Page 42 - 《中国药房》2021年20期
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烧烫伤是指由火焰、热液、电等物理因素或强酸、强                         各半，体质量（300±50）g，购自湖北逸挚诚生物科技有
        碱等化学因素引起的组织损伤。目前统计结果显示，我                            限公司，动物生产许可证号为 SCXK（鄂）2016-0020；所
        国每年烧伤患者数约占总人口的 2％，大面积烧伤患者                           用健康SPF级昆明小鼠共80只，雌雄各半，体质量（22±
        的致残率达48％，不同地区的住院烧伤患者病死率可达                           2）g，购自湖北省疾病预防控制中心，动物生产许可证号
        0.34％～7.52％ 。皮肤创伤引起的剧痛、皮肤坏死、感                       为SCXK（鄂）2020-0018。所有动物购入后，饲养于湖北
                      [1]
        染、疤痕以及昂贵的修复治疗费用也给患者造成了严重                            中医药大学实验动物中心，饲养期间均自由摄食、饮
        的生理和心理负担。                                           水。本动物实验方案得到湖北中医药大学动物管理委
            鳄鱼是一种两栖爬行动物，研究者们发现鳄鱼在搏                          员会批准。
        斗中经常会受伤甚至四肢断裂，但伤口总能快速愈合，                            2 方法
                         [2]
        而且很少发生感染 。鳄鱼油是从鳄鱼体内提取出来的                            2.1 复方鳄鱼油烧伤膏的制备
        油，相关研究发现，世界上许多国家都有将鳄鱼油广泛                                取茯苓、白及、白芷、川芎药材适量，粉碎，过 100 目
                                 [3]
        用于治疗创面和炎症的记载 。现代药理研究表明，鳄                            筛；分别取上述药材粉末适量，置于烧杯中，加入凡士
        鱼油可促进大鼠皮肤烧伤创面的愈合，减少瘢痕形成，                            林，于70 ℃水浴加热20 min，混匀；放冷至常温后，加入
        并具有良好的抗炎镇痛效果 。随着鳄鱼养殖业的发                             相应量的鳄鱼油，混匀，即制得复方鳄鱼油烧伤膏。笔
                                  [4]
        展，鳄鱼油用于烧伤患者的治疗已经成为可能。                               者按上述方法分别制备了低、中、高3种不同比例的复方
            皮肤烧伤后，往往伴随着出血、炎症、疼痛、水肿、感                        鳄鱼油烧伤膏（鳄鱼油质量分数分别为 1.5％、3％、
        染等症状，导致创面愈合缓慢；且即使愈合后，往往也伴                           4.5％），分别为配方一、配方二和配方三。
        随着疤痕与色素沉积。中药茯苓性平、味甘，可调和药                            2.2  复方鳄鱼油烧伤膏对豚鼠浅ⅡⅡ度烧伤皮肤的修复
                                [5]
        性，且具有美白祛斑的功效 ；白及可收敛止血、消肿生                           作用考察
        肌，具有促进创面愈合的功效 ；白芷祛风止痛，具有抗                           2.2.1  分组、造模与给药         参考文献[9－11]方法造模：
                                  [6]
                                [7]
        炎镇痛、抗菌和美白的功效 ；川芎行气活血、祛风止痛，                          实验前24 h，采用脱毛膏对40只豚鼠背部脊柱左右两侧
                           [8]
        具有抗炎镇痛的作用 。基于此，本研究拟采用茯苓、白                           的皮肤进行脱毛，脱毛面积均为3 cm × 3 cm；脱毛后，采
        及、白芷、川芎与鳄鱼油进行配伍，制成复方鳄鱼油烧伤                           用乙醚对豚鼠进行麻醉，将直径为 2 cm 的砝码置于
        膏，并探讨其对浅Ⅱ度烧伤皮肤的修复及抗炎镇痛作                             100 ℃的恒温热水中加热15 min后取出，迅速擦干砝码
        用，以期为该制剂的开发应用提供科学依据。                                上的水分，然后紧贴豚鼠右侧脱毛部位皮肤4 s（经前期
        1 材料                                                预实验发现，烧烫的砝码紧贴豚鼠背部皮肤 4 s 即可达
        1.1  主要仪器                                           到造模效果）；左侧脱毛部位作为空白对照，不进行造模
            本研究所用主要仪器有：C21-RT2120 型电磁炉（广                    和给药。当豚鼠右侧脱毛部位皮肤发白，且次日可见烧
        东美的生活电器制造有限公司）、HH-6型数显恒温水浴                          伤区域皮肤硬化、结痂，则表明浅Ⅱ度烧伤模型复制成
        锅（常州国华电器有限公司）、BSA423S型千分之一电子                        功。将造模成功后的40只豚鼠随机分为模型组、京万红
        天平[赛多利斯科学仪器（北京）有限公司]、Spark 10M                      软膏组（阳性对照）和复方鳄鱼油烧伤膏配方一、配方
        型酶标仪（瑞士 Tecan 公司）、IX-73P1F 型显微镜（日本                  二、配方三组，每组8只。除模型组豚鼠不给药外，其余
        OLYMPUS公司）。                                         各组豚鼠每天按0.7 g/只（剂量根据预实验结果设置）涂
        1.2  主要药品与试剂                                        抹给药2次（早上10：00和下午4：00各给药1次，下同），
            鳄鱼油购自孝感顺利特种养殖有限公司；茯苓、白                          连续14 d。
        及 、白 芷 、川 芎 药 材（批 号 分 别 为 180901、181001、            2.2.2  豚鼠创面愈合情况观察           实验过程中，每天观察
        180812、180912）均购自安徽精诚本草中药饮片有限公                      并拍照记录各组豚鼠创面愈合情况，包括颜色、软硬情
                                                                                     [12]
        司，经湖北中医药大学药学院叶晓川教授鉴定为真品；                            况；同时，采用透明膜标记法 计算其创面愈合率[创面
        京万红软膏（批号212245，规格20 g/支）购自天津达仁堂                     愈合率＝（初始烧伤面积－未愈合创面面积）/初始烧伤
        京万红药业有限公司；表皮生长因子（EGF）、血管内皮                          面积×100％]。
        生长因子（VEGF）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛                         2.2.3  取材及处理      末次给药后次日，采用乙醚麻醉豚
        （MDA）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素 1（IL-1）                  鼠，心脏取血，血样于 4 ℃条件下以 3 500 r/min 离心 10
        的酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒（批号分别为                           min，吸取上层血清，分装后置于－80 ℃冰箱中保存，备
        20200724、20200724、20200724、20200724、20200710、       用。取血后，将各组豚鼠处死，取其右侧烧伤皮肤以及
        20200812）均购自上海抚生实业有限公司；其余试剂均                        左侧正常皮肤，以4％多聚甲醛溶液固定，备用。
        为分析纯，水为蒸馏水。                                         2.2.4  豚鼠创面组织病理学形态观察               取“2.2.3”项下
        1.3  实验动物                                           各组豚鼠经 4％多聚甲醛溶液固定后的皮肤，常规制作
            本研究所用健康清洁级 Hartley 豚鼠共 40 只，雌雄                  苏木精-伊红（HE）染色切片，采用显微镜观察并拍照记


        ·2468 ·  China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 20                                 中国药房    2021年第32卷第20期
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