Page 72 - 中国药房2021年11期
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表明，西洋参具有抗肿瘤、免疫调节、改善心血管系统疾                           安徽宏信药业发展有限公司，经安徽省食品药品检验研
        病等作用     [4－5] 。相关研究发现，西洋参中含有皂苷类、氨                  究院张亚中主任中药师鉴定为五加科植物西洋参 P.
        基酸类、糖类、黄酮类和无机元素类等活性成分，其中皂                           quinquefolium L. 的干燥根。
        苷类是其最主要的活性成分 。                                      1.3 其他材料
                                [6]
            西洋参较为名贵，常将其制成破壁饮片，以最大限                              本研究共用到14根色谱柱（编号col 1～col 14），其
        度地利用其药效成分，且对节约药材资源具有重要意                             中 col1 为 ZORBAX Eclipse Plus C18，col2 为 Agilent5
          [7]
        义 。目前，多以2020年版《中国药典》（一部）中规定的                        TC-C18，col 3 为 DIKMA Diamonsil C18，col4 为 DIKMA
        人参皂苷 Rg1、Re、Rb1含量作为西洋参破壁饮片的质量                       Inspire C18，col 5 为 Phenomenex Kinetex C18 100A，col 6
                 [1]
        评价指标 ，但仅测定这3种成分，并不能全面反映西洋                           为 JADE-PAK ODS-AQ，col 7 为 Innoval C18，col 8 为
        参的内在质量。                                             TechMate C18 ST，col 9 为 TechMate CR（1 ∶ 5）-ST，col 10
            对于中药的多成分含量测定，相关研究者提出采用                          为 Venusil ASB C18，col 11 为 Waters XBridge C18，col 12
        替代对照品法或一测多评法             [8－14] ，但这些方法均是以一          为 ZORBAX Eclipse XDB C18，col 13 为 Shim-pack
        个成分作为内参，对多个目标成分以相对校正因子法进                            VP-ODS，col 14 为 Phenomenex Luna C18，所有色谱柱的
        行定量、以相对保留时间法进行定性，虽节约了对照品，                           规格均相同（250 mm×4.6 mm，5 μm）。
                               [14]
                                             [15]
        但定性和定量的误差稍大 。后续孙磊等 提出了“双                            2 方法与结果
        标多测法”，即以2个对照品采用双标线性校正法对其他                           2.1 色谱条件
        色谱峰进行定性，并结合相对校正因子法对其他成分进                                选用UItiMate 3000型高效液相色谱仪；定性研究的
        行定量；且在相同分析条件下，双标线性校正法提高了                            色谱柱选择col 1～col 13；定量研究色谱柱选择col 2；流
        色谱峰定性的准确度和色谱柱的适用性，实现了目标成                            动相为乙腈（A）-0.2％磷酸溶液（B），梯度洗脱（0～15
        分在不同品牌、型号的色谱柱和色谱仪间保留时间模型                            min，81％B；15～20 min，81％B→79％B；20～35 min，
        的迁移均存在线性关系。因此，在实际应用中，可利用                            79％ B→75％ B；35～55 min，75％ B→68％ B；55～70
        这种线性关系提高保留时间的重现性                 [15－16] 。基于此，本     min，68％B→57％B；70～73 min，57％B→47％B；73～
        研究建立了测定西洋参破壁饮片中人参皂苷 Rg1、Re、                         75 min，47％B→81％B）；流速为 1.0 mL/min；检测波长
        Rb1、Rc、Ro、Rb2、Rb3、Rd 含量的双标多测法，以期为该                  为203 nm；柱温为30 ℃；进样量为10 μL。
        饮片多指标成分综合质量控制和评价提供思路。                               2.2  溶液的制备
        1 材料                                                2.2.1  混合对照品溶液的制备            分别取人参皂苷 Rg1、
        1.1  主要仪器                                           Re、Rb1、Rc、Ro、Rb2、Rb3、Rd 对照品适量，精密称定，置
            UItiMate 3000型高效液相色谱（HPLC）仪及所配备                 于同一5 mL量瓶中，加甲醇溶解，配制成质量浓度分别
        的二极管阵列检测器（DAD）检测器购自美国Dionex公                        为 0.25、1.378、3.86、0.41、0.388、0.076、0.166、0.65 mg/mL
        司；LC-20AT 型 HPLC 仪购自日本 Shimadzu 公司；1260             的混合对照品溶液。
        型HPLC仪及所配备的VWD检测器购自美国Agilent公                       2.2.2  供试品溶液的制备         参考文献[1]方法，取西洋参
        司；XP26 型百万分之一电子分析天平购自瑞士 Mettler                     破壁饮片粉末（过三号筛，下同）约 1 g，精密称定，置于
        Toledo公司；185型超纯水仪购自美国Millipore 公司。                  具塞锥形瓶中，精密加入水饱和的正丁醇50 mL，称定质
        1.2 主要药品与试剂                                         量；水浴加热回流提取 1.5 h，放冷，再称定质量，以水饱
            人参皂苷Rg1 （批号110703-201128，纯度≥93.4％）、             的正丁醇补足减失的质量，摇匀，滤过；精密量取续滤液
        人参皂苷Re（批号110754-201626，纯度≥92.7％）、人参                 25 mL，置于蒸发皿中，水浴蒸干，残渣加 50％甲醇溶解
        皂苷Rb1 （批号110704-201122，纯度≥92.9％）、人参皂苷               并转移至 10 mL 量瓶中，加 50％甲醇定容，摇匀，滤过，
        Rc（批号 110021-14-0，纯度≥98％）、人参皂苷 Ro（批号                取续滤液，即得。
        111903-201102，纯 度 ≥98％）、人 参 皂 苷 Rb2（批 号             2.3 方法学考察
        111715-200501，纯 度 ≥98％）、人 参 皂 苷 Rb3（批 号             2.3.1  专属性试验       取混合对照品溶液、供试品溶液
        111686-200501，纯 度 ≥98％）、人 参 皂 苷 Rd（批 号             （编号 S2）和阴性对照溶液（即 50％甲醇溶液）适量，按
        111818-201001，纯度≥94.4％）均为对照品，均购自中国                 “2.1”项下色谱条件（色谱柱为 col 2）进样测定，记录色
        食品药品检定研究院；乙腈、甲醇为色谱纯，磷酸、正丁                           谱图。结果显示，各待测成分峰分离度均大于 1.5，见
        醇为分析纯，水为超纯水。                                        图1。
            10 批西洋参破壁饮片样品（编号 S1～S10）均购自                     2.3.2  线性关系考察        精密量取“2.2.1”项下的混合对


        ·1346 ·  China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 11                                 中国药房    2021年第32卷第11期
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