Page 51 - 《中国药房》2020年22期
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        剂量 。各药物组小鼠每日灌胃相应药物 1 次，连续给                         3 结果
        药6周，每周根据体质量调整给药量；正常组和模型组小                          3.1  滇黄芩醇提物及其不同溶剂萃取部位对CCl4致肝
        鼠同法灌胃等体积生理盐水。                                      损伤模型小鼠一般情况的影响
        2.3 一般情况观察                                             造模前，小鼠活动正常，反应迅速，毛发浓密有光
            记录各组小鼠实验期间一般情况的变化。                             泽。造模后（给药前），随着造模时间的延长，除正常组
        2.4 血清TC、TG、AST、ALT检测                              外其余各组小鼠活动逐渐减少，精神萎糜，毛发蓬乱无
            末次给药后1 h，各组小鼠摘眼球取血，将收集到的                       光泽，常蜷缩于垫料中而卧且饮食量减少；其中以模型
        血液标本于 37 ℃保温 30 min，以 3 000 r/min 离心 10            组小鼠最为明显，主要表现为精神萎糜、行动迟缓、毛发
        min，分离血清，用酶标仪检测各组小鼠血清中 TC、TG、                      稀疏无光泽、体型消瘦其给药前及给药第1、2周体质量
        AST、ALT的含量。严格按照相应试剂盒说明书操作。                         均较正常组显著降低（P＜0.05 或 P＜0.01）。而经药物
        2.5 肝组织形态学观察                                       干预2周后，各给药组小鼠的摄食和饮水量开始恢复正
            采血后迅速处死小鼠，取出肝脏，剪取相同位置的                         常，体质量开始增加，毛发密度有所增加，行动较为敏
        肝组织适量，用4％多聚甲醛溶液固定24 h以上，经常规                        捷；其中SA-A组较其他组别改善较为明显，肉眼观察更
        石蜡包埋，切片（厚度约5～8 μm），以HE染色后置于显                       接近于正常组，但各药物各时间点体质量与模型组比较
                                                [15]
        微镜下观察并采集图像。根据 Ishak 评分系统 对门管                       差异均无统计学意义（P＞0.05）。各组小鼠体质量变化
        区周围或周围间隔区交界面肝炎（碎片状坏死）、融合性                          见表2。
        坏死、局灶性（斑状）溶解性坏死、凋亡及局灶性炎症、门                         表2    滇黄芩醇提物及其不同溶剂萃取部位对CCl4致肝
        管区炎症等 4 个项目进行评分，总分最高 18 分。其中，                            损伤模型小鼠体质量的影响（x±±s，n＝8）
        总分0～6分为轻度、7～12分为中度、13～18分为重度，                      Tab 2  Effects of S. amoena ethanol extract and its dif-
        详见表1。                                                     ferent solvent parts on body weight of CCl4-in-
                 表1    小鼠肝组织Ishak评分系统                             duced liver injury model mice（x±±s，n＝8）
              Tab 1  Ishak score of liver tissue in mice   组别      给药前  给药第1周 给药第2周 给药第3周 给药第4周 给药第5周 给药第6周
                                                           正常组   52.25±3.59 52.84±3.75 52.90±3.14 53.03±3.98 53.78±4.57 54.08±4.00 53.34±3.16
        项目                      细则                  评分，分   模型组   47.84±2.35 48.14±2.38 48.88±2.30 48.81±2.11 50.28±3.24 50.84±2.73 50.64±4.05
                                                                             ＊
                                                                                   ＊
                                                                      ＊＊
        门管区周围或周围间隔区交界面肝炎（碎片状坏死） 无                    0     水飞蓟宾组 47.49±1.75 49.99±2.86 50.90±3.39 51.24±3.66 51.51±4.19 51.73±4.32 51.19±4.09
                                轻微（局灶性，少数门管区）        1
                                                           SA组   47.58±2.13 50.86±1.61 51.71±2.03 52.96±2.53 53.54±1.91 53.98±2.30 52.91±2.51
                                轻微/中等（局灶性，大多数门管区）    2     SA-A组  47.74±2.45 50.65±3.82 50.73±4.31 50.45±4.16 50.78±3.71 50.86±3.30 51.88±3.15
                                中等（连续性，＜50％的门管区及间隔区）  3    SA-B组  47.78±3.71 49.55±4.13 50.66±4.28 51.34±4.30 52.36±3.94 52.75±4.86 52.65±2.81
                                严重（连续性，＞50％的门管区及间隔区）  4
                                                                                  ＊＊
                                                                           ＊
        融合性坏死                   无                    0         注：与正常组比较，P＜0.05， P＜0.01
                                局灶性融合性坏死             1         Note：vs. normal group，P＜0.05， P＜0.01
                                                                              ＊
                                                                                     ＊＊
                                部分区域 3区坏死            2     3.2  滇黄芩醇提物及其不同溶剂萃取部位对CCl4致肝
                                大多数区域3区坏死            3
                                3区坏死+偶见门管区-中心静脉（P-C）桥接  4  损伤模型小鼠血清TC、TG、ALT、AST含量的影响
                                3区坏死+多发性 P-C桥接       5         与正常组比较，模型组小鼠血清中 TC、TG、ALT、
                                全小叶或多发性小叶坏死          6     AST 含量均显著增高（P＜0.05 或 P＜0.01）。与模型组
        局灶性（斑状）溶解性坏死/凋亡及局灶性炎症   无                    0
                                每10 倍视野下有1个坏死区或更少    1     比较，水飞蓟宾组和 SA-A 组小鼠血清中 TC、ALT、AST
                                每10倍视野下有 2～4个坏死区     2     含量以及各药物组小鼠血清中TG含量均显著降低（P＜
                                每10倍视野下有5～10个坏死区     3
                                每10倍视野下有10个以上坏死区     4     0.01 或 P＜0.05）；而 SA 组小鼠血清中 TC、ALT、AST 含
        门管区炎症                   无                    0     量以及SA-B组小鼠血清中TC、TG、ALT、AST含量与模
                                轻度，部分或所有门管区          1     型组比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），详见图1。
                                中度，部分或所有门管区          2
                                中度/严重，所有门管区          3     3.3  滇黄芩醇提物及其不同溶剂萃取部位对CCl4致肝
                                严重，所有门管区             4     损伤模型小鼠肝组织形态学的影响
        2.6 统计学方法                                          3.3.1  肝组织形态学观察          正常组小鼠肝组织未见明
            采用 GraphPad Prism 5.0 和 SPSS 18.0 软件对数据        显病理形态学改变，肝小叶内细胞排列整齐，结构清晰
        进行统计分析。计量资料以x±s表示，多组间比较采用                          完整，未见明显炎症细胞浸润；肝细胞大小均匀，以中央
        单因素方差分析；方差性齐时组间两两比较采用LSD检                          静脉为中心呈放射状排列，汇管区无纤维组织增生。模
        验，不齐性时采用非参数检验。P＜0.05 为差异有统计                        型组小鼠肝组织出现明显的病理形态改变，肝索排列紊
        学意义。                                               乱，细胞结构受到严重破坏，结构不清晰，炎症细胞浸润


        中国药房    2020年第31卷第22期                                            China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 22  ·2733 ·
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