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表 4   奥拉米特对 ATB-DILI 模型小鼠肝组织中 RAGE                  设置奥拉米特低、中、高剂量组，以临床常用护肝药物甘
              和 TNF-α蛋白表达水平的影响（x±±s，n＝10，                   草酸制剂（甘草酸二铵肠溶胶囊）为对照药物设置阳性
              ng/mL）                                        对照组。结果显示，低、中、高剂量奥拉米特和甘草酸二
        Tab 4 Effects of orazamide on protein expression of  铵均可以显著降低 ATB-DILI 模型小鼠的肝指数，改善
               RAGE and TNF-α in liver tissues of ATB-DILI
                                                            其肝功能指标，减轻其肝细胞损伤和炎症细胞浸润。这
               model mice（x±±s，n＝10，ng/mL）
                                                            说明奥拉米特能够预防ATB-DILI。
         组别                 RAGE              TNF-α             HMGB1是一种广泛存在于真核细胞核内且含量极
         空白组               70.05±4.74       158.51±9.57
         模型组              112.64±8.69 ＊     251.58±8.18 ＊   丰富的 DNA 结合蛋白，在核内参与 DNA 复制、重塑和
         奥拉米特低剂量组         103.63±8.41 ＊#Δ   214.07±10.48 ＊#Δ  DNA修复等过程，当细胞应激或死亡时，其可以迁移到
         奥拉米特中剂量组          92.94±6.35 ＊#Δ   199.63±6.54 ＊#Δ
         奥拉米特高剂量组          75.09±8.80 #     166.50±7.07 ＊#  细胞质中或释放至细胞外。近年来，HMGB1 作为一种
         阳性对照组             71.87±3.08 #     168.15±7.39 ＊#  常见的损伤相关模式分子，发挥着启动和促进炎症反
                                           #
                         ＊
            注：与空白组比较，P＜0.05；与模型组比较，P＜0.05；与奥拉米              应、加重组织损伤的作用 。有研究发现，在 ALT 或国
                                                                                  [18]
                    Δ
        特高剂量组比较，P＜0.05                                      际 标 准 化 比 值（INR）正 常 的 患 者 中 ，临 床 可 通 过
            Note：vs. blank group， P＜0.05；vs. model group，P＜0.05；vs.
                                               #
                           ＊
                                                            HMGB1 早期识别进展性肝损伤，该蛋白作为未来的一
                           Δ
        orazamide high-dose group，P＜0.05
                                                            种新型生物标志物具有较高的预测效能                 [19－20] 。RAGE是
        4 讨论
                                                            最早发现的且高亲和的 HMGB1 受体，两者结合后可以
                                                 [9]
            据估算，全球每天约有5 000人死于结核病 。结核
                                                            通过 NF-κB 抑制蛋白、p38 丝裂原活化蛋白激酶等炎症
        病作为危害全球人类健康的重大公共卫生问题之一，不
                                                            信号通路活化 NF-κB，NF-κB 激活后可诱导并促进
        得不引起人们的高度关注及重视。异烟肼和利福平均
                                                            TNF-α、白细胞介素 1β等多种炎症因子的表达，而这些
        是一线抗结核药物，且临床常联合使用，两药单用时均
                                                            炎症因子又可作为激动剂再反向作用于NF-κB，从而形
        有致肝损伤的副作用，联用后肝脏毒性加重 。李诗莹
                                              [10]
                                                            成了 NF-κB 正反馈环，放大炎症级联反应，形成炎症瀑
          [11]
        等 认为，氧化应激和线粒体功能障碍可能在异烟肼诱
                                                            布效应，从而形成持续的、扩大的、强化的炎症免疫反
                                               [12]
        导 ATB-DILI 中发挥了重要作用。张一杨等 发现，异
                                                            应，加重机体组织的损伤           [21－22] 。当机体细胞处于稳态
        烟肼诱导肝细胞损伤可能与低表达沉默信息调节因子1
                                                            时，HMGB1主要存在于细胞核，而NF-κB存在于细胞质
        增加 NF-κB p65、白细胞介素 6、TNF-α等炎症因子的释
                                                            中；当遇到外界刺激时，两者表达上调并出现“转位”现
        放相关。李津等 研究发现，当异烟肼和利福平两药联
                       [13]
                                                            象 。本研究 SABC 免疫组化结果显示，空白组小鼠肝
                                                              [22]
        用时，利福平的肝微粒体酶诱导作用可增强异烟肼降解
                                                            细胞内 HMGB1 和 NF-κB 呈微量表达，模型组小鼠肝细
        产物乙酰肼的肝毒性。向晓雪等 实验表明，两药联用
                                     [14]
                                                            胞胞核和胞质中 HMGB1 和 NF-κB 的表达均明显增强，
        时肝毒性主要来源于利福平所致的胆汁淤积。为此，本
                                                            说明机体处于炎症反应状态。与模型组比较，奥拉米特
        研究利用异烟肼联合利福平复制 ATB-DILI 模型，结果
                                                            低、中、高剂量组和阳性对照组小鼠肝组织中 HMGB1、
        显示，与空白组比较，模型组小鼠血清中 TBIL、DBIL、
                                                            RAGE、NF-κB、TNF-α蛋白的表达均显著降低，提示奥拉
        ALT、AST、ALP、γ-GT、TBA 水平均显著升高，并伴有肝                   米特对异烟肼联合利福平所致 ATB-DILI 有预防作用，
        小叶结构紊乱，肝细胞变性、坏死，炎症细胞浸润等病理                           其机制可能与下调肝组织中HMGB1和RAGE蛋白的表
        改变，与本课题组前期预实验结果基本一致，提示                              达、抑制炎症因子的分泌有关，可能与阳性对照药物的
        ATB-DILI模型复制成功。                                     作用机制相同。此外，本研究还发现奥拉米特高剂量组
            奥拉米特为嘌呤及嘧啶衍生物前体，有阻止肝细胞                          小鼠肝组织中HMGB1和RAGE蛋白的表达水平恢复至
        坏死和肝纤维化的作用，并能刺激肝细胞再生，活化肝                            空白组水平，但NF-κB和TNF-α蛋白的表达水平未达到
        实质细胞，在改善急慢性肝损伤及调节代谢异常方面有                            空白组水平，说明可能存在其他炎症通路激活NF-κB介
        着十分肯定的作用         [7，15] ，且对 ATB-DILI 也有一定的预防        导的下游级联炎症反应，具体原因有待进一步探讨。
            [6]
        效果 ，但其护肝机制尚未明确。近期研究表明，经具有                               综上所述，奥拉米特能够预防异烟肼联合利福平所
        抗氧化特性的 HMGB1 抑制剂甘草酸预处理或处理后，                         致 的 小 鼠 ATB-DILI，其 机 制 可 能 与 下 调 肝 组 织 中
        缺血再灌注肝损伤模型小鼠的肝脏炎症、中性粒细胞浸                            HMGB1和RAGE蛋白表达、抑制炎症因子分泌有关。
        润和乙酰氨基酚所致的损伤均明显减轻                   [16－17] 。为深入    参考文献
        认识奥拉米特在 ATB-DILI 中的作用机制，从而提供早                       [ 1 ]  徐彩红，赵雁林.从《2020 年全球结核病报告》看我国结
        期防治的新思路，本研究按照临床成人剂量的1、2、4倍                               核病防治工作[J].中华传染病杂志，2021，39（7）：392-

        ·2234 ·  China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 18                                 中国药房    2021年第32卷第18期
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