Page 82 - 《中国药房》2022年7期
P. 82

2 方法与结果                                            “2.1.1～2.1.5”项下方法，分别测定 138 批青翘样品中杂
        2.1 青翘药材各指标的含量测定                                    质、水分、醇溶性浸出物、挥发油、连翘苷、连翘酯苷A的
        2.1.1  杂质含量测定        取青翘药材20 g，摊开，将碎叶、              含量，每批平行测定3次，取平均值。将各指标测定结果
        碎枝等杂质拣出，合并称质量，再根据2020年版《中国药                         与2020年版《中国药典》连翘项下的青翘质量标准比较，
        典》（四部）通则2301项下“杂质检查法” 测定青翘中的                        并计算合格率（合格率＝各指标合格样品数/总样品数×
                                          [10]
        杂质含量。                                               100％）。结果显示，青翘中杂质、水分、醇溶性浸出物、
        2.1.2  水分含量测定        取青翘药材粉末（过二号筛）约                 挥发油、连翘苷、连翘酯苷 A 的含量范围分别为 0～
        10 g，精密称定，置于烧瓶中，加甲苯 200 mL，再根据                      7.80％ 、1.60％ ～8.18％ 、13.13％ ～61.60％ 、0.21％ ～
        2020 年版《中国药典》（四部）通则 0832 第四法“甲苯                     3.47％、0.02％～2.15％、0.79％～14.04％，平均含量分别
           [10]
        法” 测定青翘中的水分含量。                                      为1.24％、4.97％、34.88％、2.01％、0.42％、6.86％。上述
        2.1.3  醇溶性浸出物含量测定            取青翘药材粉末（过二             各指标合格率分别为 93.5％、100％、88.4％、58.7％、
        号筛）约4 g，精密称定，置于250 mL锥形瓶中，精密加入                      78.3％、89.9％。在 138 批青翘样品中，上述指标均合格
        65％乙醇 100 mL，再根据 2020 年版《中国药典》（四部）                  的样品共有47批，因此，后续研究将以这47批合格样品
                             [10]
        通则2201项下“冷浸法” 测定青翘中的浸出物含量。                          数据作为青翘等级划分的样本。
        2.1.4  挥发油含量测定         取青翘药材粉末（过三号筛）                2.2 聚类分析及PCA
        10 g，置于烧瓶中，加水 300 mL，再根据 2020 年版《中国                     聚类分析依据距离远近的基本原理，可以将样本
                                                    [10]
        药典》（四部）通则2204项下“挥发油测定法（甲法）” 测                       变量数据差异小的聚为一类，在中医药等领域应用广
        定青翘中的挥发油含量。                                         泛 [11－12] 。基于此，本研究采用聚类分析和 PCA 对 138 批
        2.1.5  连翘苷和连翘酯苷A含量测定               取青翘粉末（过          青翘样品的水分、醇溶性浸出物、挥发油、连翘苷、连翘
        五号筛）约 2.0 g，置于具塞锥形瓶中，精密加入甲醇 25                      酯苷A的含量测定结果进行处理（由于杂质限量与青翘
        mL，称定质量，超声（功率 250 W，频率 40 kHz）处理 25                 内在成分的关系不大，故予以排除，下同），再以上述指
        min；放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，                         标为变量，Z-core标准化处理后的数据为个案，采用瓦尔
        滤过；精密量取续滤液 10 mL，置于 25 mL 量瓶中，加水                    德法、欧氏距离区间标准进行聚类分析，当欧氏距离为
        定容，摇匀；以 0.22 μm 微孔滤膜滤过，取续滤液作为测                      17时，得138批青翘样品的聚类树状图（见图1）。由图1
        定连翘苷含量的供试品溶液。另取青翘粉末（过五号                             可知，138 批青翘样品可聚为 4 类，其中Ⅰ类有 55 批样
        筛）约 0.5 g，置于具塞锥形瓶中，精密加入 70％甲醇 15                    品，Ⅱ类有40批样品，Ⅲ类有17批样品，Ⅳ类有26批样
        mL，称定质量，超声（功率 250 W，频率 40 kHz）处理 30                 品，这提示青翘质量等级有可能划分为4个等级。
        min；放冷，再称定质量，用 70％甲醇溶液补足减失的质                            应用SIMCA14.1软件对138批青翘样品的水分、醇
        量，摇匀；以 0.22 μm 微孔滤膜滤过，取续滤液作为测定                      溶性浸出物、挥发油、连翘苷、连翘酯苷A的含量测定结
        连翘酯苷 A 含量的供试品溶液。取上述 2 种供试品溶                         果进行 PCA，得到 138 批青翘样品的得分及载荷（见图
        液，按2020年版《中国药典》通则0512项下“高效液相色                       2）。由图 2 可知，除Ⅰ、Ⅱ组部分样品不能较好地区分
             [10]
        谱法” 测定青翘中连翘苷、连翘酯苷A的含量。                              外，其余各组样品均能较好地区分，由此认为青翘样品
        2.1.6  各指标含量的测定结果及合格样品的筛选                     按     质量可划分为3个或4个等级。

          25


          20

                             Ⅰ                             Ⅱ                      Ⅲ           Ⅳ
          15
         欧氏距离

          10


           5


           0
             69  112  52  71  111  20  50  114  21  74  118  137  8  63  128  12  55  57  59  54  32  129  110  130  85  126  22  29  23  81  15  16  38  123  35  6  77  87  116  78  99  96  97  45  86  113  30  95  5  11  34  106  1  2  18  51  70  56  61  58  53  117  65  49  60  9  24  90  115  36  82  124  88  120  122  26  76  93  3  62  100  125  135  138  25  28  75  134  98  132  83  84  136  14  92  17  102  80  101  44  105  41  104  131
                                                         样品编号
                                           图1 138批青翘样品的聚类树状图


        ·844 ·  China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 7                                    中国药房    2022年第33卷第7期
   77   78   79   80   81   82   83   84   85   86   87