Page 85 - 2021年15期

PPARα一抗（稀释度为 1 ∶ 1 000）、CPT-1 一抗（稀释度为 表3 各组细胞中脂质水平和TG含量的测定结果（x±±
1 ∶ 1 000）、SREBP-1c 一抗（稀释度为 1 ∶ 800）、FAS 一抗 s，n＝3）
（稀释度为 1 ∶ 800）、SIRT1 一抗（稀释度为 1 ∶ 800）、 Tab 3 Lipid level and TG content of cells in each
PGC-1α一抗（稀释度为1 ∶ 800）、GAPDH一抗（稀释度为 group（x±±s，n＝3）

1 ∶ 1 000），于 4 ℃孵育过夜；以 TBST 缓冲液洗膜 10 组别 脂质水平 TG，mmol/L
对照组 0.76±0.03 0.22±0.04
min×3 次，加入二抗（稀释度为 1 ∶ 3 000），室温孵育 2 h；
模型组 1.59±0.02 ＊＊ 0.50±0.08 ＊＊
以TBST缓冲液洗膜10 min×3次，加入ECL化学发光试 桑根酮C 低浓度组 1.42±0.04 ## 0.39±0.02 #
剂，采用全自动化学发光成像分析仪成像。采用 Image 桑根酮C中浓度组 1.31±0.06 ## 0.36±0.07 #
桑根酮C高浓度组 0.90±0.01 # 0.28±0.01 ##
J 6.0 软件进行分析，以目的蛋白灰度值与内参 GAPDH 非诺贝特组 1.00±0.03 ## 0.30±0.04 ##
灰度值的比值表示目的蛋白的表达水平。 注：与对照组比较， P＜0.01；与模型组比较，P＜0.05，P＜0.01
#
＊＊
##
2.8 统计学方法 Note：vs. control group， ＊ ＊ P＜0.01；vs. model group，P＜0.05，
#
##
采用SPSS 20.0软件进行数据统计分析，结果以x± P＜0.01
s 表示。多组间比较采用单因素方差分析；组间两两比
较时，若方差齐则采用最小显著性差异法（LSD），若方
差不齐则采用 Dunnett’s T3 多重比较。检验水准α＝
0.05。
3 结果
3.1 桑根酮C对HepG2细胞存活率的影响 A.对照组 B.模型组
与对照组比较，桑根酮C 16、32 μmol/L组细胞存活
率显著降低（P＜0.01），详见表 2。因此，本研究选取对

细胞活性无明显影响的 2、4、8 μmol/L 桑根酮 C 进行后
续实验。
表2 各组细胞存活率的测定结果（x±±s，n＝6）
Tab 2 Survival rate of cells in each group（x±±s，n＝6） C.桑根酮C低浓度组 D.桑根酮C中浓度组
组别 细胞存活率，％ 组别 细胞存活率，％
对照组 100.00±2.95 桑根酮C 8 μmol/L组 94.66±5.66
桑根酮C 2 μmol/L组 97.88±2.84 桑根酮C 16 μmol/L组 87.55±7.42 ＊＊
桑根酮C 4 μmol/L组 97.99±3.50 桑根酮C 32 μmol/L组 17.53±4.18 ＊＊
注：与对照组比较， P＜0.01
＊＊
Note：vs. control group， P＜0.01
＊＊
3.2 桑根酮 C 对 HepG2 细胞中脂质蓄积和 TG 含量的
E.桑根酮C高浓度组 F.非诺贝特组
影响 注：黄色箭头为脂滴部位
与对照组比较，模型组细胞的细胞核（镜下显蓝色） Note：the yellow arrow indicates the area of lipid droplets
明显萎缩、体积变小，脂滴数（镜下显红色）明显增加，细 图 2 桑根酮 C 对 HepG2 细胞中脂质蓄积影响的显微
图（油红O染色，×400）
胞中脂质水平和TG含量均显著升高（P＜0.01）；与模型
Fig 2 Effect of sanggenone C on lipid accumulation in
组比较，桑根酮C各浓度组和非诺贝特组细胞的细胞核
HepG2 cells（oil red O staining，×400）
萎缩不明显、体积大小正常，脂滴数明显减少，细胞中脂
诺 贝 特 组 细 胞 中 PPAR α 、CPT-1、SIRT1、PGC-1 α 的
质水平和TG含量均显著降低（P＜0.05），详见表3、图2。
3.3 桑根酮 C 对 HepG2 细胞中 PPARα通路相关基因 mRNA 表 达 水 平 均 显 著 升 高（P＜0.05 或 P＜0.01），

mRNA表达的影响 SREBP-1c、FAS 的 mRNA 表达水平均显著降低（P＜
与 对 照 组 比 较 ，模 型 组 细 胞 中 PPAR α 、CPT-1、 0.01），详见表4。
SIRT1、PGC-1α 的mRNA表达水平均显著降低（P＜0.05 3.4 桑根酮C对HepG2细胞中PPARα通路相关蛋白表
或 P＜0.01），SREBP-1c、FAS 的 mRNA 表达水平均显著 达的影响
升高（P＜0.01）；与模型组比较，桑根酮 C 各浓度组和非 与 对 照 组 比 较 ，模 型 组 细 胞 中 PPAR α 、CPT-1、

中国药房 2021年第32卷第15期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 15 ·1871 ·