Page 38 - 《中国药房》2021年20期
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3 1.5
** ** Δ
TRAF6蛋白的表达水平 2 1 ## ## ## IκBα蛋白的表达水平 1.0 ** ** ## ## ΔΔ ##
0.5
0 0
对照 氯化 模型 氯化 氯化 氯化 氯化 NF-κ B 阳性 对照 氯化 模型 氯化 氯化 氯化 氯化 NF-κ B 阳性
组 镧高 组 钠组 镧低 镧中 镧高 信号通 对照 组 镧高 组 钠组 镧低 镧中 镧高 信号通 对照
浓度 浓度 浓度 浓度 路激动 组 浓度 浓度 浓度 浓度 路激动 组
对照 组 组 组 剂 + 氯 对照 组 组 组 剂 + 氯
组 化镧组 组 化镧组
A. TRAF6 B. IκBα
1.5 ## ## ## 4 3 ** **
NF-κB p65蛋白的表达水平 1.0 ** ** Δ BMP-2蛋白的表达水平 2 1 # ## Δ ##
0.5
0 0
对照 氯化 模型 氯化 氯化 氯化 氯化 NF-κ B 阳性 对照 氯化 模型 氯化 氯化 氯化 氯化 NF-κ B 阳性
组 镧高 组 钠组 镧低 镧中 镧高 信号通 对照 组 镧高 组 钠组 镧低 镧中 镧高 信号通 对照
浓度 浓度 浓度 浓度 路激动 组 浓度 浓度 浓度 浓度 路激动 组
对照 组 组 组 剂 + 氯 对照 组 组 组 剂 + 氯
组 化镧组 组 化镧组
C. NF-κB p65 D. BMP-2
1.5 ##
SM22α蛋白的表达水平 1.0 ** ** # ## Δ ##
0.5
0
对照 氯化 模型 氯化 氯化 氯化 氯化 NF-κ B 阳性
组 镧高 组 钠组 镧低 镧中 镧高 信号通 对照
浓度 浓度 浓度 浓度 路激动 组
对照 组 组 组 剂 + 氯
组 化镧组
E. SM22α
#
注:与对照组比较, P<0.01;与模型组比较,P<0.05,P<0.01;与氯化镧高浓度组比较,P<0.05,P<0.01
**
ΔΔ
##
Δ
Note:vs. control group, P<0.01;vs. model group,P<0.05,P<0.01;vs. lanthanum chloride high concentration group,P<0.05,P<0.01
**
Δ
##
ΔΔ
#
图6 氯化镧对VSMCs细胞质中TRAF6、IκBα、NF-κB p65、BMP-2、SM22α蛋白表达的影响(x±±s,n=3)
Fig 6 Effects of lanthanum chloride on protein expression of TRAF6,IκBα,NF-κB p65,BMP-2 and SM22α in
cytoplasm of VSMCs(x±±s,n=3)
骨样细胞转分化,最终导致血管钙化。氯化镧可通过抑
Runx2 58 kDa
制钙化的VSMCs中TRAF6转录以及IκBα蛋白降解,进
NF-κB p65 65 kDa
而抑制 NF-κB 入核,从而发挥抑制 VSMCs 钙化的作
lamin A/C 65 kDa 用。同时,本研究采用实时荧光定量PCR法考察了氯化
对照组 氯化 模型组 氯化 氯化 氯化 氯化 NF-κ B 阳性
镧高 钠组 镧低 镧中 镧高 信号通 对照 镧对高磷致钙化VSMCs中TRAF6、IκBα、BMP-2、SM22
浓度 浓度 浓度 浓度 路激动 组
对照 组 组 组 剂 + 氯 α和 Runx2 mRNA 表达的影响,结果与蛋白表达的检测
组 化镧组
图7 氯化镧对VSMCs细胞核中Runx2、NF-κB p65蛋 结果基本一致。为进一步验证,本研究设置了NF-κB信
白表达影响的电泳图 号通路激动剂+氯化镧组进行对比。由于尚无特异性
Fig 7 Electrophoretic maps of the effects of lanthanum NF-κB 激动剂,故本研究参考文献[21]选用 LPS 作为
chloride on protein expression of Runx2 and NF-κB 激动剂进行实验。结果显示,与氯化镧高浓度
NF-κB p65 in nucleus of VSMCs
组比较,NF-κB 信号通路激动剂+氯化镧组红色钙沉积
解,随后激活NF-κB p65,活化的NF-κB p65转位至细胞 阳性细胞和黑色钙沉积物均明显增加,表明激活NF-κB
核并诱导其靶因子 Runx2 表达,从而促进 VSMCs 向成 信号通路会降低氯化镧对 VSMCs 钙化的抑制作用。
·2464 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 20 中国药房 2021年第32卷第20期