Page 82 - 《中国药房》2021年5期

表 5 PB 对 红 色 毛 癣 菌 生 物 被 膜 中 ERG6、ERG11
mRNA相对表达量的影响（x±±s，n＝3）
生长对照组 Tab 5 Effects of PB on mRNA expression of ERG6

and ERG11 in the biofilm of T. rubrum（x±±s，
n＝3）
组别 质量浓度，μg/mL ERG6 mRNA ERG11 mRNA
PB 20 μg/mL质量浓度组 TBF组 320 2 8 1.00±0.05 Δ Δ Δ 1.00±0.06 Δ ΔΔ
0.81±0.05
生长对照组
0.88±0.02
0.83±0.04
0.64±0.17
AMB组
0.65±0.04
PB组
0.65±0.04
Δ
注：与生长对照组比较，P＜0.05，P＜0.01
ΔΔ
Note：vs. growth control group，P＜0.05，P＜0.01
ΔΔ
Δ
PB 40 μg/mL质量浓度组 讨了在培养基中加入与不加 FBS 对红色毛癣菌生物被
珠菌生物被膜中孢子的代谢活性。基于此，本研究也探
膜形成的影响。结果表明，在含10％FBS的RPMI-1640
培养基中，且初黏附时间为6 h时，红色毛癣菌生物被膜
的形成量最优。
真菌生物被膜的形成分为黏附期、形成期、成熟
PB 80 μg/mL质量浓度组 期 。Lin 等 的研究表明，PB 对红色毛癣菌生物被膜
[21]
[22]
形成期和成熟期有明显抑制作用。由于真菌的黏附是
形成生物被膜的第一步，若真菌不能牢固定植于宿主器
官或组织表面，则容易被血液及其他体液冲刷而不能引
初黏附3 h 初黏附5 h 初黏附9 h
[23]
起感染，就会影响生物被膜的形成 。本研究采用XTT
图 1 PB 对不同初黏附时间下红色毛癣菌生物被膜形
法研究PB对红色毛癣菌黏附过程的影响，结果表明，PB
成的影响显微图（×400）
能显著降低红色毛癣菌的相对黏附率，抑制其黏附过
Fig 1 Micrograph of effects of PB on the biofilm for-
程，从而降低其生物膜的生成量。
mation of T. rubrum at different adhesion pe-
红色毛癣菌初黏附时间的长短对其生物被膜形成
riods（×400）
[24]
的能力有至关重要的影响 。本研究通过 XTT 法检测
表 4 PB 对不同初黏附时间下红色毛癣菌生物被膜形 黏附不同时间后 PB 对红色毛癣菌生物被膜形成的影
成的影响（x±±s，n＝5） 响。结果显示，在同样药物浓度下，黏附时间越长，药物
Tab 4 Effect of PB on the biofilm formation of T. ru- 对其黏附抑制率较高，表明 PB 对红色毛癣菌生物被膜
brum at different adhesion periods（x±±s，n＝5）
形成的抑制作用与其初黏附的时间长短有关。Henry
黏附抑制率，％ [25]
组别 等 的研究表明，AMB可能通过与真菌细胞膜甾醇成分
初黏附3 h 初黏附5 h 初黏附9 h
生长对照组 0 0 0 直接结合，使结合后的麦角甾醇合成通路的下游结合型
PB 20 μg/mL质量浓度组 0 4.7±0.059 Δ 3.4±0.023 ΔΔ 甾醇含量增加，可直接诱导 ERG mRNA 表达水平的降
PB 40 μg/mL质量浓度组 0 17.8±0.089 Δ 47.5±0.076 ΔΔ 低。本研究结果表明，与生长对照组比较，PB（320
PB 80 μg/mL质量浓度组 69.4±0.096 Δ 91.1±0.077 Δ 98.1±0.019 ΔΔ
µg/mL）可 显 著 降 低 红 色 毛 癣 菌 生 物 被 膜 中 ERG6、
注：与生长对照组比较，P＜0.05，P＜0.01
Δ
ΔΔ
Note：vs. growth control group，P＜0.05，P＜0.01 ERG11 mRNA的相对表达量。这提示PB可能是通过与
Δ
ΔΔ
4 讨论 真菌细胞膜甾醇成分直接结合成复合物，降低甾醇成分
目前国内外对红色毛癣菌生物被膜的研究甚少，对 分解，抑制麦角甾醇合成通路中相关靶酶基因的表达，
真菌生物被膜的研究主要集中在白色念珠菌生物被膜， 进而降低麦角甾醇的合成，破坏红色毛癣菌生物被膜的
[15]
尚未形成对红色毛癣菌生物被膜的系统性探究 。真 平衡性，使胞内物质外流，从而起到抑菌及杀菌的作
菌生物被膜的形成过程中受到很多因素的影响，包括不 用。与生长对照组比较，在2 µg/mL TBF的作用下，红色
同的培养基成分及黏附时间，即使在相同材质的黏附表 毛癣菌生物被膜中 ERG6、ERG11 mRNA 的相对表达量
面，在外界环境营养成分不一致的情况下生物被膜产生 均显著升高，提示其对麦角甾醇合成通路中 ERG6、
的程度也不尽相同 [16－18] 。例如Nikawa等 和 Frade等 [20] ERG11 基因表达的影响与 PB 和 AMB 不同，这可能与
[19]
的研究表明，在培养基中添加血清，可有效增加白色念 Cardoza等 发现的ERG基因的表达与菌株耐药有关。
[26]

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