Page 73 - 《中国药房》2021年5期

and infiltration of articular cavity were observed in ankle joint. Compared with model group，degree of paw swelling，arthritis index
at 15th and 30th day of administration as well as the spleen index and the levels of TNF-α，IL-1β，IL-6 in serum at 30th day of
administration were significantly decreased in each medicine group（P＜0.01）；while the thymus index and IL-10 level at 30th day
of administration were significantly increased （P＜0.01）；the pathological changes of arthritis were significantly improved.
Compared with L. rotata water extract high-dose group，there were no significant differences in degree of paw swelling at 15th day
of administration as well as the arthritis index，spleen index ，levels of inflammatory cytokines and pathological changes of ankle
joint in L. rotata total flavonoid group（P＞0.05）. CONCLUSIONS：Tibetan medicine L. rotata shows well anti-RA activity，and
total flavonoids may be the active ingredients of its efficacy.
KEYWORDS Lamiophlomis rotata；Rheumatoid arthritis；Adjuvant-induced arthritis；Active ingredients；Total flavonoids；Rat

类风湿关节炎（Rheumatoid arthritis，RA）是一种常 峡医药高等专科学校药学院马羚副教授鉴定为唇形科
见的自身免疫性疾病，病因尚不清楚，其发病机制可能 植物独一味L. rotata（Benth.）Kudo的干燥地上部分，药
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与免疫紊乱、环境、遗传易感等因素相关 ，其特征是滑 材标本（编号 duyiwei2018.12）保存于西南大学药学院·
膜炎症和增生、自身抗体产生（如类风湿因子和抗瓜氨 中医药学院。弗氏完全佐剂（FCA，批号7027）购自美国
酸化蛋白抗体）、软骨和骨破坏以及全身性症状（包括心 Chondrex 公司；甲氨蝶呤片（批号 036190309，规格 2.5
血管、肺、骨骼和心理疾病等） 。RA 是一种慢性疾病， mg/片）购自上海上药信谊药厂有限公司；肿瘤坏死因子
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可造成患者生活质量、生理功能和心理功能等的下降，对 α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）、IL-6、IL-10酶联免疫
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个人和社会都造成了沉重负担 。而研究显示，中医药在 吸 附（ELISA）检 测 试 剂 盒（批 号 分 别 为 TAE-569r、
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改善RA症状、延缓RA骨破坏等方面发挥着重要作用 。 TAE-370r、TAE-385r、TAE-371r）均购自天津安诺瑞康生
独一味系藏族习用药材，为唇形科植物独一味 物技术有限公司；苏木精-伊红（HE）染色试剂盒（批号
Lamiophlomis rotata（Benth.）Kudo 的干燥地上部分。 C0105S）购自上海碧云天生物技术有限公司；羧甲基纤
2020年版《中国药典》（一部）中记载，独一味具有活血止 维素钠（CMC-Na）购自成都市科龙化工试剂厂；其余试
血、祛风止痛的功效，用于跌打损伤、外伤出血、风湿痹 剂均为分析纯，水为超纯水。
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痛等 。目前关于独一味的研究主要集中在其活血止血 1.3 动物
的物质基础及作用机制上 [6－8] ，而对其祛风止痛功效的 本研究所用动物为健康雄性SD大鼠，共56只，5～6
研究较少。独一味祛风止痛的功效主要用于治疗风湿 周龄，体质量 120～140 g，购自重庆恩斯维尔生物科技
痹痛相关疾病，而风湿痹痛又是RA的典型特征 。王丽 有限公司[动物生产许可证号：SCXK（湘）2016-0002）]。
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娟等 以足肿胀、关节炎指数、胸腺指数、肾上腺指数、 饲养期间大鼠自由进食和饮水，予自然光照。饲养室环
足前列腺素含量为评价指标，证实了独一味能明显抑制 境温度为（22±2）℃，相对湿度为40％～70％。大鼠适
佐剂性关节炎（AA）模型大鼠原发性和继发性病变；临 应性喂养4天后进行实验。本实验方案符合西南大学实
床研究也表明，独一味对 RA 患者具有较好的临床疗效 验动物伦理审查委员会对动物伦理的要求。
和安全性 。但目前还未见基于中医药整体观的独一 2 方法
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味抗RA的药效物质基础研究报道。本课题组前期采用 2.1 独一味水提液和总黄酮的制备
网络药理学技术对独一味抗RA的药效物质基础进行了 将独一味药材剪碎至 0.5～2 cm 长短，加 5 倍量
预测，发现独一味黄酮类成分可能是其潜在活性成分 （mL/g，下同）水浸泡 1.5 h 后，再加 12 倍量水煎煮提取
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群 。鉴于此，本研究基于能体现 RA 发病机制的大鼠 1.5 h，过滤，收集滤液；滤渣再加 12 倍量水煎煮提取 1.5
AA 模型，以更丰富的评价指标对独一味水提液和总黄 h，过滤，收集滤液。合并 2 次滤液，以 80 ℃旋转蒸发仪
酮的抗RA作用进行考察，为阐明独一味抗RA的药效物 减压浓缩至质量浓度为0.5 g/mL（以生药量计），作为母
质基础及其临床应用提供参考。 液。以0.5％CMC-Na溶液稀释母液，分别得到质量浓度
1 材料 为 0.05、0.1、0.2 g/mL 的独一味水提液（以生药量计），
1.1 主要仪器 备用。
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本研究所用主要仪器有 Elx800 型酶标仪（美国 Bio 参考贾正平等 的方法制备独一味总黄酮：取适量
Tek公司）、DFC310 FX型生物显微镜（德国Leica公司）、 质量浓度为 0.5 g/mL 的独一味水提液于烧杯中，加 5 倍
MNT-150 型游标卡尺（上海美耐特实业有限公司）、 体积水，充分搅拌后，上样于已处理好的聚酰胺色谱柱；
EL240 型分析天平（瑞士 Mettler Toledo 公司）和 Elix 型 先以水洗脱至无色，然后用 70％乙醇溶液洗脱色谱柱，
超纯水仪（美国Millipore公司）等。 并收集70％乙醇洗脱液，减压浓缩，即得独一味总黄酮，
1.2 主要药品与试剂 得率为 9.91％。根据 2020 年版《中国药典》（一部）独一
独一味药材于2018年收集于青海玉树县，经重庆三 味片中总黄酮含量测定方法 进行测定，结果所制独一
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中国药房 2021年第32卷第5期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 5 ·579 ·