Page 82 - 《中国药房》2022年8期
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2.5                                          （分子对接能量打分值均为－9.3 kcal/mol），海生菊苷能
                               b
              2.0                          b                够与JNK蛋白的ASP207、LYS93氨基酸残基形成氢键，
                                                            与 ILE70、VAL196、LEU206、VAL78 形 成 疏 水 键 ，与
             IRS-1/β-actin  1.5      b          c           ASN152、ALA151、ASP150 等具有范德华力，其苯环与

              1.0
                                                            MET146间存在硫-π键作用（图6B）；芦丁能够与JNK蛋
              0.5         a                                 白的 ASN194、MET149、ASN152 氨基酸残基形成氢键，

               0                                            与 ILE70、CYS154 形 成 疏 水 键 ，与 LYS93、LEU206、
                     正常组  模型组  TFB高质  量浓度组  TFB中质  量浓度组  TFB低质  量浓度组  二甲双胍  阳性对照组  VAL78 等具有范德华力（图 6C）。与 PKC 蛋白分子对
                                                            接能量打分值绝对值最高的成分为槲皮苷（分子对接

                            A. IRS-1蛋白                      能量打分值为－4.9 kcal/mol），该成分能够与PKC蛋白
                                                            的 ALA291、ASP292、THR155 氨基酸残基形成氢键，与
              4                     b
                                                            HIS154 形成疏水键，与 DSN-1、ALA293、GLU156 等具
                                                b
                                          b
              3                b                            有范德华力（图6D）。
             JNK/β-actin  2  a                              表 2 8 个 TFB 主要活性成分与 IRS-1、JNK、PKC 蛋白


              1                                                  的分子对接情况
                                                                                        分子对接能量打分值/（kcal/mol）
                                                             MOL编号     化合物（英文名）
                                                                                      IRS-1    JNK     PKC
              0                                              MOL006437  海生菊苷（maritimetin）  －7.9  －9.3  －4.8
                    正常组   模型组  TFB高质  量浓度组  TFB中质  量浓度组  TFB低质  量浓度组  二甲双胍  阳性对照组  MOL000415  芦丁（rutin）  －7.6  －9.3  －4.7
                                                             MOL000701
                                                                                                      －4.9
                                                                                       －7.6
                                                                       槲皮苷（quercitrin）
                                                                                              －8.5
                             B. JNK蛋白                        MOL004368  金丝桃苷（hyperoside）  －7.4  －8.4  －4.8
                                                             MOL000437  异槲皮苷（isoquercitrin）  －7.2  －8.6  －4.7
              4                                              MOL006436  奥卡宁（okanin）    －6.7   －8.4    －4.6
                                                             MOL000006  木犀草素（luteolin）  －6.9  －8.3    －4.2
                         a
              3                                              MOL000098  槲皮素（quercetin）  －6.8  －7.7    －4.2
                                          c
             PKC/β-actin  2   b                             4 讨论
                                                                IR是很多疾病的发病基础，并与肥胖症、高血压、心
              1                                 b
                                    b                       血管及动脉粥样硬化等代谢性疾病的发生和发展有
                                                            关 。肝脏作为胰岛素作用的主要靶器官，是IR发生的
                                                              [3]
              0                                                     [13]
                    正常组  模型组   TFB高质  量浓度组  TFB中质  量浓度组  TFB低质  量浓度组  二甲双胍  阳性对照组  主要部位 。在相关研究中，因表面具有高亲和力的胰
                                                                                                      [14]
                                                            岛素受体，HepG2细胞常被用以诱导建立IR模型 。在
                             C. PKC蛋白                       模型诱导方面，高糖、高胰岛素、高脂（软脂酸）单独使用
            a：与正常组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.01；c：与模型组          或联合使用是常用的诱导方法              [14－15] 。本研究采用PA诱
        比较，P＜0.05                                           导HepG2细胞复制IR模型，在实验过程中发现，50、75、
        图 5   不同质量浓度 TFB 对 HepG2 细胞 IR 模型中                  100 μmol/L的PA对细胞增殖虽有一定的抑制作用，但这
              IRS-1、JNK、PKC蛋白表达的影响（n＝3）                     种作用在24 h内并不明显；同时，PA可显著降低细胞的

        IRS-1、JNK、PKC 蛋白的活性口袋位置，且对接良好，其                     葡萄糖消耗量，表明使用 PA 诱导 HepG2 细胞可成功复
        分子对接能量打分值如表 2 所示。其中，与 IRS-1 蛋白                      制IR模型。
        分子对接能量打分值绝对值最高的成分为海生菊苷（分                                JNK是丝裂原激活蛋白激酶家族成员，其编码基因
                                                                                          [16]
        子对接能量打分值为－7.9 kcal/mol，1 kcal＝4.186 kJ），            有3种形式，即JNK1、JNK2和JNK3 。JNK蛋白是重要
        该 成 分 能 够 与 IRS-1 蛋 白 的 SER979、ASN1110、             的信号分子，在 IRS 和 PI3K 信号通路中具有重要的作
        MET1052、GLU1050 氨 基 酸 残 基 形 成 氢 键 ，与                用，且上述通路及其相关蛋白在葡萄糖转运中有关键作
                                                              [17]
        MET1112、ALA1001、VAL983 形成疏水键，与 TYR8、                用 。研究表明，很多激酶可使IRS的丝氨酸磷酸化，其
                                                                               [18]
        ARG1109、ASP1056 等 具 有 范 德 华 力 ，其 苯 环 与              中就包括 JNK 和 PKC 。JNK 的作用机制是通过提高
        MET1112间存在硫-π键作用（图6A）。与JNK蛋白分子                      IRS-1和IRS-2的水平来抑制JNK活性，从而改善胰岛素
                                                                                                      [19]
        对接能量打分值绝对值最高的成分为海生菊苷和芦丁                             信号转导和胰岛素敏感性，进而发挥IR抑制作用 。本

        ·972 ·  China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 8                                    中国药房    2022年第33卷第8期
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