Page 78 - 《中国药房》2020年第24期
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选择中位数法生成对照图谱(R)。15 批仙鹤草药材的                          2.4 15批仙鹤草浸出物含量和药材特征图谱总峰面积
        HPLC叠加特征图谱见图2,对照图谱(R)见图3A。                          的测定和两者相关性分析
                                                            2.4.1 15 批仙鹤草浸出物含量和药材特征图谱总峰面
                                                            积的测定      取15批不同产地仙鹤草药材,采用“2.2.4”项
                                                    S1
                                                   S2
                                                  S3        下所得最佳提取工艺(50%乙醇、热浸法)提取,并按
                                                  S4
                                                 S5
                                                 S6        “2.2.2”项下方法测定并计算浸出物含量;同时,取上述
                                                S7
                                               S8
                                               S9           不同产地仙鹤草药材,按“2.3”项下方法检测,获得特征
                                              S10
                                              S11
                                             S12            图谱总峰面积,结果见表5。
                                            S13
                                            S14             表5 15批仙鹤草浸出物含量和药材特征图谱总峰面积
                                           S15
            0  10  20  30  40  50  60  70  80  90  100           测定结果
                          t,min
                                                            Tab 5 Results of extract content and total peak area
             图2 15批仙鹤草药材HPLC叠加特征图谱
                                                                   of characteristic chromatogram of 15 batches
        Fig 2 HPLC superimposition chromatogram of 15
                                                                   of A. pilosa
               batches of A. pilosa
                                                                    浸出物含   每1 g药材特征图         浸出物含  每1 g药材特征图
                                                            编号  产地                   编号  产地
               120                                                   量,%    谱总峰面积             量,%    谱总峰面积
               100                                          S1  安徽   22.22   239 367  S9  四川  15.16   118 018
               80                                           S2  安徽   17.99   179 744  S10  河南  15.25  139 424
              mAU  60                                       S3  安徽   22.49   230 648  S11  河南  19.53  142 357
               40
                                                            S4  浙江   19.22   167 312  S12  河南  18.12  130 043
               20
                                                            S5  浙江   18.69   160 803  S13  江苏  20.69  195 262
                0
                                                            S6  浙江   18.40   172 895  S14  江苏  17.42  155 381
                 0  10  20  30  40  50  60  70  80  90  100
                                 t,min                      S7  四川   17.97   156 931  S15  江苏  21.14  158 966
                          A.仙鹤草药材对照图谱(R)                    S8  四川   13.43    88 193
               80                                               采用SPSS 25.0软件对不同产地的15批仙鹤草的浸
               60                                           出物含量、药材特征图谱总峰面积进行单因素方差分
              mAU  40                                       析,P<0.05 为差异有统计学意义。对不同产地仙鹤草
               20                                           样品(每个地区各3批)的测定结果取平均值后显示,其
                0                                           浸出物平均含量、药材平均特征总峰面积均有显著差
                 0  10  20  30  40  50  60  70  80  90  100  异:安徽、江苏产仙鹤草的浸出物平均含量、药材特征图
                                 t,min
                             B.混合对照品溶液                      谱平均总峰面积均显著高于四川产仙鹤草,差异均有统
            注:2.鞣花酸;6.槲皮苷;11.芹菜素;12.山柰酚                     计学意义(P<0.05或P<0.01);安徽产药材特征图谱平
            Note:2. ellagic acid;6. quercetin;11. apigenin;12. kaempferol  均总峰面积也显著高于浙江、河南产仙鹤草,差异均有
        图3    仙鹤草药材对照图谱(R)及混合对照品溶液的色                        统计学意义(P<0.05 或 P<0.01)。不同产地的仙鹤草
              谱图                                            浸出物平均含量排序为:安徽>江苏>浙江≈河南>四
        Fig 3  Reference chromatogram(R)of A. pilosa and    川;药材特征图谱平均总峰面积排序为:安徽>江苏≈
               chromatogram of mixed control                浙江>河南>四川。综上,以安徽产仙鹤草药材质量整
                                                            体较优,详见图4。
        2.3.2  相似度评价       采用《中药色谱指纹图谱相似度评
                                                            2.4.2  相关性分析      采用SPSS 25.0软件对15批仙鹤草
        价系统(2012 版)》,以仙鹤草药材对照图谱为参照进行
                                                            浸出物含量、药材特征峰总峰面积进行 Pearson 相关性
        15 批样品的整体相似度评价。结果显示,15 批仙鹤草
                                                            分析。结果显示,浸出物含量与药材特征峰总峰面积呈
        (编号:S1~S15)的相似度依次为 0.965、0.993、0.992、
                                                            显著相关(P<0.01)。以浸出物含量为横坐标(X,%)、
        0.993、0.990、0.994、0.977、0.946、0.954、0.966、0.985、
                                                            药材特征图谱总峰面积为纵坐标(Y),采用Prism 8.01软
        0.995、0.926、0.984、0.964,均大于 0.92,且与对照图谱具
                                                            件绘制线性曲线(见图 5),并求得线性关系方程:Y=
        有较好的一致性,表明药材批间差异较小、质量稳定性
                                                            13 159X-81 273(r=0.86)。结果表明,仙鹤草浸出物含
        较好。                                                 量与药材特征图谱总峰面积呈正相关。
        2.3.3  特征峰的指认        15批仙鹤草药材样品共有12个                2.5 熵权TOPSIS法综合评价仙鹤草药材质量
        共有特征峰,取“2.1.2①”项下混合对照品溶液,按                              采用熵权 TOPSIS 法     [18-20] 综合评价仙鹤草药材质
       “2.1.1”项下色谱条件进样测定,记录色谱图。通过与此                         量。15批仙鹤草药材中共有12个共有特征峰(4个特征
        对照品图谱比对,指认了仙鹤草对照图谱(R)中的 2 号                         峰被指认),以其中的 6 号峰(槲皮苷)作为参照峰(S),
        峰为鞣花酸、6号峰为槲皮苷、11号峰为芹菜素、12号峰                         计算得各特征峰的相对峰面积和相对保留时间,详见表
        为山柰酚。混合对照品溶液色谱图见图3B。                                6、表7。


        ·3016 ·  China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 24                                 中国药房    2020年第31卷第24期
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