Page 84 - 《中国药房》2020年第24期

黄芪总皂苷高、低剂量组大鼠分别灌胃黄芪总皂苷252、
28 mg/（kg·d）[在结合黄芪的临床用量以及参考文献[14]
的基础上，根据提取工艺 的黄芪总皂苷得率折合后确
[9]
定的剂量；以总皂苷量计，用水溶解]，正常组和模型组
大鼠均灌胃等体积水。每天1次，连续给药21 d。
2.2 大鼠一般情况观察
实验过程中，观察大鼠的精神状态、活动情况、摄食
量、体质量、二便形态以及鼻、唇、耳、爪皮毛色泽等外
观、行为的变化。
2.3 大鼠负重力竭游泳时间测定
实验结束前 1 天，按“2.1”项下方法操作，大鼠尾部
负 5％体质量的重物后在恒温水槽中进行力竭游泳实
验，记录其负重力竭游泳时间。
2.4 实验取材及处理
末次给药结束后，称定各组大鼠体质量，然后禁食
不禁水 12 h。次日，采用 10％水合氯醛（3 mL/kg）腹腔
注射麻醉大鼠后，腹主动脉取血，将部分血样在 4 ℃条
件下以 3 000 r/min 离心 15 min，吸取上层血清，分装后
置于－80 ℃冰箱中保存，待测。取血后将大鼠处死，摘
取大鼠新鲜胸腺、脾、肝组织，用冰冷生理盐水冲洗，滤
纸吸干，迅速称定质量；在冰块上取肝、脾组织约 0.5 g，
按 1∶9（g/mL）的比例准确加入磷酸盐缓冲液（PBS）制备
组织匀浆，置于－80 ℃冰箱中保存，待测；剩余组织在液
氮中快速冷冻，再转入－80 ℃冰箱中保存，待测。
2.5 指标检测
根据各组大鼠实验结束时的体质量和各脏器质量
计算其脏器指数：脏器（胸腺、脾）指数＝脏器（胸腺、脾）
质量（mg）/体质量（g）。采用相应生化试剂盒检测各组
大鼠血清中乳酸、MDA、SOD、ALB水平；采用全自动生
化分析仪检测各组大鼠全血的红细胞计数（RBC）、血红
蛋白（HGB）水平；采用 ELISA 法检测各组大鼠血清中
CK、LDH水平，肝组织匀浆中ATP、ADP水平，脾T淋巴
细胞亚群CD3、CD4水平以及血清中IL-2、IL-12、TNF-α
水平。各指标检测方法均严格按照相应试剂盒或仪器
说明书进行。
2.6 统计学方法
采用SPSS 21.0软件对数据进行统计分析。试验数
据采用 x±s 表示，多组间比较采用单因素方差分析，方
差齐性时两组间比较采用LSD检验，方差不齐时两组间
比较采用 Tamhanes T2 检验。P＜0.05 表示差异具有统
计学意义。
3 结果
3.1 大鼠一般情况
与正常组比较，模型组大鼠精神萎靡，活动量显著
减少，皮毛蓬松、无光泽，鼻尾色淡，有缩肩拱背的现象，
行动迟缓，表明气虚模型造模成功。各给药组大鼠的一
般情况均趋于正常，表明给药后各给药组大鼠的气虚症
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状有所改善。
3.2 黄芪总皂苷对气虚模型大鼠体质量及免疫相关指
标的影响
与正常组比较，模型组大鼠体质量、胸腺指数、脾指
数和脾 T 淋巴细胞亚群 CD3 水平均显著降低（P＜0.05
或 P＜0.01）；与模型组比较，阳性对照组和黄芪总皂苷
高剂量组大鼠体质量以及黄芪总皂苷高剂量组大鼠脾
指数、脾 T 淋巴细胞亚群 CD3 水平均显著升高（P＜
0.05）；与阳性对照组比较，黄芪总皂苷高剂量组大鼠脾
指数和脾 T 淋巴细胞亚群 CD3 水平有显著升高（P＜
0.05）；与黄芪皂苷高剂量组比较，黄芪皂苷低剂量组大
鼠各指标水平差异均无统计学意义（P＞0.05）；各组大
鼠脾 T 淋巴细胞亚群 CD4 水平差异均无统计学意义
（P＞0.05）。各组大鼠体质量和免疫相关指标测定结果
见表1。
表1 各组大鼠体质量和免疫相关指标测定结果（x±±s，
n＝8）
Tab 1 Results of body weight and immunity-related
indexes of rats in each group（x±±s，n＝8）
胸腺指数， 脾指数， T淋巴细胞亚 T淋巴细胞亚
组别 体质量，g
mg/g mg/g 群CD3，ng/mg 群CD4，ng/mg
正常组 328.71±18.34 1.99±0.39 2.42±0.49 12.36±2.99 67.41±9.04
＊
模型组 234.14±15.65 ＊＊ 1.64±0.21 1.93±0.29 ＊ 6.90±2.77 ＊ 67.49±21.12
阳性对照组 247.71±11.95 # 1.73±0.38 1.93±0.34 6.20±1.63 63.04±7.18
黄芪总皂苷高剂量组 248.75±14.04 # 1.73±0.18 2.26±0.40 #Δ 12.86±4.66 #Δ 66.00±22.19
黄芪总皂苷低剂量组 239.75±17.14 1.84±0.46 2.12±0.33 10.73±5.41 63.72±15.96
#
＊
注：与正常组比较， P＜0.05， P＜0.01；与模型组比较，P＜
＊ ＊
0.05；与阳性对照组比较，P＜0.05
Δ
Note：vs. normal group， P＜0.05， P＜0.01；vs. model group，
＊
＊ ＊
# P＜0.05；vs. positive control group，P＜0.05
Δ
3.3 黄芪总皂苷对气虚模型大鼠负重力竭游泳时间和
肝组织中ATP、ADP水平的影响
与正常组比较，模型组大鼠的负重力竭游泳时间显
著缩短（P＜0.01），肝组织中 ATP、ADP 水平显著降低
（P＜0.05 或 P＜0.01）；与模型组比较，各给药组大鼠的
负重力竭游泳时间均显著性延长（P＜0.01），黄芪总皂
苷高、低剂量组大鼠肝组织中 ATP、ADP 水平均显著升
高（P＜0.05 或 P＜0.01）；与阳性对照组比较，黄芪总皂
苷高剂量组大鼠的负重力竭游泳时间显著延长（P＜
0.01），肝组织中ATP水平显著升高（P＜0.01）；与黄芪总
皂苷高剂量组比较，黄芪总皂苷低剂量组大鼠的负重力
竭游泳时间显著缩短（P＜0.01），肝组织中 ATP 水平显
著降低（P＜0.01）。各组大鼠的负重力竭游泳时间和肝
组织中ATP、ADP水平测定结果见表2。
3.4 黄芪总皂苷对气虚模型大鼠血清中ALB和全血中
RBC、HGB水平的影响
与正常组比较，模型组大鼠血清中ALB水平显著降
低（P＜0.05），全血中RBC、HGB水平差异均无统计学意
义（P＞0.05）；与模型组比较，阳性对照组和黄芪总皂苷
中国药房 2020年第31卷第24期