Page 78 - 《中国药房》2022年2期

项下方法制备供试品溶液，按照“2.5.1”项下色谱条件进 2.6 化学模式识别分析
样测定，以熊果酸色谱峰为参照，计算各共有峰的相对 2.6.1 系统聚类分析 将70批样品11个共有峰的峰面
保留时间和相对峰面积。结果显示，11个共有峰相对保 积信息导入 SPSS 22.0 软件，采用组间连接法进行系统
留时间和相对峰面积的 RSD 均小于 2％（n＝6），表明该 聚类分析 。结果显示，当平方欧氏距离＞10 时，70 批
[10]
方法重复性良好。（3）稳定性试验：取枇杷叶生品供试品 样品可分为三大类，枇杷叶生品S1-1～S1-10为一类，姜
溶液（编号S1-1）适量，分别于室温下放置0、4、8、12、24、 汁煮枇杷叶S4-1～S4-10为一类，其余为一类，该结果与
48 h时按照“2.5.1”项下色谱条件进样测定，以熊果酸色 相似度分析结果基本一致。70 批枇杷叶生品及不同炮
谱峰为参照，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面 制品的聚类分析树状图见图3。
积。结果显示，11个共有峰相对保留时间和相对峰面积 2.6.2 主成分分析 将70批样品11个共有峰的峰面积
的 RSD 均小于 2％（n＝6），表明供试品溶液在室温下放 信息导入 SPSS 22.0 软件，标准化处理后进行因子载荷
置48 h内稳定性良好。 矩阵分析并计算方差贡献率，以特征值＞1 为标准筛选
[10]
2.5.4 指纹图谱建立与相似度评价 将枇杷叶生品及 主成分 。结果显示，前 2 个主成分的累计方差贡献率
不同炮制品的色谱信息导入《中药色谱指纹图谱相似度 为80.682％；第1主成分的方差贡献率为70.967％，主要
评价系统（2004A版）》，选择S1-1图谱为参照，设定时间 反映共有峰2～11，其中峰2为野雅椿酸、峰5为山楂酸、
窗宽度为0.4 s，以中位数法自动匹配生成叠加指纹图谱 峰6为科罗索酸、峰10为齐墩果酸、峰11为熊果酸；第2
和对照指纹图谱（R）并进行相似度分析。结果显示，70 主成分的方差贡献率为 9.715％，主要反映峰 1，该峰对
批枇杷叶生品及不同炮制品的指纹图谱中有 11 个共有 应成分未知。70 批枇杷叶生品及不同炮制品中前 2 个
峰；与混合对照品溶液色谱图（图1中的“S”）比对，指认 主成分的特征值和方差贡献率见表5。
峰2、5、6、10、11分别为野鸦椿酸、山楂酸、科罗索酸、齐 2.6.3 正交偏最小二乘法-判别分析 将 70 批样品 11
墩果酸、熊果酸。与 S1-1 图谱进行比较，各批枇杷叶生 个共有峰的峰面积信息导入 SIMCA-P 14.1 软件中进行
品、蜜炙枇杷叶、姜汁炙枇杷叶、姜汁煮枇杷叶、甘草汁 正交偏最小二乘法-判别分析。结果显示，枇杷叶生品、
炙枇杷叶、甘草汁煮枇杷叶、清炒枇杷叶的相似度分别 姜汁煮枇杷叶与其他炮制品差异明显，详见图 4。以变
为 0.995～1.000、0.966～0.977、0.984～0.987、0.919～ 量投影重要性（variable importance in projection，VIP）值
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0.930、0.966～0.970、0.959～0.966、0.969～0.983。由此 大于 1 为依据 ，筛选出对差异贡献较大的色谱峰有 6
可见，枇杷叶生品与6种枇杷叶炮制品存在一定差异，说 个，贡献大小依次为峰2（野鸦椿酸）＞峰5（山楂酸）＞峰
明经炮制后枇杷叶成分的含量均有变化，其中姜汁煮枇 6（科罗索酸）＞峰 9＞峰 11（熊果酸）＞峰 10（齐墩果
杷叶的变化最为明显。70 批枇杷叶生品及不同炮制品 酸），详见图 5。结果表明，上述 6 个共有峰对应成分对
的对照指纹图谱和叠加指纹图谱见图2。 枇杷叶生品及不同炮制品质量差异的影响较大。

2
4 6 11
1 3 5
1 135.94 7 8 9 10 R
} S7-10
↓
S7-1
} S6-10
↓
847.76 S6-1
} S5-10
↓
S4-10
mAU 559.59 } S5-1
↓
S4-1
} S3-10
↓
} ↓
S2-10
271.41 S3-1
} S2-1
S1-10
↓
S1-1
－16.77
0 7.25 14.49 21.74 28.90 36.23 43.48 50.72
t/min
S1-1～S1-10：枇杷叶生品；S2-1～S2-10：蜜炙枇杷叶；S3-1～S3-10：姜汁炙枇杷叶；S4-1～S4-10：姜汁煮枇杷叶；S5-1～S5-10：甘草汁炙枇杷
叶；S6-1～S6-10：甘草汁煮枇杷叶；S7-1～S7-10：清炒枇杷叶；R：对照指纹图谱；2：野鸦椿酸；5：山楂酸；6：科罗索酸；10：齐墩果酸；11：熊果酸；1、
3～4、7～9：未知成分
图2 70批枇杷叶生品及不同炮制品的叠加指纹图谱和对照指纹图谱

·200 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 2 中国药房 2022年第33卷第2期