Page 61 - 《中国药房》2022年11期

Control mimics miRNA-18a 5.0 Control mimics处理组
miRNA-18a mimics处理组
处理组 mimics处理组 4.5 a
4.0
ULK1 150 kDa 3.5
蛋白表达水平 2.5
3.0
LC3-Ⅱ 14 kDa 2.0
p62 62 kDa 1.5 a a
1.0
0.5
β-actin 42 kDa 0
ULK1 LC3-Ⅱ p62
A. miRNA-18a mimics处理后JeKo-1细胞中ULK1、LC3-II、p62蛋白表 B. miRNA-18a mimics处理后JeKo-1细胞中ULK1、LC3-Ⅱ、p62蛋
达的电泳图 白表达水平的检测结果
LC3-Ⅱ DAPI Merge

Control mimics处理组

miRNA-18a mimics处理组

C. miRNA-18a mimics处理后JeKo-1细胞的自噬流实验结果（标尺＝20 μm）

Control mimics处理组 miRNA-18a mimics处理组
D. miRNA-18a mimics处理后JeKo-1细胞中自噬溶酶体的观察结果（标尺＝5 μm）
a：与Control mimics处理组相比，P＜0.001
图4 miRNA-18a mimics处理后JeKo-1细胞自噬活性的变化
白复合物则是其中之一 [28－29] 。ULK1不仅是自噬小体起 淋巴瘤细胞 JeKo-1 为研究对象，从 ADR 和 VCR 这 2 种
始蛋白复合物的关键组成部分，还对 Beclin1、ATG14L 具有代表性的化疗药物入手，探索上述2种细胞的耐药
和VPS34复合物等自噬关键起始因子具有磷酸化作用， 性。经 ADR 和 VCR 处理后，与 Daudi 细胞相比，JeKo-1
也对自噬小体的顺利延展起到不可替代的作用 。相 细胞活性更高、凋亡水平更低。JeKo-1 细胞比 Daudi 细
[30]
关研究发现，自噬的激活和自噬小体的延展需要依靠细 胞具有更强的自噬活性，并且JeKo-1细胞中miRNA-18a
胞内多种自噬相关蛋白参与的类泛素化调控系统，其 和miRNA-4802的表达水平更低，ULK1、Atg7 mRNA表
中，ATG7 蛋白可以发挥类泛素化激活酶 E1 的作用，与 达水平更高；进一步使用miRNA-18a mimics和miRNA-
ATG12 蛋白结合后转运至 ATG5 蛋白；另外，ATG10 蛋 4802 mimics 处理 JeKo-1 细胞后发现，细胞自噬水平受
白 可 以 发 挥 类 泛 素 化 结 合 酶 E2 的 作 用 ，促 进 到显著抑制，且对 ADR 和 VCR 的耐药性显著降低。由
ATG12-ATG5 蛋白复合物的形成，进而发挥类泛素化连 此推测，miRNA-18a 和 miRNA-4802 很可能是通过靶向
接酶 E3 的作用，最终完成 ATG8 蛋白的酯化作用，形成 负调控ULK1、ATG7 mRNA 的表达水平，进而抑制淋巴
ATG8-PE 蛋白复合物。ATG8-PE 蛋白复合物对招募自 瘤细胞的自噬和耐药性。
噬小体延展成分和自噬底物具有重要作用 [31－32] 。由此 综上所述，miRNA-18a 和 miRNA-4802 分别通过降
可见，ULK1 和 ATG7 基因均为自噬进程的关键调控因 低自噬启动基因ULK1和Atg7的表达，抑制淋巴瘤细胞
子，其表达水平与细胞自噬活性直接相关。 的自噬活性，从而降低淋巴瘤细胞对 ADR 和 VCR 的耐
本研究以人Burkitt’s淋巴瘤细胞Daudi和人套细胞 药性。

中国药房 2022年第33卷第11期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 11 ·1335 ·