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表 4 各组细胞中 PPARα通路相关基因 mRNA 表达水 表 5 各组细胞中 PPARα通路相关蛋白表达水平的测
平的测定结果（x±±s，n＝3） 定结果（x±±s，n＝3）
Tab 4 mRNA expression of PPAR α pathway related Tab 5 Protein expression of PPARα pathway related
gene of cells in each group（x±±s，n＝3） protein of cells in each group（x±±s，n＝3）

组别 PPARα CPT-1 SIRT1 PGC-1α SREBP-1c FAS PPARα/ CPT-1/ SIRT1/ PGC-1α/ SREBP-1c/ FAS/
组别
对照组 1.00±0.08 1.01±0.20 1.00±0.06 1.00±0.07 0.99±0.04 1.00±0.03 GAPDH GAPDH GAPDH GAPDH GAPDH GAPDH
模型组 0.58±0.09 ＊＊ 0.65±0.05 ＊ 0.63±0.04 ＊＊ 0.52±0.03 ＊＊ 1.41±0.02 ＊＊ 1.41±0.02 ＊＊ 对照组 0.42±0.05 0.41±0.06 0.19±0.01 0.61±0.07 0.37±0.08 0.44±0.01
桑根酮C低浓度组 0.71±0.05 # 1.75±0.23 ## 1.35±0.03 ## 1.04±0.05 ## 1.17±0.04 ## 1.20±0.02 ## 模型组 0.27±0.02 ＊＊ 0.25±0.03 ＊＊ 0.12±0.01 ＊＊ 0.38±0.09 ＊＊ 0.58±0.13 ＊ 0.75±0.06 ＊＊
桑根酮C中浓度组 0.76±0.06 ## 1.92±0.25 ## 1.86±0.24 ## 1.29±0.02 ## 0.86±0.04 ## 0.89±0.05 ## 桑根酮C低浓度组 0.37±0.04 ## 0.44±0.08 # 0.20±0.01 ## 0.67±0.04 ## 0.44±0.14 0.60±0.04 ##
桑根酮C高浓度组 1.53±0.05 ## 2.68±0.25 ## 3.00±0.26 ## 2.30±0.12 ## 0.69±0.01 ## 0.66±0.02 ## 桑根酮C中浓度组 0.40±0.03 ## 0.47±0.10 # 0.25±0.01 ## 0.79±0.03 ## 0.31±0.11 # 0.52±0.02 ##
非诺贝特组 1.21±0.10 ## 2.34±0.02 ## 2.60±0.35 ## 1.08±0.01 ## 0.83±0.09 ## 0.77±0.03 ## 桑根酮C高浓度组 0.57±0.06 ## 0.59±0.11 ## 0.35±0.02 ## 1.13±0.05 ## 0.22±0.06 ## 0.34±0.01 ##
非诺贝特组 0.51±0.05 ## 0.52±0.08 ## 0.31±0.01 ## 0.90±0.01 ## 0.30±0.10 # 0.39±0.03 ##
#
＊ ＊
＊
注：与对照组比较， P＜0.05， P＜0.01；与模型组比较，P＜
＊
#
＊ ＊
##
0.05，P＜0.01 注：与对照组比较， P＜0.05， P＜0.01；与模型组比较，P＜
##
＊
Note：vs. control group， P＜0.05， P＜0.01；vs. model group， 0.05，P＜0.01
＊ ＊
＊
＊ ＊
# P＜0.05，P＜0.01 Note：vs. control group， P＜0.05， P＜0.01；vs. model group，
##
# P＜0.05，P＜0.01
##
SIRT1、PGC-1α的蛋白表达水平均显著降低（P＜0.01），
为“第三次打击” 。由此可见，肝脏脂质代谢紊乱引起
[21]
SREBP-1c、FAS的蛋白表达水平均显著升高（P＜0.05或
的肝细胞内脂质沉积（尤其是 TG 过多聚积）是导致
P＜0.01）；与模型组比较，桑根酮C各浓度组和非诺贝特
NAFLD 的主要原因 [22－23] 。现有的建立 NAFLD 模型的
组细胞中 PPARα、CPT-1、SIRT1、PGC-1α的蛋白表达水
细胞主要包括原代肝细胞、永生细胞系、诱导多能干细
平均显著升高（P＜0.05 或 P＜0.01），SREBP-1c（桑根酮
胞等，其中永生细胞系具有生长稳定、无限寿命、表型稳
C低浓度组除外）、FAS的蛋白表达水平均显著降低（P＜
定、培养条件比原代肝细胞简单、易于在不同实验室间
0.05或P＜0.01），详见图3、表5。
[17]
标准化等优点 ，因此本研究选择永生细胞系的人肝癌
PPARα 52 kDa
HepG2细胞进行研究。
CPT-1 86 kDa 本研究以游离脂肪酸诱导 HepG2 细胞发生脂质蓄
SIRT1 120 kDa 积，以探讨桑根酮 C 对 NAFLD 脂质代谢的改善作用及
相关机制。结果显示，HepG2 细胞经 1 mmol/L 游离脂
PGC-1α 91 kDa
肪酸诱导 24 h 后，细胞中脂滴数明显增加，脂质水平、
SREBP-1c 122 kDa
TG含量均显著升高，表明脂质蓄积模型复制成功；经桑
FAS 38 kDa
根酮 C 干预后，细胞中脂滴数明显减少，脂质水平、TG
GAPDH 36 kDa
含量均显著降低，表明桑根酮C可减少HepG2细胞的脂
对照组 模型组 桑根酮低 桑根酮中 桑根酮高 非诺贝特
浓度组 浓度组 浓度组 组 质蓄积。
图 3 桑根酮 C 对 HepG2 细胞中 PPARα通路相关蛋白 肝脏中脂质代谢离不开多种关键酶与蛋白的相互
表达影响的电泳图 作用。研究表明，PPARα通路在控制脂肪酸转运与氧
Fig 3 Electrophoretogram of the effects of sangge-
化、脂质合成和分解等代谢过程中具有重要作用 。本
[23]
none C on the expression of PPARα signaling
研究结果显示，经游离脂肪酸诱导后，HepG2 细胞中
pathway related protein in HepG2 cells
PPARα、CPT-1、SIRT1、PGC-1α的 mRNA 和蛋白表达水
4 讨论 平均显著降低，SREBP-1c、FAS 的 mRNA 和蛋白表达水
NAFLD被认为是代谢综合征在肝脏的一种表现形 平均显著升高；经桑根酮 C 干预后，细胞中上述指标均
式，其发病机制较为复杂，主要包括胰岛素抵抗、脂代谢 显著逆转（桑根酮 C 低浓度组的 SREBP-1c 蛋白除外），
[20]
紊乱、炎症反应失调等 。目前较为公认的发病机制是 表明桑根酮C能激活PPARα途径、提高肝细胞的脂质氧
“多次打击学说”，即以胰岛素抵抗为主的肝脏脂肪变性 化能力、减少细胞中的脂质合成，从而减轻脂质蓄积。
为“第一次打击”，以肝细胞内过氧化应激、内质网应激、 综上所述，桑根酮 C 可改善 HepG2 细胞的脂质蓄
肠道衍生内毒素、炎症级联反应等为“第二次打击”，以 积；其作用机制可能与调节 PPARα信号通路、提高细胞
肝脏免疫紊乱导致肝纤维化、肝细胞缺血坏死和肝硬化 脂质氧化能力、抑制脂质合成有关。

·1872 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 15 中国药房 2021年第32卷第15期