Page 35 - 《中国药房》2021年3期

deteriorated and the bone mass decreased；BMD，BMC，BV/TV，Tb.Th，Tb.N and biomechanical parameters of femur were
decreased significantly，while Tb.Sp and serum levels of BLAP，OPG，TRAP and CTX-Ⅰ were increased significantly（P＜0.05
or P＜0.01）. Compared with model group，the bone mass of positive control group and DMB group were increased，while the
number，thickness and shape of trabecular bone partially recovered；BMD，BMC，BV/TV，Tb.Th，Tb.N and biomechanical
parameters of femur were increased significantly（P＜0.05 or P＜0.01）；Tb.Sp，serum levels of BLAP and OPG were increased
significantly （P＜0.01）， while the levels of TRAP and CTX- Ⅰ were decreased significantly （P＜0.05 or P＜0.01）.
CONCLUSIONS：DMB can improve osteoporosis by increasing bone mass，improving bone microstructure，increasing the
expression of bone formation related indexes and biomechanical parameters and decreasing bone resorption related indexes.
KEYWORDS 6， 7-dichloro-2-methylsulfonyl-3-N-tert-butylaminoquinoxaline； Glucagon-like peptide-1 receptor； Receptor
agonist；Osteoporosis；Mice

相 关 研 究 发 现 ，肠 促 激 素 胰 高 血 糖 素 样 肽 1 为127K1005、E-8875，纯度均不低于98％），RNA微量提
（GLP-1）及其受体（GLP-1R）可参与成骨细胞和破骨细 取试剂盒（美国Promega公司，批号Z3100），逆转录试剂
胞的分化与功能调节，影响机体骨代谢平衡 [1 － 2] ，故 盒、SYBR Premix Ex Taq 酶（日本 TaKaRa 公司，批号分
GLP-1R 激动剂已成为治疗骨质疏松的候选药物。然 别为 BK1501、AKA906），橄榄油（国药集团化学试剂有
而，骨质疏松是一种慢性的、老年性疾病，患者需要长时 限公司，批号 20170422），血清骨特异性碱性磷酸酶
[3]
间使用药物进行治疗 。现有的天然 GLP-1 及肽类 （BALP）酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒（上海远慕
GLP-1R激动剂的稳定性差、制备困难且价格昂贵，加之 科技有限公司，批号 20180124），抗酒石酸酸性磷酸酶
需要注射给药，使得其临床应用受到一定限制 [4－5] 。6，7- （TRAP）ELISA试剂盒（上海酶联生物科技有限公司，批
二氯-2-磺酰烷基-3-仲烷氨基喹喔啉（6，7-dichloro-2- 号180223），骨保护素（OPG）ELISA试剂盒（深圳子科生
methylsulfonyl-3-N-tert-butylaminoquinoxaline，DMB）是 物科技有限公司，批号181031），Ⅰ型胶原蛋白C末端交
一种小分子 GLP-1R 激动剂，其合成工艺简单、稳定性 联肽（CTX-Ⅰ）ELISA试剂盒（南京信帆生物技术有限公
好、可口服，体内外研究均提示其具有降糖活性 [6－7] ；另 司，批号 180411），去离子水；其余试剂均为分析纯或实
有研究发现，其还能促进内源性 GLP-1 与其受体结合， 验室常用规格。
增强GLP-1的体内活性 。本课题组前期预实验结果显 1.3 动物
[7]
示，DMB 可显著降低去卵巢诱导的骨质疏松模型小鼠 本研究所用的动物为 SPF 级雌性 C57BL/6J 小鼠，6
的骨吸收标志物水平，并上调骨形成标志物水平。然 周龄，体质量为 13～15 g，由空军军医大学实验动物中
而，DMB 是否与肽类激动剂类似，可参与骨代谢的调 心提供，动物生产许可证号为 SCXK（陕）2014-002。所
节，目前尚未见相关研究报道。基于此，本研究探讨了 有小鼠均饲养于温度（21±2）℃、相对湿度50％、12 h光
DMB对骨质疏松模型小鼠骨微结构、骨矿密度（BMD）、 暗交替的环境下，并自由饮食、饮水。
骨矿含量（BMC）、骨形态参数、骨形成和骨吸收相关指 2 方法
标及骨生物力学参数的影响，以期为小分子 GLP-1R 激 2.1 分组、造模与给药
动剂治疗骨质疏松症提供参考依据。 将小鼠适应性喂养1周后，取40只腹腔注射戊巴比
1 材料 妥钠（40 mg/kg）进行麻醉，然后分为假手术组、模型组、
1.1 主要仪器 阳性对照组（E2，10 μg/kg）和 DMB 组（1 mg/kg），每组 10
本研究所用的主要仪器有：AL104型万分之一电子 只。其中，假手术组小鼠行双侧剖腹术但不摘除卵巢，
天平（瑞士 Mettler Toledo 公司）、SmarT-R17型高速冷冻 其余各组小鼠行双侧卵巢切除术以复制骨质疏松模
离心机（韩国 Hanil 公司）、ELx800 型全自动酶标仪（美 型。术后第4周，阳性对照组和DMB组小鼠灌胃相应药
国 BioTek 公司）、Inveon 型微计算机断层扫描（Micro- 物溶液 10 mL/kg（以橄榄油为溶剂配制，剂量参考文
CT）仪（德国 Siemens 公司）、MTS BioNix 858 Ⅱ型万能 献[7]及本课题组前期预实验结果），假手术组和模型组
材料测试仪（美国MTS公司）。 小鼠灌胃给予等体积橄榄油，每日1次，连续给药8周。
1.2 主要药品与试剂 2.2 小鼠股骨骨微结构、BMD、BMC 和骨形态参数
本研究所用的主要药品与试剂有：DMB对照品（北 检测
京亿思研科技开发中心，纯度≥98％），戊巴比妥钠原料 各组小鼠末次给药后，腹腔注射戊巴比妥钠（40
药、17β-雌二醇（E2 ）原料药（美国 Sigma 公司，批号分别 mg/kg）进行麻醉，并通过 Micro-CT 仪扫描其股骨的微

中国药房 2021年第32卷第3期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 3 ·285 ·