Page 50 - 《中国药房》2020年22期
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and AST in silybin group and S. amoena ethyl acetate group,serum contents of TG in administration groups as well as Ishak scores
of liver tissue were decreased significantly in silybin group,S. amoena ethanol extract group and S. amoena ethyl acetate group
(P<0.05 or P<0.001). CONCLUSIONS:S. amoena ethanol extract and its different solvent parts can protect liver tissue of
CCl4-induced liver injury model mice,and active part is the ethyl acetate part of S. amoena.
KEYWORDS Scutellaria amoena;Ethanol extract;Solvent parts;CCl4;Liver injury;Mice
肝损伤是多种慢性肝脏疾病的共同病理过程,表现 20180919)、丙氨酸转氨酶(ALT,批号:20180921)检测
为肝内细胞外间质成分过度堆积,并影响肝脏功能 。 试剂盒均购自南京建成生物工程研究所;水飞蓟宾胶囊
[1]
肝损伤的病因较多,主要包括化学性、免疫性、药物性、 (阳性对照,天津天士力圣特制药有限公司,批号:
酒精性肝损伤等,是肝硬化、肝癌发生的重要始动因素, 20180813,规格:35 mg);橄榄油[上海益民食品一厂(集
现已成为一种严重威胁人类健康的疾病 [2-3] 。四氯化碳 团)有限公司,批号:20170515,规格:750 mL];苏木精-
(CCl4 )肝损伤模型是一个较为经典的模型,其损伤机制 伊红(HE)染色试剂(武汉赛维尔科技有限公司,批号:
与人类病毒性肝炎类似,主要是因 CCl4进入机体后,产 G1005);0.9%氯化钠注射液(广西裕源药业有限公司,
生氯仿自由基(CCl3 ·),继而引起肝组织细胞脂质过氧 批号 H180616,规格:500 mL ∶ 4.5 g;作生理盐水用);
化,最终对细胞膜和细胞器造成损伤 [4-5] 。 CCl4、乙酸乙酯、正丁醇均为分析纯,乙醇为工业级(云
中药具有历史悠久、来源丰富、毒性较低等特点,是 南杨林工业开发区汕滇药业有限公司),水为蒸馏水。
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缓解肝损伤的研究热点之一 。滇黄芩为唇形科黄芩属 1.3 动物
植物滇黄芩 Scutellaria amoena C. H. Wright 的干燥根 SPF 级雄性昆明种小鼠 48 只,周龄 6~8 周,体质量
茎,分布在云南、四川、贵州等地区,是西南地区广泛使 20~24 g,购自成都达硕实验动物有限公司,动物生产许
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用的民族药 。在彝医古籍《聂苏诺期》《启谷属》以及 可证号:SCXK(川)2015-030。所有小鼠均饲养于温度
《云南本草》《云南民族药大辞典》中都有记载。该药性 22~24 ℃、相对湿度 50%~60%的环境中,自由饮水、
寒、味苦,归肺、肝、胆、胃、大肠经,具有清肺胃热、燥湿 摄食,适应性饲养1周后开始后续实验。
气、消炎、解毒、安胎、止血等功效,彝医常用于治疗泄 2 方法
痢、腮肿、肺咳、肝痛、传染性肝炎等 [8-9] 。目前,有关滇黄 2.1 滇黄芩提取物及其不同溶剂萃取部位的制备
芩药理活性的研究报道有限。刘海鸥等 发现,滇黄芩 取滇黄芩药材,粉碎成粗粉;取粗粉 200 g,用 95%
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总黄酮具有较强的抗氧化活性;何晓山等 [11-12] 研究发现, 乙醇 2 000 mL 加热回流提取 3 次,每次 2.5 h;合并提取
滇黄芩醇提物具有抗心律失常的作用,能阻滞豚鼠心肌 液,经减压蒸馏回收得乙醇浸膏(浸膏得率为 7.62%),
细胞钠通道,有望成为稳定的豚鼠心肌组织钠通道阻断 经冷冻干燥,即得醇提物(SA)。取上述醇提物适量,加
适量水溶解,形成混悬液后依次用乙酸乙酯、正丁醇各
剂。为进一步探寻滇黄芩的活性成分,本研究采用CCl4
致肝损伤大鼠模型,研究滇黄芩醇提物及其不同溶剂萃 200 mL进行萃取,分别萃取5次;合并相同萃取部位,回
取部位对肝损伤模型大鼠的保护作用,为阐明民间用药 收萃取试剂得相应浸膏(浸膏得率分别为 45.24%、
依据及开发具有保肝作用的民族药用资源提供实验 16.15%),经冷冻干燥,得到乙酸乙酯部位(SA-A)、正丁
基础。 醇部位(SA-B)。上述提取物及萃取部位均于室温下保
1 材料 存,实验前用生理盐水稀释至相应浓度。
1.1 仪器 2.2 分组、给药与造模
Infinite M200 PRO 型酶标仪(瑞士 TECAN 公司); 从48只小鼠中随机选取8只为正常组,其余40只为
RM2016 型组织切片机(上海徕卡仪器有限公司); 造模组。正常组小鼠腹腔注射等体积橄榄油,每 3 日 1
Nikon ECLIPSE C1 正 置 显 微 镜 、Nikon Digital Sight 次,连续 6 周;造模组小鼠腹腔注射 30%CCl4橄榄油溶
DS-FI2型成像系统(日本Nikon公司)。 液,首次剂量为5 mL/kg,以后每次3 mL/kg,每3日1次,
1.2 药品与试剂 连续6周以建立肝损伤模型(根据肝组织病理切片染色
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滇黄芩药材采自云南省新平县,经云南中医药大学 情况进行判断) 。将造模成功后的小鼠随机分为模型
中药学院药用植物教研室普春霞副教授鉴定为唇形科植 组(生理盐水)、水飞蓟宾组(阳性对照,20 mg/kg)、滇黄
物滇黄芩Scutellaria amoena C. H. Wright的干燥根茎。 芩醇提物组(SA 组,100 mg/kg)、滇黄芩乙酸乙酯组
总胆固醇(TC,批号:20180919)、三酰甘油(TG,批 (SA-A 组,100 mg/kg)、滇黄芩正丁醇组(SA-B 组,100
号 :20180919)、天 冬 氨 酸 转 氨 酶(AST,批 号 : mg/kg),每组 8 只,各药物组根据前期研究确定相应的
·2732 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 22 中国药房 2020年第31卷第22期