Page 74 - 《中国药房》2021年5期

味总黄酮样品的纯度以芦丁计为63.86％。 2.8 大鼠踝关节病理学变化的观察
2.2 分组、造模与给药 取大鼠左踝关节，以 4％多聚甲醛固定，再经过脱
将 56 只大鼠随机分为正常对照组，模型组，甲氨蝶 钙、脱水、常规石蜡包埋、切片（厚度 4～5 μm），行常规
呤组（阳性对照组），独一味水提液低、中、高剂量组和独 HE 染色后，在显微镜下观察大鼠踝关节的病理学变化
一味总黄酮组，每组8只。造模前先用游标卡尺测定各 （包括炎症反应、滑膜增生、软骨破坏等）。
组大鼠的左后足掌厚度，记为第0天的足掌厚度。除正 2.9 统计学方法
常对照组外，其余各组大鼠均于右后足垫注射FCA 0.05 采用 SPSS 21.0 软件进行数据分析。计量资料以
mL复制AA模型 ；正常对照组大鼠注射等体积生理盐 x±s表示，同组间不同给药时间的比较采用配对t检验；
[13]
水。注射 FCA 次日，阳性对照组大鼠灌胃甲氨蝶呤（3 多组间比较采用单因素方差分析，方差齐者组间两两比
[14]
mg/kg ，以 0.5％CMC-Na 溶液为溶剂制成混悬液）；独 较采用LSD法，方差不齐者组间两两比较采用Dunnett’s
一味水提液低、中、高剂量组大鼠分别灌胃独一味水提 T3法。P＜0.05表示差异具有统计学意义。
液[0.5、1、2 g/kg（以生药量计），剂量参考 2020 年版《中 3 结果
国药典》（一部）中独一味片的临床使用剂量进行换算后 3.1 独一味水提液和总黄酮对 AA 模型大鼠一般情况
[5]
制定 ]；独一味总黄酮组大鼠灌胃总黄酮提取物（200 的影响
mg/kg，以0.5％CMC-Na溶液为溶剂制成混悬液，剂量相 给药第 15 天时，与正常对照组比较，模型组大鼠表
当于独一味水提液高剂量组中黄酮类成分的量）；正常 现出精神倦怠、活动减少、食欲下降、被毛失去光泽、体
对照组和模型组大鼠灌胃等体积 0.5％ CMC-Na 溶液。 质量减轻等症状，且未注射FCA的其余3只肢体均出现
仅甲氨蝶呤组大鼠每 3 天给药 1 次，其余各组大鼠均每 不同程度的关节红肿，表明造模成功。上述现象在各给
天给药1次，给药体积均为10 mL/kg，连续给药30天。 药组大鼠中均有所改善。
2.3 大鼠一般情况观察 3.2 独一味水提液和总黄酮对 AA 模型大鼠足肿胀度
给药第 15 天时，观察各组大鼠的精神、活动状态和 的影响
饮食、体毛色泽及关节红肿情况，并测定其体质量。根 与正常对照组比较，模型组大鼠给药第 15、30 天时
据大鼠未注射 FCA 的另外 3 只肢体的关节红肿情况判 的足肿胀度均显著升高（P＜0.01）。与模型组比较，各
[15]
断是否造模成功 。 给药大鼠给药第 15、30 天时的足肿胀度均显著降低
2.4 大鼠足肿胀度的测定 （P＜0.01）。与同组给药第 15 天时比较，各给药组大鼠
分别于第15、30天给药4 h后，采用游标卡尺测定各 给药第 30 天时的足肿胀度均显著降低（P＜0.01），而模
组大鼠左后足掌的厚度（mm），并计算其足肿胀度（足肿 型组差异无统计学意义（P＞0.05）。与独一味水提液高
胀度＝第15天或第30天的左后足掌厚度/第0天的左后 剂量组比较，独一味总黄酮组大鼠给药第15天时的足肿
足掌厚度）。 胀度差异无统计学意义（P＞0.05），但给药第 30 天时的
2.5 大鼠关节炎指数的测定 足肿胀度显著升高（P＜0.05）。给药第 15、30 天时各组
第15、30天给药4 h后，按5级评分法对大鼠未注射 大鼠的足肿胀度测定结果见表1。
[15]
FCA 的其余 3 只肢体的病变程度进行评分 ：无红肿，0 表1 给药第15、30天时各组大鼠的足肿胀度测定结果
分；足小趾关节红肿，1分；趾关节和足趾均肿胀，2分；踝 （x±±s，n＝8）
关节以下的足爪均肿胀，3分；包括踝关节在内的全部足 Tab 1 Degree of paw swelling of rats in each group at
爪红肿，4分。3只肢体评分之和即为关节炎指数。 15th and 30th day of administration（x ±± s，
2.6 大鼠炎症细胞因子水平的测定 n＝8）
第 30 天给药后，大鼠禁食不禁水 12 h，测定大鼠体 组别 足肿胀度
质量，观察大鼠左后足掌肿胀情况并拍照。然后腹腔注 给药第15天 给药第30天
正常对照组 1.06±0.03 1.14±0.03
射 3.5％水合氯醛（10 mL/kg）将大鼠麻醉，腹主动脉采 模型组 2.39±0.35 ＊＊ 2.35±0.17 ＊＊
血，在4 ℃下放置过夜，然后在4 ℃下以3 000 r/min离心 甲氨蝶呤组 1.47±0.11 ## 1.19±0.07 ##ΔΔ
10 min，取上层血清。按相应ELISA检测试剂盒说明书 独一味水提液低剂量组 2.10±0.25 ## 1.78±0.09 ##ΔΔ
独一味水提液中剂量组 1.95±0.19 ## 1.69±0.10 ##ΔΔ
方法操作，分别检测血清中致炎细胞因子（TNF-α、IL- 独一味水提液高剂量组 1.78±0.11 ## 1.43±0.12 ##ΔΔ
1β、IL-6）和抗炎细胞因子（IL-10）的水平。 独一味总黄酮组 1.93±0.09 ## 1.65±0.24 ##ΔΔ▲
2.7 大鼠胸腺指数和脾指数的测定 注：与正常对照组比较， P＜0.01；与模型组比较，P＜0.01；与同
＊＊
##
Δ Δ
大鼠腹主动脉采血后，立即剥离其胸腺和脾脏，用 组给药第 15 天时比较， P＜0.01；与独一味水提液高剂量组比较，
▲ P＜0.05
滤纸轻轻擦拭干净，称质量，计算胸腺指数和脾指数：胸
##
＊ ＊
Note：vs. normal control group， P＜0.01；vs. model group，P＜
腺指数＝胸腺质量（mg）/体质量（g）；脾指数＝脾质量 0.01；vs. 15th day of administration in the same group， P＜0.01；vs. L.
ΔΔ
（mg）/体质量（g）。 rotata water extract high-dose group，P＜0.05
▲
·580 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 5 中国药房 2021年第32卷第5期