
达水平的检测结果（x±±s，n＝8） RANK-L；同时，活化后的破骨细胞又进一步分泌多种生
组别 RANK蛋白 RANK-L蛋白 OPG蛋白 长因子，促进肿瘤细胞增殖 。本研究发现，模型组大
[26]
假手术组 0.23±0.15 0.10±0.37 0.83±0.75
模型组 1.27±0.79 a 1.57±0.58 a 0.12±0.12 a 鼠胫骨中OPG蛋白表达水平显著降低，RANK-L蛋白表
白藜芦醇中剂量组 0.62±0.24 b 0.54±0.49 b 0.52±0.59 b 达水平显著升高，提示大鼠胫骨出现了骨吸收和骨破
a：与假手术组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05 损。由于中剂量的白藜芦醇已具有镇痛和缓解炎症的
4 讨论 作用，因此，本研究在后续 Western blot实验中仅检测了
骨癌由多种癌症的原发性或继发性骨转移诱发，约 白藜芦醇中剂量组大鼠胫骨中 OPG/RANK/RANK-L 信
90％的乳腺癌和前列腺癌患者会发生骨转移 。骨癌 号通路相关蛋白的表达水平。结果发现，经白藜芦醇干
[14]
发生发展过程中会引起剧烈且持续的疼痛，增加患者死 预后，模型大鼠胫骨中 RANK、RANK-L 蛋白表达水平

中国药房 2022年第33卷第13期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 13 ·1615 ·