Page 32 - 《中国药房》2022年2期

batches of A. bidentata samples were divided into three categories，including N1-N12 were clustered into one category，N13-N28
were clustered into one category and N29-N61 were clustered into one category. Seven marker wave numbers affecting the quality
were selected. The corresponding wave numbers of VIP from large to small were 1 059，927，2 933，813，1 732，1 128 and 3 367
cm ，1 732 cm － 1 was the characteristic obsorption peak of saponins，1 059，1 128，927 cm － 1 were the characteristic obsorption
－ 1
peaks of glycosides. CONCLUSIONS Infrared fingerprint combined with normal distribution analysis，cluster analysis，principal
component analysis and orthogonal partial least squares-discriminant analysis can be used to identify A. bidentata from different
producing areas.
KEYWORDS Achyranthes bidentata；infrared fingerprint；normal distribution analysis；cluster analysis；principal component
analysis；orthogonal partial least squares-discriminant analysis；producing areas

牛 膝 始 载 于《神 农 本 草 经》，为 苋 科 植 物 牛 膝 ME204E/OL 型万分之一天平[梅特勒-托利多仪器（上
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Achyranthes bidentata Bl.的干燥根 ，具有补肝肾、强筋 海）有限公司]等。
骨、活血化瘀的功效，常用于临床治疗高血压、冠心病、 1.2 主要药品与试剂
心绞痛、哮喘等 。牛膝主要含有皂苷类、甾酮类、多糖 25S-牛膝甾酮对照品（批号 3737，纯度≥98.0％）、
[2]
[3]
类等化合物 ，具有抗生育、抗肿瘤、抗衰老、抗炎及抗骨 25R-牛膝甾酮对照品（批号 3736，纯度≥98.0％）、竹节
质疏松等药理作用 [4－5] 。因牛膝产于古怀庆府（今河南 参皂苷Ⅳa对照品（批号2665，纯度≥98.0％）、β-蜕皮甾酮
焦作一带），为河南四大怀药之一，故又称为怀牛膝 。 对照品（批号1889，纯度≥98.0％）均购自上海诗丹德标准
[6]
目前，我国已形成三大牛膝产区，即内蒙古赤峰、河北安 技术服务有限公司；溴化钾（光谱纯，批号C12045707）购
[7]
国和河南焦作 。 自天津市科密欧化学试剂有限公司；无水乙醇（分析纯，
关于牛膝的研究主要集中在β-蜕皮甾酮、人参皂苷 批号 20210720）购自天津市致远化学试剂有限公司；水
Ro等成分的含量测定，高效液相色谱（HPLC）指纹图谱 为纯净水。
的建立以及炮制工艺的优化等方面 [8－12] 。2020 年版《中 牛膝药材共 61 批（编号 N1～N61），其中 N1～N12
国药典》（一部）规定采用薄层色谱法对牛膝中β-蜕皮甾 购自河北省安国市药材市场，N13～N28 购自内蒙古自
酮和人参皂苷Ro进行鉴别，采用HPLC法对牛膝中β-蜕 治区赤峰市药材市场，N29～N61 采自河南省焦作市牛
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皮甾酮进行含量测定 。但由于牛膝药材的化学成分 膝产地。所有药材经河南中医药大学药学院陈随清教
复杂，仅对单一成分进行定量分析，具有一定的局限性； 授鉴定，均为苋科植物牛膝 A. bidentata Bl.的干燥根。
加之HPLC法多成分检测的成本较高，方法建立及测试 取牛膝药材，除去须根、泥沙，捆成小把，晒至干皱，将顶
费时、操作繁琐，所需流动相（甲醇、乙腈等）具有一定的 端切齐，晒干后，用水润透，除去残留芦头，于 55 ℃烘
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毒性，应用受限 。红外光谱法具有灵敏度高、特征性 干，粉碎，过200目筛，用自封袋密封，保存至干燥器，备
[15]
强、检测快速、无损等特点 ，同时该法具有一定的整体 用。61批牛膝药材样品的来源信息见表1。
性、客观性和科学性，既能反映药材内部所有复杂成分 表1 61批牛膝药材样品的来源信息
峰的叠加，又能反映药材所含不同成分及其比例，故可 编号 产地 收集时间
全面体现药材的质量 。随着红外光谱技术的发展，其 N1～N12 河北省安国市新安村 2020年12月
[16]
分辨率及图谱识别能力均有了新的突破，已成为中药快 N13～N18 内蒙古自治区赤峰市牛营子镇 2019年12月
N19～N28 内蒙古自治区赤峰市牛营子镇 2020年12月
速鉴别及质量评价的一种有效手段 [17－19] 。美日韩等国
N29～N35 河南省焦作市大封村 2017年12月
药典均已将红外光谱技术作为药物鉴定的重要方 N36～N45 河南省焦作市驾步村 2017年12月
法 。化学模式识别分析可以数字化地表达光谱信息， N46～N61 河南省焦作市温县 2019年12月
[20]
[21]
其结合红外光谱能更加客观地评价中药材的质量 。 2 方法与结果
基于此，本研究建立了上述三大产地牛膝药材的红外指 2.1 红外光谱的建立
纹图谱，同时结合化学模式识别进行分析，旨在为快速 2.1.1 样品片的制备 取牛膝药材样品粉末2 mg，加入
鉴别牛膝提供参考。 干燥溴化钾 200 mg，研磨，混匀；取混合均匀的样品适
1 材料 量，置于专用压片模具中，以 8 MPa 压制 30 s，得均匀半
1.1 主要仪器 透明的薄片，即供试样品片。同法制备溴化钾空白片和
本研究所用主要仪器有 Spectrum 100 型傅里叶变 各对照品样品片。
－1
换红外分光光度计、Spectrum for Window 3.02 软件（美 2.1.2 测定条件 光谱扫描范围为400～4 000 cm ，扫
国 Pekin Elmer 公司），FW-4A 型粉末压片机（天津市拓 描前扣除CO2和H2O的干扰，扫描次数为16次/s，扫描速
－1
普仪器有限公司），FW-100型高速万能粉碎机、101-3AB 度为0.2 cm/s，光谱分辨率为4 cm ，实验室温度为20～
型点热恒温鼓风干燥箱（北京中兴伟业仪器有限公司）， 25 ℃，相对湿度为25％～35％。

·154 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 2 中国药房 2022年第33卷第2期