Page 31 - 《中国药房》2020年23期

HPLC-DAD-ELSD 法测定黄芪经九州虫草双向固体发酵前后 8

种成分的含量 Δ

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杜以晴 ，于钦辉，文 冉，菅彤彤，容 蓉，吕青涛，张国英（山东中医药大学药学院，济南 250355）
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中图分类号 R283 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2020）23-2841-06
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.23.05

摘 要 目的：建立同时测定黄芪经九州虫草双向固体发酵前后毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪皂苷Ⅳ、异
黄芪皂苷Ⅱ、环黄芪醇、异黄芪皂苷Ⅰ等8种成分含量的方法，并探讨发酵处理对黄芪中上述8种成分含量的影响。方法：采用高
效液相色谱-二极管阵列检测器-蒸发光检测器联用技术（HPLC-DAD-ELSD）进行含量测定。色谱柱为Agilent 5 TC-C18；流动相为
0.1％甲酸水溶液（A）-乙腈（B），梯度洗脱；流速为1 mL/min；柱温为30 ℃；DAD检测波长为260 nm；ELSD蒸发管温度为100 ℃；
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雾化器温度为 80 ℃；载气流速为 1.6 L/min；进样量为 15 μL。结果：8 种成分在各自质量浓度范围内线性关系良好（R 均大于
0.999 0）；精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于3％（n＝3或n＝6）；平均加样回收率为97.88％～101.32％，RSD为1.22％～
2.39％（n＝6）。以未发酵黄芪中相应成分含量为100％计算，经九州虫草双向固体发酵后，黄芪中毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊
异黄酮、芒柄花素、黄芪皂苷Ⅳ、异黄芪皂苷Ⅱ、环黄芪醇、异黄芪皂苷Ⅰ的含量变化率分别为－98.51％、－96.41％、－94.74％、
－96.40％、289.20％、20.25％、－75.05％、562.46％。结论：黄芪经过九州虫草发酵后，有利于增加其主要活性成分黄芪皂苷Ⅳ、异
黄芪皂苷Ⅰ、异黄芪皂苷Ⅱ的含量。
关键词 黄芪；九州虫草；双向固体发酵；高效液相色谱-二极管阵列检测器-蒸发光检测器联用技术；含量测定
Content Determination of 8 Components in Astragalus membranaceus before and after Bidirectional Solid
Fermentation with Cordyceps kyushuensis by HPLC-DAD-ELSD
DU Yiqing，YU Qinhui，WEN Ran，JIAN Tongtong，RONG Rong，LYU Qingtao，ZHANG Guoying（School of
Pharmacy，Shandong University of TCM，Jinan 250355，China）

ABSTRACT OBJECTIVE：To establish a method for simultaneous determination of calycosin glucoside，ononin，calycosin，
formononetin，astragaloside Ⅳ，isoastragaloside Ⅱ，cycloastragenol and isoastragaloside Ⅰ in Astragalus membranaceus before
and after bidirectional solid fermentation with Cordyceps kyushuensis，and to investigate the effects of fermentation on the contents
of above 8 components in A. membranaceus. METHODS：HPLC-DAD-ELSD was adopted. The determination was performed on
Agilent 5 TC-C18 column with mobile phase consisted of 0.1％ formic acid aqueous solution-acetonitrile（gradient elution）at the
flow rate of 1 mL/min. The column temperature was set at 30 ℃. DAD detection wavelength was set at 260 nm，ELSD evaporation
tube temperature was 100 ℃，atomizer temperature was 80 ℃，carrier gas flow rate was 1.6 L/min；injection volume was 15 μL.
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RESULTS：The eight components had a good linear relationship within their respective ranges of concentration（all R ＞0.999 0）；
RSDs of precision，stability and repeatability tests were all less than 3％（n＝3 or n＝6）；the recoveries was 97.88％-101.32％，
and RSDs were 1.22％ -2.39％ （n＝6）. Setting the content of components in unfermented A. membranaceus as 100％ ，after
bidirectional solid fermentation with C. kyushuensis，the change rates of 8 components were －98.51％，－96.41％，－94.74％，
－96.40％，289.20％，20.25％，－75.05％，562.46％，respectively. CONCLUSIONS：After fermentation with C. kyushuensis，the
contents of active components as astragaloside Ⅳ ，isoastragaloside Ⅰ and isoastragaloside Ⅱ can be increased significantly in
A. membranaceus.
KEYWORDS Astragalus membranaceus；Cordyceps kyushuensis；Bidirectional solid fermentation；HPLC-DAD-ELSD；Content
determination

黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus 统补气要药之一。黄芪含有皂苷类、黄酮类、多糖类和
（Fisch.）Bge. var. mongholicus（Bge.）Hsiao 或膜荚黄芪 氨基酸类等有效成分 ，具有增强免疫功能、保护心脏、
[2]
Astragalus membranaceus（Fisch.）Bge.的干燥根 ，是传 双向调节血压、降血糖、抗衰老、抗肿瘤、抗病毒、抗过敏
[1]
Δ 基金项目：国家自然科学基金资助项目（No.21807066） 性鼻炎和保护神经等作用 [3-4] ，在临床上广泛应用于治疗
＊硕士研究生。研究方向：中药及复方活性成分与质量控制研
病毒性心肌炎、糖尿病、肝纤维化、肿瘤、上呼吸道感染
究。E-mail：1638558099@qq.com
[5]
等病症 。
# 通信作者：副教授，博士。研究方向：药用真菌活性成分研究。
E-mail：zhangguoying2000@126.com 九州虫草 Cordyceps kyushuensis Kob 为寄生于豆天

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